2021-03-24; 13:46:30.

z-diser

Если Вы - умный или дурак, патриот или космополит, террорист или борец с терроризмом,

глобалист или антиглобалист, экстремист или борец с экстремизмом, педофил или педофоб, русофил или русофоб, гомофил или гомофоб, верующий или атеист, коммунист или антикоммунист, феминист или антифеминист, фашист или антифашист, защитник прав детей или защитник прав родителей,

покоритель природы или её защитник, правозащитник или правонарушитель,

наркоман или борец с наркотиками,

ПОЖАЛУЙСТА, НЕ ЧИТАЙТЕ МОЙ САЙТ.

Он не для Вас,

а для людей, у которых нет априорных установок.

ВЗАИМООТНОШЕНИЯ ПЕРЕНОСЧИКОВ И ВОЗБУДИТЕЛЕЙ МАЛЯРИИ

(Объяснение: *.html не принимает знак "от до". Пришлось заменить его на "-".)

Содержание:

Диссертация

Автореферат

Доклад

2021-03-24; 14:21:52. Сегодня я внёс следующее дополнение.

Обозначения:

КК - количество заразной крови (мкл), выпитое в среднем одним комаром;

ОО - обилие ооцист = среднее число ооцист у зараженных комаров);

ОИ - ооцистный индекс = доля (%) комаров, имеющих ооцисты;

СИ - спорозоитный индекс = доля (%) комаров, имеющих спорозоиты;

ВВ - выживаемость возбудителя СИ/ОИ (%);

ОО/КК - число ооцист, образовавшихся из 1 мкл заразной крови;

(Объяснение: *.html не принимает знак "от до". Пришлось заменить его на "-".)

ИНСТИТУТ МЕДИЦИНСКОЙ ПАРАЗИТОЛОГИИ И ТРОПИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ ИМ. Е.И. МАРЦИНОВСКОГО

______________________________________________________________

На правах рукописи

РАСНИЦЫН

Сергей Павлович

ВЗАИМООТНОШЕНИЯ ПЕРЕНОСЧИКОВ И ВОЗБУДИТЕЛЕЙ МАЛЯРИИ

Специальность: 03.00.09 - Энтомология

диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук

МОСКВА - 1997

"Сказать можно все,

а ты поди, демонстрируй."

Д.И. Менделеев.

ОГЛАВЛЕНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ

Гл. 1. КОНЦЕПЦИЯ МЕДИЦИНСКОЙ ЭНТОМОЛОГИИ

Гл. 2. ТЕРМИНЫ, МАТЕРИАЛЫ, МЕТОДЫ

2.1. Термины

2.2. Материалы

2.3. Методы

2.4. Математическая обработка результатов

Гл. 3. ЭНТОМОЛОГИЧЕСКАЯ БАЗА ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Принципы культивирования переносчиков

3.2. Выбор индикаторов и способ оценки сходства

3.3. Получение биоматериала

3.4. Создание и поддержание колоний комаров

3.5. Некоторые стороны биологии комаров, имеющие прямое отношение к передаче возбудителей болезней человека

Гл. 4. ОЦЕНКА МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ ЗАРАЖЕННОСТИ ПЕРЕНОСЧИКОВ

4.1. Оценка наличия возбудителей, их обилия и количества крови, выпитой комаром

4.2. Влияние способа кормления переносчиков кровью на их заражаемость возбудителями

4.3. Влияние порядка кормления переносчиков на доноре на их заражаемость возбудителями

4.4. Влияние обилия возбудителей на заражаемость переносчиков

Гл. 5. СВЯЗЬ ВОСПРИИМЧИВОСТИ С ТАКСОНОМИЧЕСКИМ И ГЕОГРАФИЧЕСКИМ ПОЛОЖЕНИЕМ ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИХ ОРГАНИЗМОВ

5.1. Восприимчивость переносчиков к экзотическим штаммам возбудителей

5.2. Адаптация возбудителя к переносчику

5.3. Восприимчивость без коэволюции

5.3. Сравнение восприимчивости разных видов

5.4. Обзор данных о восприимчивости комаров России и сопредельных стран к экзотическим видам и штаммам плазмодиев

Заключение главы 5

Гл. 6. ИНДИВИДУАЛЬНАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВОСПРИИМЧИВОСТИ

6.1. Распределение возбудителей среди переносчиков

6.2. Наследование восприимчивости

Заключение главы 6

Гл. 7. ВЛИЯНИЕ ЭНДОГЕННЫХ ФАКТОРОВ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ

Гл. 8. ВЛИЯНИЕ ПИТАНИЯ ПЕРЕНОСЧИКОВ НА ИХ ВОСПРИИМЧИВОСТЬ

8.1. Необходимость углеводов

8.2. Влияние количества выпитой крови

Заключение главы 8

Гл. 9. ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ РАЗВИТИЯ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ

Гл. 10. ВЛИЯНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ

Гл. 11. ПРЯМОЕ ВЛИЯНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ НА ПЕРЕНОСЧИКОВ

11.1. Влияние возбудителей на чувствительность переносчиков к инсектицидам

11.2. Влияние возбудителей на летные способности переносчиков

11.3. Влияние возбудителей на агрессивность переносчиков

11.4. Влияние возбудителей на продолжительность жизни переносчиков

11.5. Влияние возбудителей на плодовитость переносчиков

Заключение гл. 11

Гл. 12. КОСВЕННОЕ ВЛИЯНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ НА ПЕРЕНОСЧИКОВ

12.1. Влияние возбудителей на привлекательность хозяев для переносчиков

12.2. Влияние возбудителей на защищенность хозяев от переносчиков

Заключение гл. 12

Гл. 13. СОХРАНЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ В ПЕРЕНОСЧИКАХ

13.1. Влияние биологически активных веществ на сохранение возбудителей в переносчиках

13.2. Влияние повторного кровососания на сохранение возбудителей в переносчиках

Заключение гл. 13

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

ЦИТИРОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Отношения членистоногих с возбудителями болезней позвоночных, в частности, комаров с плазмодиями малярии - специфический вариант симбиоза, закономерности которого выявлены только для крупных таксономических категорий (Павловский, 1939; Беклемишев, 1948, 1949, 1955; Алексеев, 1984а, б, 1985; Балашов, 1984). Об отношениях видов, популяций и отдельных особей до начала наших работ имелись лишь отрывочные противоречивые данные. Такое положение не позволяло предвидеть, в каких случаях комары способны быть переносчиками малярии и как влияют плазмодии на их жизнедеятельность.

Ликвидировать малярию в мире не удалось (Sharma, 1988; Peters, 1988; Najera, 1989), и опасность ее завоза на освобожденные территории сохраняется (Сергиев и др., 1966; Немировская, 1969; Ambroise-Thomas et al., 1972; de Zulueta, 1973; Schultz, 1974; Чагин и др., 1975, 1976; Дашкова и др., 1978; Орлов, 1987; Духанина, Баранова, 1989). Поиск ответов на поставленные вопросы актуален и в сугубо практическом плане. Во-первых, оно позволяет определять, в каких случаях комары могут распространять необычные для них виды и штаммы плазмодиев. Во вторых, недостаток данных о жизнедеятельности зараженных переносчиков не позволяет предпринимать полностью адекватных мер по защите от них.

Поскольку изучение отношений возбудителей и переносчиков невозможно без лабораторного эксперимента, актуальной проблемой является получение материала для исследований - культивирование комаров.

Цель и задачи исследования. Цель работы - определить характер отношений переносчиков и возбудителей малярии.

Для достижения поставленной цели потребовалось решить следующие задачи:

- определить место исследования отношений возбудителей и переносчиков в круге проблем медицинской энтомологии;

- выявить те аспекты биологии комаров, знание которых необходимо для создания и поддержания их культур и для определения их отношений с плазмодиями малярии;

- разработать методы получения энтомологического материала и получить его;

- создать лабораторную модель циркуляции плазмодиев, включающую реальных переносчиков малярии человека;

- подобрать методы заражения переносчиков;

- определить точность методов оценки обилия возбудителя в хозяине и переносчике;

- выявить факторы, определяющие возможность и уровень заражения переносчиков возбудителями;

- определить влияние возбудителей на состояние и поведение переносчиков;

- определить возможности сохранения возбудителей в переносчиках.

Научная новизна.

1. Предложена концепция медицинской энтомологии, согласно которой задача этой науки - исследование влияния членистоногих на здоровье людей и управления этим влиянием.

2. Разработаны теоретические основы культивирования членистоногих:

- обеспечение безопасности путем использования моделей и экзотических видов;

- отказ от воссоздания природной обстановки, а обеспечение условий, необходимых и достаточных для воспроизводства биоматериала;

- создание градиента условий;

- оценка качества биоматериала по его стабильности и однородности;

- оптимизация культур путем снижения стоимости биоматериала при сохранении его качества и уровня производства;

- соблюдение этических норм в обращении с лабораторными животными.

3. Решен ряд общебиологических вопросов:

- разработаны принципы и методы выбора морфофизиологических индикаторов;

- разработана методология использования таксономического анализа для экологических исследований;

- показано, что эффект группы состоит из эффекта численности и эффекта концентрации особей;

- открыт "эффект приглашения" - неизвестный ранее стимул привлечения к добыче кровососущих двукрылых;

- дана оценка эффективности звуковых генераторов, предназначенных для отпугивания кровососущих двукрылых, и выявлены её причины.

4. Выявлены закономерности определяющие возможность и уровень заражения комаров возбудителями малярии:

- на уровне родов и видов отсутствует связь между систематическим положением возбудителей и переносчиков;

- восприимчивость может существовать без контакта взаимодействующих организмов;

- восприимчивость - свойство, наследуемое на уровне особей;

- восприимчивость подвержена влиянию эндогенных факторов и внешних воздействий.

5. Доказано, что плазмодии не оказывают существенного прямого влияния на важнейшие стороны жизнедеятельности комаров (чувствительность к инсектициду, полет, агрессивность, продолжительность жизни, плодовитость) и, потому, должны считаться не паразитами, а комменсалами комаров.

6. Доказано наличие косвенного влияния возбудителей на переносчиков. Оно состоит в том, что возбудитель облегчает переносчикам доступ к добыче.

7. Разработан математический метод оценки разных путей передачи для сохранения популяции возбудителя.

8. Предложен и обоснован набор принципов культивирования членистоногих:

- обеспечение безопасности путем использования моделей и местных видов;

- создание условий, необходимых и достаточных для жизни и размножения объекта, а не воспроизведение природной обстановки;

- предоставление особям градиента условий;

- оценка качества биоматериала по его стабильности и однородности, а не по сходству с природными особями;

- гуманное отношение к лабораторным животными.

Новизна результатов имеет мировой приоритет, о чем свидетельствует публикация их описаний в ведущих изданиях (Бюллетень Всемирной Организации Здравоохранения, Журнал общей биологии, Зоологический журнал, Известия РАН, Медицинская паразитология и паразитарные болезни, Паразитология, Экология, Энтомологическое обозрение), включение их в Руководство по медицинской энтомологии и получение авторских свидетельств об изобретении.

Практическая ценность.

1. Разработаны новые и усовершенствованы известные методы создания и поддержания культур комаров - базы для экспериментального изучения их экологии, отношений с возбудителям болезней и средств уничтожения.

2. Создана лабораторная модель циркуляции возбудителя малярии, которая сочетает безопасность с использованием реальных переносчиков малярии человека.

3. Отработан метод заражения комаров плазмодиями малярии путем искусственного кормления кровью.

4. Определена точность методов оценки обилия плазмодиев в крови позвоночных и в теле переносчиков.

5. Разработан метод оценки восприимчивости комаров к возбудителям малярии.

6. Определена возможность распространения на территории России и сопредельных государств экзотических видов и штаммов малярии.

7. Обоснована возможность использования в эпидемиологических моделях малярии данных о состоянии и поведении незараженных особей переносчика.

Внедрение результатов исследования в практику.

1. В Институте Медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского (ИМПиТМ) создан инсектарий - база для экспериментального изучения экологии комаров, их отношений с возбудителями болезней и средств уничтожения.

2. Воспроизведены и созданы заново культуры 10 видов комаров, в том числе 3 впервые в мире. Они переданы в инсектарий ИМПиТМ.

3. Методы культивирования комаров изложены в 4 инструкциях, утвержденных директором ИМПиТМ, в 19 публикациях, в описаниях 5 изобретений и 17 рационализаторских предложений. Эти методы используются в ИМПиТМ; с ними были ознакомлены многочисленные отечественные и зарубежные исследователи, посещавшие ИМПиТМ и обучавшиеся на рабочем месте.

4. Метод культивирования комаров Culex pipiens внедрен в ВНИИ Прикладной микробиологии и на Бердском химическом заводе.

5. За время исследований (до создания общеинститутского инсектария) произведено 2138 партий комаров 10 видов (более 5,4 миллиона особей), которые использованы для выполнения НИР в нескольких подразделениях ИМПиТМ и 22 организациях в 11 городах, и были переданы в Болгарию и Вьетнам.

6. Лабораторная модель циркуляции возбудителя малярии и метод определения восприимчивости комаров к возбудителям малярии используются в ИМПиТМ.

7. Материалы диссертации используются в теоретической и практической подготовке курсантов Российской Медицинской Академии последипломного образования.

Внедрение работ в практику подтверждено соответствующими актами, приведенными в приложении.

Положения, выносимые на защиту.

1. Принадлежность членистоногого к определенной таксономической группе не свидетельствует о том, что оно восприимчиво к определенной группе возбудителей, а лишь о том, что эту восприимчивость нельзя исключить без проверки. Внутри семейства Culicidae нет жесткой связи между таксономическим положением комаров и их восприимчивостью к возбудителям малярии.

2. Плазмодии малярии могут использовать комаров в качестве переносчиков без длительного периода предварительной взаимной адаптации.

2. Восприимчивость - количественное свойство, зависящее от индивидуальной наследственности, условий развития, внешних воздействий, количества выпитой крови и эндогенной ритмики жизни особи.

3. Уровень заражения комаров не зависит от повторного кровососания и потребления углеводов и (после превышения минимальной заражающей дозы) не имеет четкой связи с обилием заглоченных плазмодиев.

4. Плазмодии не оказывают существенного прямого влияния на важнейшие стороны жизнедеятельности комаров и, потому, должны считаться не паразитами, а комменсалами комаров.

5. Возбудители малярии оказывают на комаров косвенное влияние, повышая для них возможность обнаружения и доступность позвоночных хозяев.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на 5-ом совещании Всесоюзного энтомологического общества (1963), совещании "Актуальные вопросы изучения и освоения таежных территорий." (1963), 6-ом съезде Всесоюзного энтомологического общества (1970), 13-ом международном энтомологическом конгрессе (1971), заседаниях Московского общества испытателей природы (1975, 1980), Всесоюзной конференции "Теория классификации и анализ данных" (1981), 7-ом съезде Всесоюзного микробиологического общества (1985), Всесоюзной конференции "Пути повышения эффективности микробиологической борьбы с вредителями и болезнями растений" (1986), I-ом Всесоюзном совещании по проблемам зоокультуры (1986), I-ой научно-практической конференции "Здоровье населения России и пути его улучшения" (1994), заседаниях Московского общества эпидемиологов и микробиологов им. И.И. Мечникова (1988, 1991), Первой и Второй Всесоюзных конференциях по промышленному разведению насекомых (1986, 1989), Ученом Совете ИМПИТМ (1994), коллоквиумах отдела медицинской энтомологии ИМПИТМ (по несколько раз ежегодно).

Публикации. Результаты работы отражены в 76 публикациях, а также в описаниях 17 рационализаторских предложений.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 261 странице машинописного текста и состоит из введения, 13 глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 481 источник, из которых 236 отечественных и 245 иностранных авторов, и приложения. Работа иллюстрирована 82 таблицами и 17 рисунками.

Благодарности. В первую очередь благодарю Кружок юных биологов зоопарка, Е.С. Смирнова и В.Н. Беклемишева, научившим меня относится к науке не как набору знаний, а как полю деятельности. Глубокая и искренняя признательность директорам ИМПиТМ П.Г.Сергиеву, Ф.Ф.Сопрунову, В.П.Сергиеву, М.Н.Лебедевой и заведующим отделом мед. энтомологии А.Н.Алексееву и Л.А.Ганушкиной за поддержку данного направления.

Большое спасибо С.А.Рабинович за то, что дала P.gallinaceum, и М.И.Букатиной за обучение работе с ним.

Всегда буду помнить и ценить помощь сотрудников: Т.Л.Абрамовой, Р.Г.Абрашкина-Жучкова, А.Н.Бикуновой, Л.М.Витлина, А.А.Войцика, Н.Г.Дашковой, В.Т.Деминой, А.Н.Егоровой, А.Н.Жаровой, В.В.Жерихина, А.Б.Званцова, Л.А.Казанцева, А.Г.Креславского, Н.Н.Лебедевой, А.С.Матяж, А.Н.Опариной, Е.В.Сыроечковского, Г.А. Шевелевой, В.В.Ясюкевича, работавших со мной дни и ночи в поле и в лаборатории.

Глава. 1. КОНЦЕПЦИЯ МЕДИЦИНСКОЙ ЭНТОМОЛОГИИ.

До последнего времени энтомологи, как правило, не занимались изучением отношений возбудителей и переносчиков, поскольку данная проблема, казалось, лежит вне этой науки, ведь согласно определению: "Медицинская энтомология изучает членистоногих, вредящих здоровью человека. Вредить здоровью человека членистоногие могут тремя способами: как паразиты человека, как переносчики болезней и как ядовитые животные" (Беклемишев, 1949, стр. 139). Это определение повторяется во всех энциклопедиях, учебниках и руководствах вплоть до самых последних (Дербенева-Ухова, 1974; Заречная, 1975; Биологический энциклопедический словарь, 1986; Тарасов, 1996). Следуя такому определению, работа медицинских энтомологов сосредоточились на изучении тех видов, вредоносность которых установлена, в плане, традиционном для энтомологии: систематика, фаунистика, экология, этология и т.п.

Благодаря успехам, достигнутым медицинской энтомологией в прошлом, в настоящее время она может выйти на новый, более высокий уровень, который удовлетворит современные запросы теории и практики. Дело в том, что членистоногие могут оказывать не только вредное, но и оздоровительное влияние. Надо учитывать их как факторов комфорта, аллергизаторов, источников лекарственных средств и т.п. Но, самое главное, мы не только сейчас, но и в принципе не можем предусмотреть все аспекты действия членистоногих на здоровье людей; это - проблема, открытая до тех пор, пока люди и членистоногие сосуществуют.

Пришло время расширить понимание медицинской энтомологии. Целесообразно принять следующее определение: "Медицинская энтомология" - наука, изучающая влияние членистоногих на состояние человека и способы управления этим влиянием (Расницын, 1996, 1997). При таком подходе виды членистоногих (объекты изучения) выступают не как заданный набор, а как результат специальных исследований, достигнутый к определенному моменту времени. Медицинская энтомология в старом смысле слова ("изучение членистоногих") становится необходимой составной частью, но не как единственное занятие и, тем более, не как цель, а как одно из средств. Законное место в медицинской энтомологии получает использование членистоногих для охраны здоровья людей и разработка способов защиты от их вредоносного действия, в том числе, и в качестве переносчиков болезней. Согласно предложенной концепции медицинский энтомолог, не только "имеет право" на изучение отношений возбудителей и переносчиков, но эта проблема (ввиду важности трансмиссивных инфекций) является для него одной из главных. Профессия исследователя сказывается на подходе к вопросу и истолковании результатов. Энтомологический подход позволил обнаружить в отношениях переносчиков и возбудителей то, на что иные специалисты не обращали внимания.

К началу наших работ проблема возбудителей и переносчиков выглядела решенной. Была установлена связь между систематическим положением возбудителей и переносчиков (Беклемишев, 1948); классифицированы типы переноса (Беклемишев, 1949, 1955); сформулировано учение о природной очаговости (Павловский, 1939). Позднее была выявлена роль морфофизиологических особенностей кровососущих членистоногих в передаче возбудителей инфекций (Балашов, 1984) и, наконец, все это увенчала "Теория связи типов питания и пищеварения кровососущих членистоногих с их способностью быть специфическими переносчиками возбудителей трансмиссивных инфекций" (Алексеев, 1984а, б, 1985), которая объясняла восприимчивость фундаментальными свойствами крупных таксонов: семейств, отрядов, классов и выше. Поскольку было признано, что восприимчивость формируется в процессе длительной коэволюции взаимодействующих организмов, это свойство считалось неизменным. Лишь много позже, обнаружив, что оно зависит от внешних воздействий, проф. А.Н. Алексеев опубликовал специальную работу: "Экспериментальные доказательство возможности управления векторной способностью переносчиков плазмодиев малярии" (Алексеев, Ганушкина, 1988). Вопрос о влиянии возбудителя на переносчика также не вызывал сомнений. Микроорганизм однозначно считался вредоносным для макроорганизма (Бибикова, Бгытова, 1968), их сочетание именовалось "паразитарной парой", их набор - "паразитокосмосом" (Алексеев, 1989). Существование возбудителя считалось возможным лишь за счет круговорота между членистоногими и позвоночными хозяевами (Павловский, 1940). Задача дальнейших исследований, виделась лишь в том, чтобы отыскивать новые виды, уточнять их распространение и экологию (Петрищева, 1967).

Все сказанное относится и к малярии. С тех пор, как Р. Росс (Ross, 1910) открыл роль комаров в переносе плазмодиев, исследования отношений между этими организмами, казалось, исчерпали проблему. Странным было лишь одно: несмотря на уверенность в патогенности плазмодиев для комаров, эпидемиология малярии молчаливо исходила из идентичности "здоровых" и "зараженных" особей (Мошковский, 1950; Macdonald, 1957; Rogers, 1988; Anderson, May, Gupta, 1989; Zoyza et al., 1991). Я думал, что дело в отсутствии количественных данных, и поначалу хотел лишь восполнить этот пробел. Оказалось, однако, что проблем гораздо больше, пришлось заняться и ими. Позднее стали появляться работы (они указаны по ходу изложения), посвященные тем же вопросам. Изучение отношений возбудителей и переносчиков малярии вновь стало актуальным (Sinden et al., 1989).

Глава. 2. ТЕРМИНЫ, МАТЕРИАЛЫ, МЕТОДЫ.

2.1. Термины.

При выборе терминов я ориентировался на предложенные В.Н. Беклемишевым (1959, 1961), В.Д. Степнюком и В.П. Литвиным (1976) и В.В. Кучеруком с Б. Росицким (1984), а также изданиями ВОЗ: "Терминология по малярии и ликвидации малярии" (1964) и "Биология малярийных паразитов" (1988). Необходимые уточнения приведены ниже.

Для краткости все организмы, способные вызвать болезнь человека, именуются "возбудители"; все позвоночные, в которых живут возбудители, именуются "хозяева", а все членистоногие, в которых живут возбудители, - "переносчики".

Всегда, когда не оговорено особо, имеется в виду "специфический перенос". С тех пор, как В.Н. Беклемишев (1945) дал определение этому термину, он оброс массой уточнений и интерпретаций (Павловский, 1947; Крючечников, 1983; Алексеев, 1984; Korenberg, Kryuchechnikov, 1986). В данном тексте перенос называется "специфическим" тогда и только тогда, когда возбудитель использует переносчика и как среду обитания, и как источник пищи. Комары и плазмодии - образец таких отношений; механически передача невозможна (McCarthy, 1975).

"Дозой возбудителя" называется число макрогаметоцитов в порции крови, которую комар выпил за один раз (число микрогаметоцитов по отношению к числу макрогаметоцитов всегда избыточно).

Термин "восприимчивость" употребляется как характеристика свойств потенциального переносчика. В англоязычной литературе это свойство именуют "susceptibility", что в русском издании "Терминология по малярии и ликвидации малярии" (1964) переведено как "чувствительность". Но термин "чувствительность" преокупирован - он используется для обозначения податливости членистоногих действию инсектицидов. В медицинской энтомологии, где изучение переносчиков и борьба с ними идут рука об руку, употребление одного и того же слова для обозначения этих разных понятий может привести к путанице.

Строго говоря, термин "восприимчивость" неудачен. Правильнее было бы сказать "пригодность". Дело в том, что возникновение ксено-пар (т.е. эффективного сочетания возбудителя и переносчика) происходит в одностороннем порядке - путем отбора штаммов микроорганизмов, способных использовать определенные виды и популяции макроорганизмов. Нет никаких фактических данных, как нет и теоретических оснований для того, чтобы предполагать, будто в естественных условиях может идти отбор штаммов и, соответственно, популяций членистоногих, способных "дать приют" возбудителям. Наоборот, в тех случаях, когда возбудители болезней человека патогенны для переносчиков, отбор должен идти в обратном направлении - к невосприимчивости (при этом, конечно, и к устойчивости к воздействию возбудителя). Все же, термин - это всего лишь имя собственное, раз уж за данным явлением закрепилось название "восприимчивость", я его и употребляю. Прошу лишь помнить, что оно значит. (Если девушку зовут "Марина", это не значит, что ее надо держать в соленой воде.)

Термин "зараженность" используется для обозначения наличия и обилия возбудителя в переносчике. Зараженность зависит от восприимчивости и от факторов, действующих на (или через) возбудителя. Таких как обилие возбудителя, внешние условия и т. п. а "восприимчивость" - от свойств особей (а через особей популяций и видов, которые они составляют), таких как строение, биохимия пищеварения, состав гемолимфы, размеры, возраст, и факторов, влияющих на эти свойства, таких как действие биологически активных веществ и т. п.

В данном случае (как и во всех работах подобного рода) исследования ведутся не с видами в целом, а с определенными популяциями. Соответственно все данные относятся к конкретным популяциям. В тексте, однако, (во избежание бесконечных повторов) это обстоятельство не оговаривается, упоминается только вид. По этой причине фразы типа " Комары An. sacharovi успешно заражаются P. gallinaceum" следует понимать так, что "исследованная популяция An. sacharovi успешно заражается исследованной популяцией (штаммом) P. gallinaceum".

В статистике термин "существенная разница" употребляется как синоним "достоверная разница", в том смысле, что ее возникновение в результате ошибки репрезентативности маловероятно. Поскольку использование терминов-синонимов может привести к путанице, я пользуюсь лишь одним из них: говоря о статистической достоверности разницы, так ее и называю. Термин "существенная" используется в смысле практической значимости, где важно не наличие разницы, а ее величина. Как бы не была велика достоверность разницы, если ее количественное значение не сказывается на интересующих нас процессах или ниже точности наших измерений, для нас она не существенна.

2.2. Материалы.

Объектами исследований были кровососущие комары (Culicidae), возбудители малярии (Plasmodium) и инсектицид ДДТ. Выбор указанных объектов вызван следующими причинами: комары имеют в настоящее время самое большое медицинское значение среди всех членистоногих; малярия - самая распространенная трансмиссивная болезнь, от которой погибает наибольшее число людей; ДДТ - инсектицид, который во время проведения исследований был самым распространенным средством борьбы с комарами, особенно малярийными. Кроме того, выбор вызван тем, что данная пара возбудитель-переносчик - удобный объект (плазмодиев можно подсчитать в световом микроскопе, модельные виды безопасны для человека), благодаря чему повышается производительность труда и достоверность результатов.

Часть исследований выполнена на реальных случаях малярии человека, а часть на моделях. Но, результаты, полученные на моделях, также имеют прямое отношение к эпидемиологии этого заболевания. Дело в том, что используемый в модели P. gallinaceum, генетически гораздо ближе к наиболее опасному возбудителю болезни людей - P. falciparum, чем человеческий же P. vivax (Sinden, 1984), а в качестве переносчиков наряду с Ae. aegypti использовались реальные переносчики малярии человека.

Источники материала: ДДТ - из наборов ВОЗ для определения резистентности. P. gallinaceum Brumpt получен из лаборатории экспериментальной химеотерапии ИМПИТМ. Мы поддерживали его, главным образом, перевивкой через Ae. aegypti. P. bergey получен из отдела протозоологии ИМПИТМ. Мы поддерживали его перевивкой через An. stephensi. Штаммы малярии человека получены группой, возглавляемой В.А. Бибиковой (ИМПИТМ), непосредственно от людей, заразившихся в естественных условиях. Поскольку комары были основным объектом изучения, их получению и биологии посвящена специальная глава.

Работа выполнена с использованием 10 видов комаров и 6 видов плазмодиев. В ходе разработки методов культивирования комаров проведено, округленно, 8 000 опытов, в которых использовано 21 600 000 особей (всех стадий развития). Для изучения взаимоотношений комаров и плазмодиев выполнено 972 опытов, в которых просмотрено 1 314 препаратов крови и использовано, округленно, 60 000 комаров, из которых у 32 150 особей была определена зараженность. Объем материала, исследованного в каждом конкретном случае, приведен вместе с результатами.

2.3. Методы.

В работе использовано много методов, и стандартных, и оригинальных. По этой причине они описаны в каждом разделе отдельно. Ниже указаны лишь общие детали.

Уровень паразитемии (концентрации бесполых форм плазмодия в крови позвоночного) определяли по шкале А.И. Немировской (Немировская, 1941; Рабинович, Мошковский, 1964). Уровень гамонтемии (концентрации половых форм плазмодия в крови позвоночного) - путем прямого подсчета паразитов в мазке крови. Данные о зараженности донора приводятся лишь там, где эти показатели в разных вариантах опыта сильно отличались. Если паразитемия не указана, значит она была на уровне 2 - 3 баллов. Передача малярии через комаров проверялась паразитологически (по наличию плазмодиев в крови реципиента) и ксенодиагностикой (заражением комаров кровью реципиента).

Всегда (кроме случаев, оговоренных специально) сравниваемые группы комаров выращивали в одних и тех же условиях - в одном сосуде; группы состояли из особей, которые вылупились из яиц в течение одних суток и также (в течение одних суток) вылетели из куколок; они находились на первом репродуктивном цикле (заражающее кровососание было первым). Осемененность самок не учитывали, т.к. специальные опыты и данные независимых исследований (Klowden, 1979), показали, что этот фактор не влияет на кровососание и заражение.

Заражение сравниваемых групп комаров проводили путем кормления на одном доноре, как правило, одновременно. Хотя специальное исследование показало, что и последовательное кормление не влияет на зараженность комаров, к нему прибегали лишь в неизбежных случаях (все они оговорены в тексте).

Везде, где не оговорено иное, и до, и после заражающего кормления сравниваемые группы комаров держали в одном и том же термостате при 27 - 28 ^оС с градиентом влажности от 80 до 100 %; в период спорогонии комары имели возможность пить раствор глюкозы (в градиенте от 5 % концентрации до насыщенного раствора), а также воду. Крови комары больше не получали, так как известно, что плазмодии успешно развиваются и без этого (Расницын, Жарова, 1984). Зараженность определяли у особей, выпивших полную порцию крови. Контроль полноты кровососания осуществляли по характеру растяжения брюшка комаров и отказу от нападения на добычу.

Методика вскрытия комаров и приготовления препаратов была общепринятой (Сергиев, 1934; Collins et all., 1973). Зараженность комаров плазмодиями оценивали, как правило, дважды: на стадии ооцисты (на четвертые или пятые сутки после заражающего кормления) и на стадии спорозоита (на восьмые - десятые сутки после заражающего кормления). Сравниваемые группы комаров исследовались одновременно.

Зараженность комаров оценивалась долей особей (%), имеющих возбудителя, и числом плазмодиев у зараженных особей (экстенсивность и интенсивность заражения). Показатель экстенсивности заражения комаров ооцистами именуется "ооцистный индекс" (сокращенно - ОИ), спорозоитами - "спорозоитный индекс" (СИ). Показатель интенсивности заражения комаров ооцистами именуется "обилие ооцист" (ОО), спорозоитами - "обилие спорозоитов" (ОС). Поскольку метод определения обилия спорозоитов не точен, этот показатель приводится только там, где важна любая информация - в работах с малярией человека.

Кроме общепринятых, использованы также следующие оригинальные методы, оценки выживаемости плазмодиев в комарах:

А) С помощью ооцистно-спорозоитного индекса (ОСИ), который показывает, насколько снизилась доля зараженных комаров на протяжении спорогонии плазмодия.

ОСИ=СИ/ОИ*100 %,

где ОСИ - показатель выживаемости плазмодиев от ооцисты до спорозоита;

СИ - доля особей (комаров), зараженных спорозоитами;

ОИ - доля особей (комаров), зараженных ооцистами.

Б) По соотношению числа макрогаметоцитов, заглоченных комаром, к числу ооцист, которые в нем образовались.

ВМГ=ОГ/СО*100 %,

где ВМГ - выживаемость макрогаметоцитов;

ОГ - число макрогаметоцитов в порции крови;

СО - среднее число ооцист у всех комаров.

В силу малой точности определения обилия гаметоцитов и вариабельности количества крови, выпитой комарами, этот показатель очень не точен. По этой причине он определялся только в работах с малярией человека.

Поскольку большинство характеристик снимается визуально и, как правило, не поддается проверке, я принял специальные меры: 1) чтобы исключить индивидуальные особенности исследователей, сравниваемые группы анализировал один человек (оператор); 2) чтобы не принять желаемое за действительное, оператор не знал, какая группа анализируется, и при каждой возможности материал из сравниваемых групп шел вперемежку.

Всегда, когда было возможно, опыты планировались так, чтобы получить ответ на несколько вопросов. Это делалось и для экономии времени и материалов, и как способ перекрестной проверки обнаруженных закономерностей. По этой причине при изложении материала неизбежны перекрестные ссылки.

Особенностью данной работы является количественная оценка восприимчивости. Чтобы это можно было сделать, необходимо знать точность используемых методов. Для выяснения её проведены эксперименты, которые излагаются в специальном разделе.

2.4. Математическая обработка результатов.

Математическая обработка результатов проведена стандартными методами с помощью программ, написанных автором на языках "Бейсик" и "Паскаль". Во всех случаях, где это можно сделать, вместе с результатами приводится доверительный интервал средних значений при р=0.05 (вероятность ошибки репрезентативности 0.05). Исключение представляют данные об обилии ооцист. Для них приведена величина среднего квадратичного отклонения. Это вызвано тем, что распределение зараженных комаров по обилию ооцист не соответствует нормальному.

При анализе статистической достоверности разницы между сравниваемыми группами я ориентировался не на число исследованных особей, а на число повторных опытов. Дело в том, что один опыт (сколько бы ни было в нем особей) характеризует генеральную совокупность составляющих именно этого опыта, а нас интересует генеральная совокупность всех опытов. Подробно этот вопрос разбирается в специальной работе (Расницын и др., 1995).

Гл. 3. ЭНТОМОЛОГИЧЕСКАЯ БАЗА ИССЛЕДОВАНИЙ

Смысл данных, которые мы получаем в результате исследований в любой области науки, зависит от материалов, которые были использованы для их получения. По этой причине, прежде чем переходить к сути разбираемого вопроса, необходимо рассмотреть на какой базе он основывается - каким образом происходит получение энтомологического биоматериала для изучения отношений переносчиков с возбудителями болезней человека.

3.1. Принципы культивирования переносчиков.

Результативность работы по созданию и поддержанию культур комаров в значительной мере обеспечена тем, что она была обоснована следующими принципами (Расницын, 1980а, 1986в):

1. Обеспечение безопасности путем использования моделей (видов, не способных распространять болезни людей и важных для человека животных) и экзотических видов, которые не способны жить в той местности, где находится лаборатория (Расницын, 1986в).

2. Создание условий, необходимых и достаточных для жизни и размножения объекта, а не воспроизведение природной обстановки.

3. Предоставление особям градиента условий.

4. Качество биоматериала оценивать не по сходству с природными особями, а по его стабильности и однородности (Расницын, 1986в).

5. Оптимизация культур путем снижения стоимости биоматериала при сохранении его качества и уровня производства (Расницын, 1980а). Повышение плодовитости и выживаемости особей (Тамарина, Максимов, 1989) - лишь одно из средств достижения этой цели.

6. Гуманное отношение к лабораторным животными. Для исследований мы вынуждены использовать животных. Необходимо приносить им как можно меньше страданий. Приведу лишь один пример. Когда я приступил к работе, для того, чтобы комаров накормить кровью, кролика-донора "распинали" на доске и вкладывали в садок. Чтобы избежать этого был сконструирован и изготовлен специальный станок, в котором кролик сидит в нормальной позе, а комарам доступны лишь его уши (рац. предложения ИМПИТМ N 25 и 64). Теперь вместо 2-3 недель кролики живут годами. Выигрыш, кроме того, в том, что процедура кормления стала занимать вдвое меньше времени, увеличилась доля насосавшихся комаров. И, последнее в перечислении, но главное по сути, - перестали мучить животных.

3.2. Выбор индикаторов и способ оценки сходства.

Поскольку характеристик, которые могут использоваться для оценки особей, бесконечное количество, приходится выбирать морфофизиологические индикаторы. Теория (Шварц, Смирнов, Добринский, 1968) не содержит методики выбора индикаторов. Специальное исследование (Расницын, 1986а) позволило разработать такой метод. Он основан на оценке степени дисперсии числовой характеристики признака под действием различных факторов. С помощью этого метода обнаружено, что наиболее реактивной характеристикой комаров является плодовитость. По этой причине данный признак и использовался в качестве морфофизиологического индикатора этих насекомых. Вторым по реактивности признаком оказалась масса куколок. Благодаря разработке метода взвешивания куколок комаров (Расницын, Шагов, Демина, 1983), мы смогли использовать и его.

Второй принципиальный вопрос - оценка степени сходства. Почти все современные методы сравнивают объекты без учета генеральной совокупности (Шрейдер, 1971). Единственное исключение - таксономический анализ Е.С. Смирнова (1969). Но этот метод был рассчитан лишь на использование качественных признаков в целях систематики. Специальные преобразования (Расницын, 1965) позволили включить в арсенал этого метода и количественные признаки, а полевые исследования (Расницын, Макарова, Шевелева, 1966) показали, что он пригоден не только в таксономии, но и для любых явлений.

3.3. Получение биоматериала.

Энтомологическим материалом исследований служили живые особи. Использование культур клеток, как это делается в вирусологии (Кисленко и др., 1982), не имело смысла - работать с клетками сложнее и результаты дальше от реальности.

Живых особей можно получать и из природных популяций, и из культур. (Под термином "культура" понимаются любые воспроизводящиеся линии животных, содержащиеся в искусственных условиях). Выбор источника зависит от задачи: если надо знать состояние конкретной популяции, единственный источник - данная популяция. Получение материала из нее сводится к отлову. Описано много методов отлова членистоногих, имеющих медицинское значение (сборник "Методы изучения природных очагов болезней человека", 1964; Фасулати, 1971; Расницын, 1974б; Детинова, Расницын, Маркович и др., 1978; Расницын, Косовских, 1979, 1983; Расницын, Бикунова, 1979; Расницын, Лебедева, 1996; Расницын, Лебедева, Давыдов, 1996). Для выбора подходящего разработаны специальные критерии (Расницын, 1978). В остальных случаях пригодны любые особи.

Культура - особая популяция. Она не может быть идентичной ни одной из диких. Культура - модель (Астафьев, Яроцкий, Лебедева, 1989), которую всегда надо сравнивать с реальностью. Различия модели и того, что наблюдается в природе, не свидетельство ее недостатков, а возможность познания. Так, например, обнаружение стеногамности An. sacharovi в культуре (Захарова, Расницын, 1985; Расницын, Захарова, Демина, 1984) дало возможность установить, что эвригамия не является жестким свойством вида, как считалось ранее.

Культура обеспечивает возможность круглогодичных экспериментов, получение биоматериала в большем количестве, в заданный срок и его большую однородность. В ИМПиТМ, например, лишь после того как нами был создан ряда культур и усовершенствованы методы их поддержания, удалось развернуть широкий спектр исследований: оценку инсектицидов, поиск биологических средств борьбы и данную работу - изучение взаимодействия возбудителей и переносчиков.

3.4. Создание и поддержание колоний комаров.

Культивирование важно не только тем, что повышает возможность изучения объекта, но и тем, что служит доказательством истинности знаний. Если создана жизнеспособная культура определенных организмов, значит мы сумели воспроизвести условия, необходимые для них.

Культивирование - задача технической энтомологии (Тамарина, 1987, 1990; Злотин, 1989), но создание базы исследований настолько важно, что этим вынужден заниматься почти каждый экспериментатор (и у каждого накапливается свой опыт).

В процессе создания лабораторных колоний комаров выявилась целесообразность отказ от имитации природных условий, а поиск тех, которые необходимы и достаточны для жизни особей. Так, например, обнаружено, что личинки Ae. togoi вовсе не солелюбивы, а солеустойчивы (Ясюкевич, Расницын, 1991); личинки малярийных комаров могут питаться путем обскребывания субстрата (Расницын, Ясюкевич, 1989а; Ясюкевич, Расницын, 1989). На основании этого подхода были созданы культуры 10 видов комаров, 9 из которых использованы в данной работе. Три колонии (Anopheles stephensi List., 1901, Aedes aegypti (L.), 1762 и Ae. togoi Theobald, 1907) были воспроизведены из материала, полученного из школы тропической гигиены (Лондон) и из лаборатории Н.А. Тамариной (МГУ), колонии трех видов (An. atroparvus van Thiel, 1927, An. superpictus Grassi, 1898 и Culex pipiens L, 1758) созданы заново, а трех (An. martinius Schingarev, 1926, An. pulcherrimus Theobald, 1902 и An. sacharovi Favre, 1903) созданы впервые в мире (Расницын, 1985б; Расницын и др., 1989, 1990, 1992). В работе использованы также два "диких штамма" - An. messeae Fall., 1932 из Подмосковья и An. subalpinus из Азербайджана.

С целью оптимизации культур были разработаны специальные алгоритмы, способы, среды и устройства, описанные в статьях (Расницын, 1982а, Шагов и др., 1983; Демина, Шагов, Расницын, 1985; Ясюкевич, Расницын, 1991, 1992), свидетельствах об изобретении (Расницын, Демина, 1979, 1983; Расницын, 1980б; Расницын, Ясюкевич, 1988) и рационализаторских предложениях, список которых приведен в приложении. Для тех видов, которые использовались чаще всего, были составлены инструкции по культивированию.

5. Некоторые стороны биологии комаров, имеющие прямое отношение к передаче возбудителей болезней человека.

Изучение комаров позволило выявить ряд аспектов их биологии, имеющих прямое отношение к данной теме. Важнейшие из них:

Таксономическая близость видов не свидетельствует о сходстве всех их свойств. Так по способу питания личинки An. stephensi похожи на личинок Aedes больше, чем на других представителей своего рода - они не фильтруют нейстон, а собирают пищу со дна водоема (Расницын, Ясюкевич, 1989а). Нет прямой связи между таксономической близостью и чувствительностью к инсектицидам (Расницын, Войцик, Ясюкевич, 1991). А это значит, что может не быть такой связи и с восприимчивостью.

Условия развития личинок комаров отражаются на размерах имаго (Расницын, Ясюкевич, 1988), а от этого зависит количество крови, которое они могут высосать (Расницын, Званцов, Ясюкевич, 1991а). Поскольку вероятность попадания возбудителя в организм комара и его количество связаны с количеством принятой крови, можно ожидать зависимости заражаемости от условий развития комаров. Ту же роль может сыграть и общее состояние особей, по крайней мере, на чувствительность к инсектицидам условия развития влияют достаточно сильно (Расницын, Войцик, Евсеева, 1986; Расницын, Войцик, Званцов, 1988; Войцик, Расницын, 1991; Расницын, Войцик, Ясюкевич, 1993; Расницын, Войцик, Скидан, 1993).

Эффект группы зависит и от концентрации особей, и от их численности (Расницын, Волкова, 1982). Оба этих параметра сказываются и на чувствительности к инсектицидам (Алексеев и др., 1983; Расницын, 1985; Расницын, Войцик, Евсеева, 1986), и на активности нападения на добычу (Расницын, 1963). У кровососущих двукрылых существует даже "эффект приглашения" - привлечение особей к добыче теми, кто ее уже нашел (Алексеев, Расницын, Витлин, 1977; Расницын, Алексеев, Витлин, 1978). (Наличие этого эффекта было подтверждено независимыми исследованиями (Ahmadi, McClelland, 1985)). Для переноса инфекций эффект группы имеет значение и в отношении вероятности распространения, и при постановке опытов.

Звуковые генераторы, предназначенные для отпугивания комаров, на самом деле их не отгоняют (Расницын и др., 1974). Они лишь имитируют защиту, ослабляя тем самым внимание к переносчикам. Это облегчает комарам нападение на людей и, как результат, распространение возбудителей (Расницын, 1980).

Глава 4. ОЦЕНКА МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ ЗАРАЖЕННОСТИ ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Чтобы оценить смысл результатов необходимо знать характеристики методов, которыми они были получены.

4.1. Оценка наличия возбудителей, их обилия и количества крови, выпитой комаром.

Материалы и методы.

Поскольку зараженность определяется визуально, результаты зависят от свойств операторов. По этой причине опыты проведены с теми людьми, которые участвовали в основных исследованиях. Чтобы избежать искажений ни один из них, кроме меня (СР), не подозревал об этих опытах.

В опытах использованы P. gallinaceum, Ae. aegypti и An. sacharovi. Методы оценивали путем сравнения повторных оценок одних и тех же препаратов одним и тем же оператором. Чтобы избежать запоминания, повторный анализ проводился в ином (случайном) порядке; мазки крови просматривались повторно не ранее, чем через месяц, а препараты комаров в тот же день, партиями не менее 25 штук.

Количество заглоченной крови определяли по разнице веса группы из 10 особей до и после кормления. Метод оценивался сравнением результатов взвешивания разными людьми с интервалом, не более 5 минут.

Результаты.

4.1.1. Определение наличия и обилия возбудителя в крови донора.

Несовпадения в обнаружении плазмодиев (табл. 1) редки: на 240 оценок только 3 несовпадающих (2 %). Обилие бесполых форм плазмодиев в среднем определяется с точностью +1 балл, половых еще менее точно (табл. 2).

Таблица 1. Анализ результатов повторного определения наличия плазмодиев в крови позвоночного.

Показатель	Оператор
	НД	РАЖ	СР	МБ
Число просмотренных препаратов	30	10	80	20
Максимальное число препаратов, в которых обнаружен плазмодий	19	8	66	18
Доля (%) случаев совпадения повторной оценки наличия плазмодиев	100	90	98	100
Доля (%) случаев совпадения повторной оценки наличия макрогаметоцитов в препаратах с плазмодиями	100	86	98	100

Таблица 2. Анализ результатов повторного определения обилия плазмодиев в крови позвоночного.

Показатель	Оператор
	НД	РАЖ	МБ
Число просмотренных препаратов	8	19	18
Среднее отклонение оценки паразитемии (баллы)	1,0	0,7	0,8
Доля (%) случаев совпадения повторной оценки уровня паразитемии	12	16	17
Доля (%) случаев разницы в повторной оценке уровня паразитемии на 0.5 балла	12	16	29
Доля (%) случаев разницы в повторной оценки уровня паразитемии на 1 балл	50	47	44
Доля (%) случаев разницы в повторной оценке уровня паразитемии на 1.5 балла	12	25	0
Доля (%) случаев разницы в повторной оценке уровня паразитемии на 2 балла	12	0	0
Доля (%) случаев разницы в повторной оценке обилия гамонтов не более, чем в 1.5 раза	14	16	35
Доля (%) случаев разницы в повторной оценке обилия гамонтов более чем в 1.5, но менее чем в 2 раза	42	43	23
Доля (%) случаев разницы в повторной оценке обилия гамонтов в 2 - 3 раза	14	32	23
Доля (%) случаев разницы в повторной оценке обилия гамонтов более, чем в 3 раза	29	11	18

4.1.2. Определение зараженности переносчика.

Наличие возбудителя определяется почти безошибочно: всего 2 расхождения повторных оценок - 1 из 401 препарата средней кишки (0.25 %) и 1 из 283 препаратов слюнных желез (0.35 %).

Подсчет ооцист (табл. 3) при малом их числе точен: расхождения повторных оценок редки (1 на 30 препаратов) и величина их ничтожна (в среднем 1 %). Чем больше ооцист, тем чаще расхождения, и когда ооцист более 100 - постоянны. Но величина их мала (в среднем 10 %). Разброс ошибок соответствует нормальному распределению.

Таблица 3. Анализ результатов повторного подсчета ооцист у одних и тех же особей комаров

Показатель	Класс по обилию
Показатель	1 - 10	11 - 50	51 - 100	101 - 200	>200
Число просмотренных особей	30	83	94	43	34
Среднее обилие ооцист при первом просмотре	6.0	30.0	74.9	155.6	253.9
Среднее обилие ооцист при втором просмотре	6.1	30.0	75.5	153.9	252.5
Число несовпадений результатов двух просмотров	1	32	87	43	34
Доля (%) несовпадений результатов двух просмотров	3	39	93	100	100
Максимальная разница несовпадений результатов (%)	10	10	7	16	17
Средняя разница несовпадений результатов (%)	1	2	4	7	9

4.1.3. Количество крови, выпитой переносчиком.

Результаты повторных взвешиваний (табл. 4) показывают, что отклонения данных обычно менее 1 % (в среднем 0.8 % для голодных и 0.6 % для накормленных кровью особей).

Таблица 4. Результаты повторного взвешивания комаров.

N опыта

Голодные особи

Особи с кровью

Вес крови

max

min

24.1

26.9

24.1

26.9

0.0

58.0

71.6

58.2

72.2

0.3

0.8

34.1

45.3

33.9

44.7

0.6

1.3

19.6

16.6

19.7

16.7

0.5

0.6

65.3

51.5

65.5

51.7

0.3

0.4

45.9

35.1

45.6

34.8

1.7

0.9

25.0

27.1

24.8

27.3

0.8

0.7

71.2

72.1

70.8

72.0

0.6

0.1

46.4

45.0

45.8

44.7

1.3

0.7

24.1

26.4

23.5

26.3

2.5

0.4

65.6

69.4

66.1

68.9

0.8

0.7

42.6

43.1

41.5

42.5

2.6

1.4

19.3

18.7

19.3

19.1

0.5

2.1

53.5

45.5

53.9

45.9

0.7

0.9

34.6

27.2

34.2

26.4

1.2

3.0

Обозначения: I - первый результат взвешивания группы из 10 особей (мг); II - второй результат взвешивания группы из 10 особей (мг); d - относительная (в %) разница показателей к их среднему значению; max - максимальный результат определения количества выпитой крови (мг); min - минимальный результат определения количества выпитой крови (мг).

4.2. Влияние способа кормления переносчиков кровью на их зараженность возбудителями.

Хотя искусственное кормление насекомых кровью применяется широко (Gordon, 1922; Yoeli, 1938; Bishop, Gilchrist, 1944, 1946; Gierberg, Kutz, 1971; Супряга, Дашкова, Расницын, 1978; Yano, Kozlowska, Maramorosch, 1990) и описано много устройств для этой работы (Карибов, 1928; Collins, Harrison, Skinner, 1964; Ponnudurai et all., 1989), до сих пор не было известно, как искусственные методы влияют на заражение комаров плазмодиями. Цель настоящей работы (Дашкова, Расницын, 1978) - восполнить указанный пробел.

Материалы и методы.

Схема опыта: Каждую партию комаров An. atroparvus делили на две группы: группу "Е" кормили на человеке, а группу "И" - искусственно кровью того же донора, взятой из локтевой вены непосредственно перед кормлением на нем комаров группы "Е" или сразу после него в аппарате Rutlage et all. (1964). Эту кровь смешивали с консервантом (3.8 % цитрата натрия или ЦОЛИПК 7 Б) в соотношении 4:1. Между естественным и искусственным кормлением комаров проходило 1.5 - 2 ч. Длительность кормления на человеке и через мембрану была одинаковой. В крови, взятой из пальцев больных во время кормления комаров, а также подготовленной для искусственного кормления, подсчитывали число гаметоцитов на 500 лейкоцитов.

Результаты и обсуждение

4.2.1. Накармливаемость комаров.

Опыты (табл. 5) не выявили влияния способа кормления на активность кровососания комаров: в итоге на человеке насосалось крови 57 % подсаженных комаров, а на кормушке 59 %.

Таблица 5. Пищевая активность комаров An. atroparvus при разных способах дачи им крови.

N опыта	Способ кормления кровью
	естественный		искусственный
	n	D	n	D
1	100	89 81 - 94	150	43 36 - 51
2	100	48 39 - 58	120	75 67 - 82
3	100	55 45 - 64	100	55 45 - 64
4	100	55 45 - 64	100	74 65 - 82
5	90	80 71 - 87	70	51 40 - 63
6	100	42 33 - 52	100	50 40 - 60
7	50	38 26 - 52	50	64 50 - 76
8	80	50 39 - 61	80	65 54 - 74
9	80	54 43 - 64	100	56 46 - 65
Все	800	57 53 - 60	870	59 56 - 62

Обозначения: n - число подсаженных особей, D - доля (%) особей с кровью после определенной экспозиции и доверительный интервал этого показателя при р=0.05.

4.2.2. Обилие гаметоцитов.

Поскольку при естественном кормлении комары пили кровь из периферической системы, а на кормушке - венозную, встал вопрос о распределении плазмодиев. Оказалось (табл. 6), что обилие гаметоцитов в периферической крови почти в точности равно их числу в венозной крови. (Разница в 10 % значительно ниже точности метода.)

Таблица 6. Распределение половых форм Pl. vivax в крови человека. (Число гаметоцитов на 500 лейкоцитов.)

опыта|

Порядковый N -

приступа малярии

Микрогаметоциты

ПК | ВК

Макрогаметоциты

ПК | ВК|

Все

1 2

2 5

32 37

11 11

9 13

14 15

8 10

11 17

35 35

14 16

3 5

8 9

53 59

17 19

12 13

18 19

14 15

19 21

54 50

22 23

Обозначения: ПК - в периферической крови, ВК - в венозной крови.

4.2.3. Сохранение возбудителя в консервированной крови. В крови с консервантом гаметоциты обнаруживались значительно дольше того срока, который проходил между взятием крови и кормлением ею комаров (табл. 7). Но основным доказательством сохранения возбудителя является факт заражения комаров.

Таблица 7. Выживание половых форм Pl. vivax в процессе хранения консервированной крови. (Число гаметоцитов на 500 лейкоцитов в крови с консервантом в разные сроки хранения.)

Срок хранения крови, часы	Микрогаметоциты		Макрогаметоциты
Срок хранения крови, часы	Опыт 1	Опыт 2	Опыт 1	Опыт 2
0.5	9	-	16	-
1.0	11	14	20	24
1.5	12	15	16	27
2.0	4	14	8	19
2.5	13	10	15	21
3.0	7	11	13	14
3.5	10	14	12	18
4.0	9	10	13	21
4.5	8	9	14	17
M	9.2	12.1	14.1	20.1
s	2,7	2.4	3.3	4.1
KV %	29.6	19.4	23.4	20.3

Обозначения: М - среднее значение; s - среднее квадратичное отклонение; KV - коэффициент вариации.

4.2.4. Зараженность комаров при разных способах кормления их кровью. При искусственном кормлении экстенсивность заражения комаров (табл. 8 и 9) была несколько ниже, чем при естественном (32 % против 48 % по ооцистам и 20 % против 24 % по спорозоитам). Интенсивность заражения также была ниже (7.8 ооцисты против 9.2 ооцист). Разница эта статистически достоверна (р<0.01). Ее причина - разбавление крови консервантом.

Таблица 8. Зараженность комаров An. atroparvus возбудителем малярии Pl. vivax на стадии ооцисты при разных способах кормления кровью.

N опыта	Естественное кормление			Искусственное кормление
N опыта	n	ОИ	ОО	n	ОИ	ОО
1	32	22 11 - 39	1.6	16	19 7 - 43	2.0
2	20	30 14 - 52	2.0	31	23 11 - 40	3.0
3	10	60 31 - 83	9.8	39	33 21 - 49	19.5
4	12	33 14 - 61	2.5	16	38 18 - 61	2.0
5	10	60 31 - 83	18.3	14	43 21 - 67	6.0
6	14	29 12 - 55	1.8	14	29 12 - 54	1.5
7	4	50 15 - 85	1.0	8	38 14 - 69	2.3
8	9	44 19 - 73	48.0	12	50 25 - 75	10.1
9	13	38 18 - 64	1.2	14	29 12 - 55	1.2
Все	91	48 38 - 58	9.2	164	32 25 - 39	7.8

Обозначения: n - число исследованных комаров, ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя при р=0.05; ОО - обилие ооцист.

Таблица 9. Зараженность комаров An. atroparvus возбудителем малярии Pl. vivax на стадии спорозоита при разных способах кормления кровью.

N опыта	Естественное кормление		Искусственное кормление
N опыта	n	СИ	n	СИ
1	32	16 7 - 32	18	11 3 - 33
2	15	27 11 - 52	47	15 7 - 28
3	23	35 19 - 55	33	27 15 - 44
4	21	24 11 - 45	40	15 7 - 29
5	28	18 8 - 36	18	28 12 - 51
6	13	23 8 - 50	25	20 9 - 39
7	10	30 11 - 60	20	15 15 - 36
8	7	29 8 - 64	25	24 12 - 43
9	20	30 15 - 52	30	23 12 - 41
Все	169	24 18 - 31	256	20 15 - 25

Обозначения: n - число исследованных комаров, СИ - спорозоитный индекс и доверительный интервал этого показателя при р=0.05.

Во всех опытах наблюдалось снижение доли зараженных особей на протяжении спорогонии. Разница между ооцистным и спорозоитными индексами велика (в среднем в два раза) и статистически достоверна (P<0.01). Такое снижение говорит о неполном выживании плазмодиев в комаре: часть ооцист дегенерирует, не все спорозоиты достигают слюнных желез (Collins et al., 1976). Влияние способа кормления кровью на выживаемость плазмодиев не проявилось (табл. 10).

Таблица 10. Выживаемость возбудителей малярии Pl. vivax в комарах An. atroparvus в течение спорогонии (%).

Способ кормления	N опыта
Способ кормления	1	2	3	4	5	6	7	8	9	Все
Естественный	73	90	58	73	30	79	60	66	79	68
Искусственный	58	65	82	39	65	69	39	48	79	60

Заключение.

Опыты показали приемлемость искусственного кормления кровью для заражения комаров возбудителями малярии.

4.3. Влияние порядка кормления переносчиков на доноре на их зараженность возбудителями.

Чтобы соблюсти идентичность условий заражения сравниваемых групп переносчиков, мы кормили их кровью донора одновременно. Но это не всегда возможно: если сравниваемых групп много, приходится кормить их последовательно. Нельзя исключить, что это отразится на зараженности. Данная работа выполнена для проверки указанного предположения.

Материалы и методы.

В работе использованы Ae. aegypti и An. sacharovi, P. gallinaceum и цыплята. Опыты состояли в том, что на одном и том же доноре последовательно кормили 16 групп комаров (в каждой группе было около от 100 до 120 самок). При этом одновременно кормили по две группы. Для анализа на зараженность из каждой группы брали выборку.

Результаты и обсуждение.

Порядок кормления не повлиял на зараженность комаров: нет зависимости ни одного из показателей зараженности ни у одного из видов комаров от порядка их кормления (рис. 1, 2). Это подтверждает и количественный анализ - коэффициенты корреляции между порядком кормления и показателями зараженности невелики и статистически недостоверны (табл. 11).

Рис. 1. Экстенсивность заражения групп комаров, накормленных последовательно на одном и том же доноре с гаметоцитами P. gallinaceum в крови.

По оси абсцисс - порядковый номер кормления группы.

По оси ординат - доля заразившихся комаров (в %).

А - Ae. aegypti.

Б - An. sacharovi.

Рис. 2. Интенсивность заражения групп комаров, накормленных последовательно на одном и том же доноре с гаметоцитами P. gallinaceum в крови.

По оси абсцисс - порядковый номер кормления группы.

По оси ординат - среднее число ооцист у заразившихся комаров.

А - Ae. aegypti.

Б - An. sacharovi.

Таблица 11. Статистическая связь между порядком кормления и показателями зараженности семей комаров.

Коэффициент корреляции между порядком кормления и	Вид
Коэффициент корреляции между порядком кормления и	Ae. aegypti	An. sacharovi
интенсивностью заражения	0.19 ± 0.26	0.18 ± 0.26
экстенсивностью заражения	0.13 ± 0.26	0.05 ± 0.27

Такой результат имеет два следствия. 1) позволяет считать идентичными последовательные заражающие кормления комаров на цыплятах, если комаров менее полутора тысяч; 2) свидетельствует о том, что инфективные гаметоциты P. gallinaceum не скапливаются в капиллярах кожи. В нашем случае каждый раз было накормлено не менее полутора тысяч комаров, которые изъяли много периферической крови (около 4 мл Ae. aegypti и около 5.5 мл An. sacharovi, что весьма существенно для 7-10 дневного цыпленка), а зараженность не снизилась. Значит, приток крови из внутренних сосудов приносил жизнеспособные гаметоциты в концентрации, не уступающей капиллярной крови. Этот вывод совпадает с изложенными выше данными о P. vivax.

Выводы.

1. Инфективные гаметоциты P. gallinaceum не скапливаются в капиллярах кожи.

2. Последовательное кормление до полутора тысяч комаров на одном цыпленке не влияет на их зараженность.

4.4. Влияние обилия возбудителей на зараженность переносчиков.

На вопрос о связи зараженности комаров с обилием плазмодиев есть три точки зрения: одни авторы (Boyd, 1940; Lumsden, Bertram, 1940; Сергиев, Тибурская, 1944; Macdonald, 1952) сталкивались со случаями, когда эта связь была тесна и однозначна, другие (Ременникова, 1946; Eyles, 1951) не видели четкой зависимости, а по мнению А.Н. Алексеева (1985) существует оптимальная заражающая доза, наличие которой - критерий специфического характера отношений между возбудителем и переносчиком (Алексеев, 1984). Поскольку выводы разных авторов не совпадают, а этот фактор невозможно стабилизировать, пришлось этим вопросом заняться специально.

Материалы и методы.

Зависимость заражения комаров от концентрации возбудителя в крови донора определялась двумя способами. Первый: брали кровь цыпленка с предельно высоким уровнем гамонтемии; путем добавления незаразной крови приготовляли несколько вариантов концентрации, которыми в дальнейшем кормили комаров. Второй: по мере протекания болезни у позвоночного хозяина на нем накармливали группы комаров, выращенных в одинаковых условиях.

Результаты и обсуждение.

Связь между обилием возбудителя и заражением переносчика конечно есть. Нижний предел неизбежен - если возбудителя в крови донора нет, переносчик не заразится. В отношении малярии можно утверждать, что нижний предел концентрации гаметоцитов не высок. Так заражение комаров наблюдалось при наличии 8 микро- и 4 макрогаметоцитов на 1 мкл. крови (James, 1931), т. е. около 30 микро- и 15 макрогаметоцитов на среднюю порцию крови, выпиваемую одним комаром. В некоторых случаях (Moore et al., 1945; Young et al., 1946) отмечалось, что заражение комаров прекращается, когда концентрация гаметоцитов ниже 5 на 1 мкл. Заражение комаров наблюдали и при более низком обилии возбудителя (Young et al., 1945, 1946), даже тогда, когда плазмодиев в крови донора обнаружить не удается (Young, Burgess, 1948). Наблюдались и обратные случаи: отсутствие заражения комаров при микроскопически значимом обилии паразитов (Лысенко, Левитанская, 1951). Впрочем, одно не противоречит другому - в последнем случае половые формы плазмодиев могли отсутствовать.

Результаты наших опытов (табл. 12) подтверждают, что комары могут заразиться при низком обилии возбудителей. Поскольку эти опыты не имели целью поиск минимальной дозы, вероятно, она гораздо ниже приведенных значений. Ценность этих данных в том, что они служат отправной точкой для дальнейших исследований.

Таблица 12. Минимальная концентрация гаметоцитов, при которой обнаружено заражение комаров плазмодиями малярии.

Возбудитель	Переносчик	Гаметоциты
		Макро		Микро
		МКЛ	СПК	МКЛ	СПК
Pl. bergey Pl. gallinaceum Pl. gallinaceum Pl. gallinaceum Pl. gallinaceum Pl. vivax Pl. vivax Pl. vivax	An. stephensi Ae. aegypti Ae. togoi An. pulcherrimus An. sacharovi An. atroparvus An. messeae An. sacharovi	17 12 5 22 14 32 185 185	44 36 23 52 56 100 100 100	11 2 7 19 10 17 132 132	28 36 32 48 40 76 76 76

Обозначение: МКЛ - число гаметоцитов на 1 мкл крови; СПК - число гаметоцитов в средней порции крови, выпиваемой одним комаром.

Необходимо учесть, что нижний предел концентрации возбудителя различен для разных видов возбудителей и переносчиков. Свидетельство тому - отсутствие корреляции в показателях зараженности при разном сочетании взаимодействующих организмов. (Этот вопрос разбирается ниже.)

Поскольку нижний предел концентрации возбудителя, достаточный для заражения переносчика, в каждом конкретном случае может быть своеобразным, а определять его очень трудно, для страховки, целесообразно считать его равным единице (1 макро- и 1 микрогаметоцит).

Верхний предел концентрации возбудителя неизбежен. Возможны три варианта: 1) избыток возбудителей убивает переносчика; 2) избыток возбудителей ведет к снижению зараженности; 3) число возбудителей, которые могут выжить в переносчике, не превышает определенной величины. В первых двух вариантах должна быть оптимальная доза, в третьем - нет. Для плазмодиев возможность предела емкости видна воочию - ооцист бывает столько, что они сидят бок о бок (фото 1).

Фото 1. Ооцисты Pl. gallinaceum на средней кишке An. sacharovi.

О максимальной заражающей дозе можно судить по числу ооцист в одном комаре (число макрогаметоцитов не могло быть меньше). Наши факты сведены в таблицу 13. Нельзя утверждать, что они соответствуют верхнему пределу заражения, но можно не сомневаться, что он не ниже указанного. Приведенные цифры не самые высокие: при заражении An. atroparvus мадагаскарским штаммом P. vivax у некоторых особей образовывалось более 1000 ооцист (Shute, Maryon, 1954), а в опытах В.Н. Ременниковой P. vivax тогда, когда в крови больного было более 1200 гаметоцитов (каких не указано) на 1 мкл (около 5000 на порцию крови).

Таблица 13. Максимальное число ооцист, обнаруженных у одного комара.

Возбудитель |

Переносчик

МЧО

Pl. bergey

Pl. gallinaceum

Pl. vivax

An. stephensi

Ae. aegypti

Ae. togoi

An. pulcherrimus

An. sacharovi

An. atroparvus

An. messeae

An. sacharovi

174

2000

590

570

Обозначение: МЧО - максимальное число ооцист, обнаруженных у одного комара.

Несмотря на большое число опытов, в которых часто использовались доноры с предельно высокой концентрацией гаметоцитов, мы ни разу не столкнулись со случаем, когда снижение зараженности комаров можно было бы связать с высокой паразитемией донора. И в литературе, кроме работы А.Н. Алексеева (1985), ни один такой случай не отмечен.

Верхний предел концентрации плазмодиев для комаров не связан с их гибелью. Об этом свидетельствуют отсутствие разницы в зараженности погибших и живых особей (табл. 14) и в гибели комаров, накормленных на донорах с разным уровнем паразитемии, поскольку она всегда мала (табл. 15).

Таблица 14. Сравнение интенсивности заражения живых и мертвых комаров, из одной группы, кормившихся одновременно кровью одного донора.

Возбудитель|

Переносчик

Ж/М

Показатели зараженности

ОИ | ОО | МЗ

Pl. gallinaceum

Ae. aegypti

475

80 21 145

84 16 44

Pl. gallinaceum

Ae. togoi

357

86 123 2000

88 97 990

Pl. gallinaceum

An. pulcherrimus

308

75 111 590

53 76 353

Pl. gallinaceum

An. sacharovi

529

54 83 570

47 67 420

Pl. vivax

An. atroparvus

203

24 7 16

25 7 12

Pl. vivax

An. messeae

34 6 17

29 4 6

Pl. vivax

An. sacharovi

29 7 17

25 11 11

Обозначения: N - условный номер опыта; Ж/М - показатель состояния: Ж - живые, М - мертвые; n - число исследованных особей; ОИ - ооцистный индекс; ОО - обилие ооцист; МЗ - максимальное число ооцист у одного комара.

Таблица 15. Средняя гибель комаров в период от заражения до вскрытия на ооцисты.

Возбудитель

Переносчик

Гибель(%)

Pl. bergey

Pl. gallinaceum

Pl. vivax

An. stephensi

Ae. aegypti

Ae. togoi

An. pulcherrimus

An. sacharovi

An. atroparvus

An. messeae

An. sacharovi

Какова зависимость заражения переносчика от обилия возбудителя внутри указанных границ при прочих равных сказать трудно, т. к. прочие не бывают равными. Причина в том, что в естественных условиях изменение паразитемии сопровождается изменением уровня иммунитета, влияющего на инфективность плазмодиев для комаров (Carter, Chen, 1976; Dwadz, 1976; Mendis, 1978; Nussenzweig, 1982; Ranawaka, 1988; David et all., 1990).

Имеющиеся же данные таковы. При кормлении комаров на одном доноре в течение его болезни в случае P. bergey и An. Stephensi, наблюдались 3 варианта: при молниеносном течении болезни (рис. 3а) зараженность переносчика росла параллельно росту гамонтемии: при среднесрочном течении болезни, с середины ее, несмотря на рост гамонтемии, зараженность комаров стабилизировалась (рис. 3б), а при затяжном течении, к концу болезни зараженность их снижалась и даже прекращалась (рис. 3в). Но эти изменения зараженности не связаны с обилием возбудителя напрямую. В случае затяжной болезни зараженность комаров стабилизируется, снижается и даже прекращается при низком уровне гамонтемии, а случае молниеносного течения она растет при высоком обилии гамонтов. Это значит, что дело не в количестве плазмодий, а в накоплении антител, угнетающих половые формы паразита.

Рис. 3. Изменение во времени концентрации гаметоцитов Pl. bergey в крови белой мыши и доли (в %) заражающихся An. stephensi. (Схема.)

По оси абсцисс - дни с самого раннего появления гаметоцитов.

По оси ординат - Доля (в %) зараженных комаров и относительная концентрация гаметоцитов.

Обозначения: 1 - относительная концентрация гаметоцитов; 2 - доля зараженных комаров.

А - при молниеносном течении болезни.

Б - при среднесрочном течении болезни.

В - при затяжном заболевании.

Отсутствие оптимальной заражающей дозы демонстрирует и материал других исследователей (Ременникова, 1946; Eylis, 1951). На графике гамонтемия - зараженность имеются пики, но их несколько. По данным E. Eylis (1951), например, их восемь, и самый высокий при максимальном обилии гаметоцитов.

И при изменении концентрации гаметоцитов разбавлением крови, поиск оптимальной заражающей дозы не дал результата. Судя по первому опыту (табл. 16) можно думать, что искомая доза найдена: когда гаметоциты заселяли 0.75 % эритроцитов доля зараженных комаров были наивысшей. Но в следующем опыте (табл. 17) при такой же концентрации возбудителя (1 %) оба показатели заражения были не самыми высокими. К тому же, статистический анализ показывает, что пик заражаемости в первом опыте могли быть вызваны ошибкой репрезентативности.

Таблица 16. Влияние разведения крови донора на зараженность комаров Ae. aegypti возбудителем малярии Pl. gallinaceum. (Доля эритроцитов, содержащих гаметоциты, в исходной крови 3 %).

Концентрация крови	Доля эритроцитов с гаметоцитами (%)\|	n	ОИ	ОО
100 %	3	14	43 21 - 67	17
50 %	1.5	35	31 19 - 48	24
25 %	0.75	35	69 52 - 81	35
12 %	0.375	35	46 30 - 62	22

Обозначения: n - число исследованных особей; ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя; ОО - обилие ооцист.

Таблица 17. Влияние разведения крови донора на зараженность комаров Ae. aegypti возбудителем малярии Pl. gallinaceum. (Доля эритроцитов, содержащих гаметоциты, в исходной крови 11 %).

Концентрация крови	Доля эритроцитов с гаметоцитами (%)\|	n	ОИ	ОО
100 %	11	21	38 21 - 59	22
10 %	1	23	35 19 - 55	18
1 %	0.1	35	20 10 - 36	7
0.1 %	0.01	34	0 0 - 8	0

Таким образом, каким бы способом концентрация гаметоцитов не изменялась, соответствующего изменения зараженности комаров не происходит. Отсюда следует, что концентрация гаметоцитов в крови донора внутри пороговых ее значений не является ведущим и, тем более, единственным фактором крови, определяющим заражение комаров. Позднее мнение об отсутствии четкой зависимости зараженности комаров от количества заглоченных гаметоцитов было подтверждено (Rosenberg, Koonz, 1984; Ponnudurai et all., 1989; Puri et all., 1989; Kitthawee et all., 1990).

Интересно сопоставить данные по малярии с другими возбудителями. Для заражения триатомового клопа достаточно попадания в него одной трипаносомы (Moll-Merks, Werner, Donges, 1988). Зараженность An. gambiae и An. arabiensis микрофиляриями Wuchireria bancrofti прямо пропорциональна уровню паразитемии, а заражение An. melas очень слабо коррелировало с этим показателем (Bryan, Southgate, 1988). Наблюдали и наличие оптимальной заражающей дозы (Kasai, Williams, 1986), но это в случае филярий, которые патогенны для переносчика. Все эти данные говорят о своеобразии процессов, происходящих в каждом конкретном случае, о необходимости индивидуального подхода.

Выводы.

1. Минимальная заражающая доза гаметоцитов различна для разных сочетаний плазмодиев и комаров, но во всех случаях она низка; для страховки ее надо считать равной единице (1 микро и 1 макрогаметоцит).

2. Существует верхний предел числа ооцист, которые могут образоваться в комаре. Для разных сочетаний организмов этот предел различен и достигается при разной дозе гаметоцитов.

3. Избыточное количество плазмодиев не вызывает гибели комаров и снижения их зараженности. Нет оптимальной заражающей дозы плазмодиев малярии для комаров.

4. Концентрация плазмодиев малярии в крови донора не является ведущим и, тем более, единственным фактором крови, определяющим заражение комаров.

Глава 5. СВЯЗЬ ВОСПРИИМЧИВОСТИ С ТАКСОНОМИЧЕСКИМ ПОЛОЖЕНИЕМ И ГЕОГРАФИЧЕСКИМ ПРОИСХОЖДЕНИЕМ ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИХ ОРГАНИЗМОВ.

Первая задача медицинской энтомологии в аспекте трансмиссивных болезней - выявление переносчиков: "кто может заразить человека определенной болезнью?", и, обратно, "чем может заразить человека определенное членистоногое?". Другими словами: "какие группы членистоногих и микроорганизмов способны образовывать эффективные ксено-пары?" или, короче, "в каких случаях существует восприимчивость?".

Благодаря исследованиям В.Н. Беклемишева (1948, 1955), А.Н. Алексеева (1984а, 1984б, 1985а) и ряда других к началу наших работ ответ на этот вопрос имелся. Но не точнее, чем на уровне семейства. Хотя факты различной восприимчивости разных видов были известны, им, считалось, не следует придавать большого значения (Беклемишев, 1941). Возникновение специфического переноса считалось продуктом длительной эволюции (Беклемишев, 1955). Все же, поскольку практика имеет дело с видами и популяциями, вставал вопрос о различиях в восприимчивости и на этом уровне. Попытки ответить на него путем регистрации случаев переноса (Детинова, Смелова, 1973; Sollers-Riedel, 1978) не решает вопроса. Дело в том, что эти списки оперируют видами, а на практике мы имеем дело с популяциями, различия между которыми нельзя исключить. Кроме того, отсутствие зарегистрированных случаев переноса не гарантирует отсутствия восприимчивости. И, наконец, нет гарантии, что уровень восприимчивости или даже ее наличие не изменятся во времени.

До начала наших работ сведения о восприимчивости комаров к экзотическим штаммам плазмодиев были невелики и не однозначны. В некоторых случаях наблюдалось отсутствие восприимчивости (James, 1931; Shute, 1940; Shute, Maryon, 1947;Jeffery at al., 1954), а в других - ее наличие (Тибурская, 1962, 1965). Такое положение требовало продолжения исследований в данной области В. А. Бибикова (1977). Этому и посвящена данная работа (Бибикова и др., 1978).

Мы хотели узнать, как влияет на эффективность переноса географическая изоляция взаимодействующих организмов. Изучение восприимчивости Anopheles к экзотическим видам и штаммам малярийных паразитов, выполненное в связи с их завозом в США и Европу, дало не однозначные результаты. В одних случаях комары заражались, в других - нет. Так было установлено, что An. atroparvus, который был эффективным переносчиком европейских штаммов P. falciparum, совершенно невосприимчив к штаммам того же вида из Малайи, Индии и некоторых стран Африки (James, 1931; Shute, 1940; Shute, Maryon, 1947), а An. albimanus, переносчик малярии в Южной и Центральной Америке, невосприимчив к P. vivax из Новой Гвинеи (Jeffery at al., 1954). Никакой закономерности выявлено не было.

Данные о восприимчивости комаров фауны СССР к экзотическим штаммам малярии еще более скудны. Имеются лишь две работы, показавшие возможность заражения An. atroparvus одним корейским и двумя вьетнамскими штаммам трехдневной малярии (Тибурская, 1962, 1965). Переносить на условия нашей страны данные зарубежной литературы (полученные в других условиях на другом биоматериале), как справедливо отмечает В. А. Бибикова (1975), без проверки нельзя.

Материалы и методы

В работе использован P. vivax, выделенный от больного, заразившегося в Бразилии, и комары An. atroparvus. Использованная линия An. atroparvus происходит из окрестностей Краснодара, а, вообще, данный вид комаров встречается лишь в европейском Средиземноморье и прилегающих к нему районах (Беклемишев, 1944; Беклемишев, Желоховцев, 1945), т. е. далеко от Южной Америки. В качестве переносчика местной малярии он играл большую роль в Испании и в Приазовье (Беклемишев, 1944).

Заражали людей, нуждающихся в маляриотерапии. В мазках крови, взятых в момент кормления комаров, подсчитывали число макро и микрогаметоцитов на 200 лейкоцитов.

Комаров брали ни разу не пивших кровь. Их держали до и после заражения при температуре 23-25^о и влажности 80-95%. В отличие от остальных наших исследований, в данном случае вскрытие на ооцисты и спорозоиты проведено не в стандартные сроки (фактические данные приведены вместе с результатами), и число ооцист подсчитывали не точно, а по шкале А. Я. Лысенко и П. Б. Левитанской (1952): от 1 до 10 ооцист на желудке - 1 балл; от 11 до 25 - 2 балла; от 26 до 100 - 3 балла; свыше 100 - 4 балла.

В таблице 18 представлен материал, использованный в данном исследовании.

Таблица 18. Материал исследования.

опыта

Источник

заражения

комаров

Порядковый номер приступа

Число гаметоцитов

на 200 лейкоцитов

Микро | Макро

Число комаров,

накормленных

кровью

Больной Т.

Он же

Больной Б.

Больная Р.

Она же

Больная Н.

Она же

3 9

5 19

6 21

3 11

1 1

1 3

5 16

7 22

Результаты и обсуждение

Заражение An. atroparvus бразильским штаммом P. vivax обнаружено во всех опытах (табл. 19). Чем выше была концентрация гаметоцитов в крови, тем больше было зараженных комаров. Однако, не исключено, что эта зависимость кажущаяся: коэффициент корреляции равен 0.62+0.32, а это значит, что вероятность независимости показателей велика (р>0.05).

Таблица 19. Зараженность комаров An. atroparvus бразильским штаммом Pl. vivax.

N опыта	Исследование на ооцисты			Исследование на спорозоиты
	день	n	D	день	n	D
1	6 – 8 6		0 0 - 40	22 6		0 0 - 40
2	4 – 11 18		11 3 - 33	20 18		11 3 - 33
3	5 - 15 13		8 1 - 33	14 - 19 13		8 1 - 33
4	7 – 21 16		19 7 - 43	24-26 16		19 7 - 43
5	5 –11 20		10 3 - 30	11 20		10 3 - 30
6	5 - 8 11		9 2 - 39	- 11		9 2 - 39
7	4 - 14 6		50 19 - 81	10-22 6		50 19 - 81
8	4 - 14 8		37 14 - 69	20 8		37 14 - 69
Все	6-14 95		16 10 - 24	все 95		16 10 - 24

Обозначения: n - число исследованных особей, D - доля (%) зараженных особей и доверительный интервал этого показателя при р=0.05.

Из 98 вскрытых комаров с ооцистами было 15 (15 %). Число ооцист у зараженных комаров достигало 47 (в среднем 11). Из 47 комаров, вскрытых на наличие спорозоитов, инфицированными оказались 7 (15 %). Количество спорозоитов оценено в 1 и 2 балла.

Успешное развитие плазмодиев в комарах подтверждено фактом передачи: у пациентки после укусов 2 зараженных комаров (что было определено путем последующего их вскрытия) наблюдалась типичная клиника, и в крови обнаружены паразиты.

Сравнение заражаемости An. atroparvus разными штаммами P. vivax говорит о влиянии географического фактора: в нашем случае заразилось 15 % комаров, а симпатричными штаммами заражалось 24 - 33 % (Тибурская, 1964, 1965). И все же, завоз этого возбудителя в места распространения исследованной популяции комаров, и, весьма вероятно, всего вида представляет эпидемиологическую опасность (Daskova, 1977).

Возможность заражения An. atroparvus экзотическими штаммами плазмодиев подтвердили и другие исследователи (Джавадов и др., 1977; Teodorescu, 1983). Впоследствии восприимчивость комаров к экзотическим штаммам плазмодиев была обнаружена и у многих других видов комаров (Collins et all., 1986).

Поскольку аллопатричные штаммы плазмодиев связаны обычно с разными видами комаров и всегда с разными их популяциями, разница в их способности заражать местных и экзотических комаров вызвана адаптированностью к определенному переносчику. Эту мысль подтверждает и прямой эксперимент, изложенный в следующем разделе.

Если комары могут быть восприимчивы к экзотическим штаммам плазмодиев, то где гарантия того, что в один "прекрасный" момент они не окажутся переносчикам видов, с которыми вовсе не встречались?

Выводы

1. Географическая изоляция плазмодиев малярии от переносчиков, не гарантирует отсутствия их преадаптации.

2. Восприимчивость комаров к аллопатричному штамму плазмодиев ниже, чем к симпатричным штаммам.

3. Завоз P. vivax в районы распространения An. atroparvus может привести к возникновению местных очагов малярии.

5.2. Адаптация возбудителя к переносчику.

Вопрос о влиянии переносчика на возбудителя выходит за рамки данной работы. Однако, в связи с проблемой восприимчивости, целесообразно изложить результаты опыта по влиянию способа пассирования возбудителя на его способность заселять переносчика.

Материалы и методы.

Опыт выполнен на комарах Ae. aegypti и An. sacharovi, возбудителе P. gallinaceum и цыплятах.

Схема опыта. На первом этапе группу цыплят (4 штуки) заразили возбудителем малярии путем кормления на них Ae. aegypti, зараженных в ходе поддержания штамма плазмодиев. На втором - на одном из этих цыплят накормили 2 группы комаров (Ae. aegypti и An. sacharovi). На третьем этапе каждая группа комаров была накормлена на здоровых цыплятах. Тем самым цыплята были заражены; одни от Ae. aegypti, другие от An. sacharovi. на четвертом этапе из каждой группы взяли по одному цыпленку и на каждом из них накормили и Ae. aegypti и An. sacharovi. Так образовались 4 группы комаров: 1) Ae. aegypti, зараженные на цыплятах, донором возбудителя которых был этот же вид, 2) Ae. aegypti, зараженные на цыплятах, донором возбудителя которых был An. sacharovi, 3) An. sacharovi, зараженные на цыплятах, донором возбудителя которых был Ae. aegypti, 4) An. sacharovi, зараженные на цыплятах, донором возбудителя которых был этот же вид. Эти 4 группы комаров затем были исследованы на зараженность.

Результаты и обсуждение.

Зараженность комаров при пассировании через свой вид выше, чем через чужой (табл. 20). В наших опытах различия не велики, но они образовались всего лишь за одно половое поколение плазмодиев. Вероятно, что за многие тысячи поколений, в течение которых бывают разобщены популяции возбудителя, отбор среди них на адаптацию к определенному переносчику может зайти весьма далеко.

Таблица 20. Влияние пути передачи на заражение комаров P. gallinaceum.

Показатель	Путь передачи возбудителя
Показатель	A-A	S-A	S-S	A-S
Число особей, исследованных на ооцисты Ооцистный индекс (%) Доверительный интервал ооцистного индекса (%) Среднее обилие ооцист	31 61 44-76 19	30 40 25-58 10	37 62 46-76 136	37 49 33-64 83
Число особей, исследованных на спорозоиты Спорозоитный индекс (%) Доверительный интервал спорозоитного индекса (%)	30 60 42-75	37 32 20-48	20 55 34-74	24 33 18-53
Ооцистно-спорозоитный индекс	98	81	88	33

Обозначения путей передачи возбудителя: A-A - от Ae. aegypti к Ae. aegypti; S-A - от An. sacharovi к Ae. aegypti; S-S - от An. sacharovi к An. sacharovi; A-S - от Ae. aegypti к An. sacharovi.

Вывод.

Пассирование плазмодиев через определенного переносчика повышает их способность заселять именно его.

5.3. Восприимчивость без коэволюции.

Причина жесткой связи возбудителей и переносчиков видится в том, что они возникают в процессе длительной коэволюции взаимодействующих организмов (Беклемишев, 1955). К началу наших работ было известно о способности плазмодиев "использовать" разные виды комаров (Bray, Garnham, 1964; Vandenberg, Yoeli, 1965; Garnham, 1966). Но это не опровергало указанного представления, т. к. возможность связи взаимодействующих видов в этих случаях не исключалась.

Задача данного раздела - определить возможности возникновения эффективных ксено-пар для видов, контакт между которыми в природе невозможен. Это исследование имело не только теоретический интерес - мы стремились расширить круг лабораторных моделей циркуляции возбудителя малярии и приблизить модель к реальным процессам.

Как видно из последних обзоров (Алексеев, Кондрашова, 1985; Расницын, 1986) и других публикаций (Алексеев, Расницын, 1987; Захарова и др. 1988; Чернов, Чунина, 1988 и др.), в настоящее время чаще всего используется модель P. gallinaceum - Ae. aegypti. Но она плоха тем, что применяющийся в ней переносчик не участвует в циркуляции малярии человека. Этот недостаток мы стремились преодолеть, подобрав реального переносчиками малярии человека. Наша попытка основывалась на одном сообщении (Eyles, 1952), правда не подтвержденном, о заражении указанным возбудителем комаров An. freeborni и An. quadrimaculatus. Кроме того, был известен и другой случай заражения комаров "не свойственными" возбудителями (Vincke, 1967). Восприимчивыми оказались An. sacharovi и An. pulcherrimus, которые играют основную роль в действующих очагах малярии в Закавказье и Средней Азии (Артемьев, 1984).

Материалы и методы.

Оценка новых переносчиков проводилась путем сравнения с Ae. aegypti при одновременном кормлении их на одном и том же цыплёнке. Цыплята, на которых заражали комаров, имели паразитемию 2-3 балла по шкале А.И.Немировской. При заражении к каждому цыпленку подсаживали по 10 комаров (но кровь пили не все).

Результаты

Во всех опытах с обоими видами были обнаружены зараженные особи, в большинстве случаев они передавали возбудителя цыплятам. Передача подтверждена клинически, паразитологически (в мазках крови обнаружены типичные формы паразитов) и путем ксенодиагностики (путем обнаружения паразитов в комарах, накормленных кровью на цыплятах-реципиентах).

Для проверки возможности поддержания штамма возбудителя осуществлено несколько циклов циркуляции возбудителя с использованием каждого из исследуемых видов комаров. Полученные данные обобщены в таблице 21. Неудачные случаи передачи вызваны, скорее всего, тем, что на цыплят нападали только незараженные особи. В этих опытах An. sacharovi были заражены на 18 % и на цыпленка напало 8 самок, а для An. pulcherrimus эти величины соответственно 22 % и 7 самок. В обоих случаях вероятность нападения только незараженных особей близка к 0.2. Не исключено, конечно, что в не заразившихся цыплят попало слишком мало спорозоитов - меньше минимально-необходимой дозы.

Таблица 21. Общая характеристика восприимчивости An. sacharovi и An. pulcherrimus к Pl. gallinaceum.

Показатель	Вид комаров
Показатель	An. sacharovi	An. pulcherrimus
Число опытов по заражению комаров возбудителем	14	14
Число опытов, в которых комары заразились	14	14
Число опытов по передаче возбудителя от комаров цыплятам-реципиентам	9	5
Число опытов, в которых цыплята-реципиенты заразились возбудителем от комаров	8	4
Число циклов передачи возбудителя от комаров	7	8

An. sacharovi заражается реже Ae. aegypti (44 % против 70 %) и различия между ними не случайны (р=0.05). Но самое главное, что демонстрирует сравнение видов (рис. 4а), отсутствие корреляции в доле зараженных особей (R=0.22+30).

Рис. 4. Сопоставление экстенсивности заражения разных видов комаров ооцистами P. gallinaceum.

По оси абсцисс - доля (в %) заразившихся особей контрольного вида (Ae. aegypti).

По оси ординат - то же в параллельных группах экспериментального вида.

А - Ae. aegypti и An. sacharovi.

Б - Ae. aegypti и An. pulcherrimus.

Обратную картину даёт сравнение интенсивности заражения. У An. sacharovi она выше, чем у Ae. aegypti. И опять же разница достоверна (р<0.01) и велика (в среднем в 4 раза). Повышенное обилие возбудителя у An. sacharovi нельзя объяснить повышенным количеством выпитой ими крови и, соответственно, числом заглоченных гаметоцитов. An. sacharovi выпивают крови лишь немного больше, чем Ae. aegypti (2.8 мг против 2.2 мг). Как и по экстенсивности заражения, нет корреляции и в обилии ооцист у сравниваемых видов (R=0.35+0.29) (рис. 5а). Отсутствие корреляции не является, конечно, доказательством отсутствия какой бы то ни было связи вообще. В данном случае (рис. 4а) связь прослеживается: на фоне роста обилия ооцист у Ae. aegypti этот же показатель у An. sacharovi образует одновершинную кривую с пиком в районе 30-40 ооцист у Ae. aegypti.

Рис. 5. Сопоставление интенсивности заражения разных видов комаров ооцистами P. gallinaceum.

По оси абсцисс - среднее число ооцист у заразившихся особей контрольного вида (Ae. aegypti).

По оси ординат - то же в параллельных группах экспериментального вида.

А - Ae. aegypti и An. sacharovi.

Б - Ae. aegypti и An. pulcherrimus.

Сопоставление заражаемости An. pulcherrimus и Ae. aegypti (рис. 4б) показывает, что новый переносчик восприимчивее традиционного: число случаев превосходства его зараженности над зараженностью Ae. aegypti 9, а случаев обратного соотношения только три (вероятность случайной разницы р=0.05). В 9 опытах из 12 доля зараженных An. pulcherrimus превышала 50 %, а у Ae. aegypti таких результатов только 7.

Еще резче разница в интенсивности заражения (рис. 5б): обилие ооцист у An. pulcherrimus в большинстве опытов (57 %) превышало 100 и достигло 350, а у Ae. aegypti - ни разу не превысило 60. Разница сравниваемых видов не может объясняться ошибкой репрезентативности: ее вероятность слишком низка (р< 0.01). Ее нельзя связать и с количеством выпиваемой крови. Наоборот, An. pulcherrimus выпивают крови меньше, чем Ae. aegypti (1.4 против 2.2 мг). Своеобразие взаимоотношений сравниваемых видов переносчиков с одним и тем же видом возбудителя демонстрирует отсутствие корреляции в их заражении (по экстенсивности заражения R=0.53+0.15, а по интенсивности R=0.12+0.28).

На рис. 6 представлена зависимость обилия возбудителя в комарах от доли зараженных особей. Известно (Eyles, 1951), что у Ae. aegypti эта связь довольно четкая и имеет нелинейный характер. У каждого из новых видов характер зависимости между сравниваемыми показателями своеобразен и они отличаются как между собой, так и от Ae. aegypti. Для An. sacharovi зависимость близка к линейной (R=0.72+0.20) и описывается уравнением Y = 12 + 2.2X, где Х - доля (в %) зараженных особей, Y - среднее число ооцист у зараженных особей. У An. pulcherrimus линейная связь между указанными показателями невелика (R=0.49+0.25).

Рис. 6. Сопоставление экстенсивности и интенсивности заражения комаров ооцистами P. gallinaceum.

По оси абсцисс - доля (в %) заразившихся особей.

По оси ординат - среднее число ооцист у заразившихся особей.

А - An. sacharovi.

Б - An. pulcherrimus.

Результаты экспериментов позволяют оценить сохраняемость возбудителя в переносчиках. Это сохранение можно измерить по изменению доли зараженных особей возбудителем на стадии ооцисты и на стадии спорозоита. Фактические данные показаны на рис. 7. У обоих видов оба показателя заражаемости хорошо коррелируют: для An. sacharovi R=0.71+0.16, для An. pulcherrimus R=0.73+0.40. Связь этих показателей описывается уравнением Z=2+0.7U (для An. Sacharovi) и Z = 2.5U - 181 (для An. pulcherrimus) , где Z - доля (в %) особей, имеющих ооцисты. Уравнения показывают, что к окончанию спорогонии зараженность исследованных видов резко снижается. Причина снижения может быть разной: то ли зараженные комары погибают в большем числе, чем не зараженные, то ли спорозоиты не всегда достигают слюнных желез. Но несомненно, что у сравниваемых видов эти процессы происходят с разной интенсивностью.

Рис. 7. Сохраняемость P. gallinaceum в экспериментальных видах комаров.

По оси абсцисс - доля (в %) особей, зараженных ооцистами плазмодия.

По оси ординат - доля (в %) особей, зараженных спорозоитами плазмодия.

А - An. sacharovi.

Б - An. pulcherrimus.

Обсуждение результатов.

Полученные результаты доказывают возможность образования ксено-пар без длительной коэволюции. P. gallinaceum в естественных условиях не встречаются с An. sacharovi и An. pulcherrimus и по экологическим причинам (эти комары - охотники за крупной добычей, а P. gallinaceum паразит птиц), и по географическим (их ареалы далеки друг от друга), но при первом же контакте плазмодии заразили комаров. (Контакт этот был первым в буквальном смысле слова, т. к. в то время культур этих комаров ни у кого не было - они созданы нами впервые в мире - и, следовательно, никто не имел возможности проделать подобный опыт.) Этот факт много значит. В комарах происходит развитие, размножение и половой процесс споровика. Он проходят сквозь стенку кишки насекомого, живет в полости его тела, переходит в экскреторные железы, питается за счет его веществ. А раз образование новой ксено-пары возможно в случае таких тесных взаимоотношений, значит в других, более простых случаях, такое явление тем более вероятно. Полученные факты говорят о реальной угрозе появления новых переносчиков и новых возбудителей. Возможность возникновения новых ксено-пар подтверждена исследованиями, выполненными на других сочетаниях возбудителей и переносчиков (Graves, 1982; Fujita, 1986; Ichimori, 1989; Opiyo et all., 1988).

Во-вторых, данная работа показала пригодность An. sacharovi и An. pulcherrimus для лабораторного моделирования циркуляции P. gallinaсeum. Так как оба вида - переносчики малярии человека, их использование в модели приближает ее к нуждам эпидемиологии. Мировая новизна и полезность модели подтверждены авторским свидетельством об изобретении (Расницын, Званцов, Ясюкевич, 1991б).

В третьих, обнаруженные различия в заражаемости разных видов комаров одним и тем же возбудителем говорят о таком своеобразии отношений в каждой паре возбудителей, которые необходимо учитывать в эпидемиологических построениях.

Результаты экспериментов позволяют сделать также и два нецелевых заключения. Во-первых, поскольку ни в одном из многочисленных опытов не было отсутствия зараженных комаров, значит уровень паразитемии (2 - 3 балла), с которым мы работали, превышает нижний порог.

Во вторых, подтверждены выводы предыдущих разделов: отсутствие прямой пропорциональности между заражаемостью разных переносчиков и уровня заражения с количеством выпиваемой крови. Это говорит о том, как мало значит число заглоченных паразитов и как велико влияние свойств переносчика.

Выводы.

1. Комары An. sacharovi и An. pulcherrimus способны заражаться возбудителем малярии P. gallinaceum и передавать его позвоночному хозяину, хотя всякая возможность взаимной коодаптации на основе коэволюции в данных случаях была невозможна.

2. Имеются существенные различия в интенсивности и экстенсивности заражения представителей разных родов комаров одним и тем же видом возбудителя малярии и в выживаемости плазмодиев в их организме.

3. Комары An. sacharovi и An. pulcherrimus пригодны для лабораторного моделирования циркуляции возбудителя малярии P. gallinaceum. Поскольку оба вида комаров являются реальными переносчиками малярии человека, их использование в модели приближает получаемые результаты к реальным процессам.

4. Возникновение эффективных ксено-пар возможно без длительной коэволюции взаимодействующих организмов.

5.4. Сравнение восприимчивости разных видов.

Возможность заражения представителей одного рода комаров одним и тем же видом малярии считается само - собой разумеющейся. В руководствах и учебниках пишут: "возбудителя малярии [имеется в виду малярия человека. С.Р.] передают малярийные комары рода Anopheles."

Полевые данные ("анофелизм без малярии") давно уже наводили на мысль о разной векторной способности разных видов комаров. Многие исследователи (Boyd, Kitchtn, 1936; Young et all., 1946; Collins, 1962; Collins et all., 1963; Coathney, 1971) считали, что это может быть связано с различиями их восприимчивости.

Но это были косвенные данные. Прямое же сравнение давало неоднозначный ответ: в одних случаях разница между видами и даже разными штаммам одного вида то проявлялась (Huff, 1929; Boyd et all., 1938; Eyles, 1952; Jeffery et all., 1954; Kilama, Craig, 1969), подобно разнице в восприимчивости к вирусам (McLintock, 1978), а то нет (Boyd, Jobbins, 1940; Young, Burgess, 1948). А раз так, ничего предсказать невозможно - те виды, которые нас интересуют, надо испытывать.

В нашей стране таких испытаний не было, и данная работа (Dashkova, Rasnitsyn, 1982; Расницын, Ясюкевич, Званцов, 1990) - попытка заполнить указанный пробел.

Нам удалось сопоставить восприимчивость трех видов Anopheles группы An. maculipennis на реальной малярии человека P. vivax (Dashkova, Rasnitsyn, 1982). Кроме того, аналогичная работа проделана на лабораторных моделях: P. gallinaceum с переносчиками из рода Aedes и Anopheles (Расницын, Ясюкевич, Званцов, 1990).

Кроме поиска ответа на поставленный вопрос, мы хотели расширить набор видов, используемых с P. gallinaceum. Хотя известно, что к этому возбудителю восприимчивы многие комары (Russel, Mohan, 1942; Демина, Левитанская, Авраменко, 1951; Garnham, 1966), в работе применяют только один - Ae. aegypti, что не позволяет учесть видовые особенности. Особенно привлекательным казался Ae. togoi. Этот вид очень удобен: комары крупные, хорошо нападают на доноров; методы культивирования его разработаны (Чагин, 1943; Wearthersby, 1962; Александрова, Тамарина, Резник, 1978; Trimble, Wellington, 1979; Ясюкевич, Расницын, 1990).

Материалы и методы.

Исследования выполнены на реальной малярии человека (P. vivax и комары группы An. maculipennis) и на лабораторных моделях (P. gallinaceum и комары из рода Aedes и Anopheles). С малярией человека проведен один опыт (объем материала приведен вместе с результатами). С Aedes проведено 15 опытов, в которых исследовано 690 Ae. togoi и 813 Ae. aegypti, с Anopheles - 9 опытов, в которых исследовано 265 An. sacharovi, 442 An. atroparvus, 260 Ae. aegypti и 448 Cx. pipiens.

Сравнение восприимчивости проведено путем сопоставления ооцистного индекса и обилия ооцист у сравниваемых видов, накормленных одновременно на одном и том же доноре. Только опыты на лабораторной модели Anopheles велись несколько иначе. Поскольку в них сравнивалась восприимчивость четырех видов, надо было накормить на одном доноре 4 группы комаров, но сделать это одновременно невозможно. Поэтому садки с комарами прикладывали к донору парами, какой вид попадал в какую пару, решалось каждый раз жребием, т. е. было равномерно случайным. Особенностью этой серии было также то, что сравнение видов одного рода сопровождалось контролем - представителями родов Aedes и Culex. Ae. aegypti был взят для того, чтобы быть уверенным, что у донора имеются жизнеспособные гаметоциты, т. к. этот вид заражается чаще, чем An. sacharovi, а Cx. pipiens - как контроль от супердиагностики. То, что Cx. pipiens не заражается P. gallinaceum мы знали из предварительных специальных опытов; материал данных экспериментов подтвердил это еще раз.

Результаты и обсуждение.

Восприимчивость к P. vivax.

Сравнение восприимчивости видов группы maculipennis к P. vivax (табл. 22) показало, что у всех из них паразит достигает стадии ооцисты одинаково часто, но доля паразитов достигших стадии спорозоита различается. Ооцистно-спорозоитный индекс (т. е. процент комаров с ооцистами которые затем развились в спорозоиты) у An. messeae (21 %) был значительно ниже чем у An. atroparvus (62 %) и An. sacharovi (59 %) и эта разница не случайна (р<0.01). Обнаруженное различие может объясняться либо повышенным разрушением спорозоитов у An. messeae, либо их неспособностью достигать слюнных желез. (То, что не все спорозоиты попадают в слюнные железы, показано Collins W. E. et all. (1976)). Но, так или иначе, восприимчивость этих видов не идентична.

Таблица 22. Заражаемость разных видов комплекса An. maculipennis одним и тем же штаммом Pl. vivax.

Показатели	Вид комаров
Показатели	An. atroparvus	An. messeae	An. sacharovi
Число особей, исследованных на ооцисты	62	201	42
Ооцистный индекс (%)	34	24	29
Доверительный интервал ооцистного индекса (%)	23 - 46	18 - 30	17 - 44
Обилие ооцист	6.4	7.3	7.2
s обилия ооцист (%)	8.7	10.5	10.4
Число особей, исследованных на спорозоиты	26	142	23
Спорозоитный индекс (%)	8	15	17
Доверительный интервал спорозоитного индекса (%)	2 - 24	10 - 22	7 - 37
Доля (в %) выживших макрогаметоцитов	0.31	0.35	0.39
Выживание плазмодиев в течение спорогонии (%)	21	62	59

Имеющийся материал не выявил различий между восприимчивостью An. atroparvus и An. sacharovi, но это не служит доказательством их идентичности - дело может быть в том, что материал, который удалось набрать по малярии человека слишком мал (всего 1 опыт).

Восприимчивость к P. gallinaceum.

Исследованная линия Ae. togoi оказалась высоко восприимчивой: во всех 15 опытах были зараженные особи, все 6 попыток заразить через него хозяина окончились успешно. (Специальных опытов по передаче возбудителя через Ae. aegypti мы не ставили, так как эта способность хорошо известна. В частности, имеющийся штамм P. gallinaceum поддерживается с использованием перевивки через комаров этого вида. За последние 2 года такая перевивка успешно осуществлялась не менее 100 раз.) Спорозоитный индекс у Ae. togoi в среднем лишь на 8 % ниже ооцистного, что говорит о высокой выживаемости плазмодиев.

Ae. togoi заражаются чаще, чем Ae. aegypti, и обилие ооцист у них выше (табл. 23). Вероятность того, что эти различия случайны, очень мала (p=0.000003). Повышенную заражаемость Ae. togoi нельзя объяснить повышенным количеством заглоченных возбудителей. Они выпивают только в 2 раза больше крови (4.6+0.3 мг против 2.2+0.2 мг Ae. aegypti), а обилие ооцист у них выше в десятки и сотни раз. Это значит, что зараженность определяется не только и не столько обилием заглоченных возбудителей, а другим фактором или факторами. (Тем самым подтверждается вывод, сделанный в предыдущем разделе.)

Таблица 23. Сравнение заражаемости Ae. aegypti и Ae. togoi возбудителем малярии Pl. gallinaceum.

Показатель

Вид комаров

Ae. aegypti

Ae. togoi

Число опытов

Доля опытов, в которых были получены зараженные особи, %

Доля опытов, давших заражение более 50% комаров, %

Доля опытов, в которых среднее обилие ооцист было выше 50, %

Доля опытов, в которых среднее обилие ооцист было выше 100, %

Число заражавшихся цыплят

Доля заразившихся цыплят, %

100

У Ae. togoi, так же как у Ae. aegypti (Алексеев, Расницын, 1987; Расницын, Жарова, 1985), наблюдается высокая степень корреляции (R=0,95±0.03) между зараженностью особей возбудителем на стадии ооцисты и на стадии спорозоита (рис. 8). В исследованном диапазоне от 40 до 100 % характер зависимости описывается уравнением: y=1.2x - 25.2, где y - доля особей, зараженных возбудителем на стадии спорозоита, x - то же на стадии ооцисты. На рисунке и в математическом описании зависимости видно, что абсолютное значение потери возбудителя в комарах не зависит от доли зараженных особей. Это значит, что при низкой зараженности она происходит чаще, чем при высокой.

Рис. 8. Сопоставление зараженности комаров Ae. togoi ооцистами и спорозоитами P. gallinaceum.

По оси абсцисс - доля (в %) особей, имевших ооцисты.

По оси ординат - доля (в %) особей, имевших спорозоиты.

У Ae. togoi не обнаруживается прямолинейной связи между долей зараженных особей и интенсивностью заражения (измеряемой числом ооцист). Коэффициент корреляции всего лишь 0.57±0.17. Как видно из рис. 9, прямолинейная связь имеется лишь при зараженности в диапазоне от 40 до 80 % (R=0.86±0.26), но при высокой доле зараженных особей прямолинейный характер зависимости нарушается из-за большого числа групп с очень высоким обилием ооцист.

Рис. 9. Сопоставление экстенсивности и интенсивности заражения комаров Ae. togoi ооцистами P. gallinaceum.

По оси абсцисс - доля (в %) заразившихся особей.

По оси ординат - среднее число ооцист у заразившихся особей.

У Ae. aegypti связь между долей зараженных и обилием возбудителя ближе к прямолинейной (R=0.76±0.18), вероятно потому, что не было случаев с заражаемостью близкой к 100 % (максимум 88 %).

Самое же главное – заражаемость сравниваемых видов не коррелирует (рис. 10 и 11). По доле зараженных особей R=0.39±0.22, а по обилию ооцист R= - 0.11±0.26.

Рис. 10. Сопоставление экстенсивности заражения Ae. aegypti и Ae. togoi ооцистами P. gallinaceum.

По оси абсцисс - доля (в %) заразившихся особей Ae. aegypti.

По оси ординат - то же в параллельных группах Ae. togoi.

Рис. 11. Сопоставление интенсивности заражения Ae. aegypti и Ae. togoi ооцистами P. gallinaceum.

По оси абсцисс – среднее число ооцист у заразившихся особей Ae. aegypti.

По оси ординат - то же в параллельных группах Ae. togoi.

При сравнении восприимчивости представителей рода Anopheles к P. gallinaceum результаты были особенно неожиданными. Хотя мы взяли таксономически очень близкие виды (An. atroparvus и An. sacharovi - виды-двойники) и перепробовали все реальные уровни паразитемии донора (табл. 24) один из них заражался, а другой - нет (табл. 25). Полученные данные позволяют однозначно заключить, что использованные в опытах популяции комаров An. atroparvus и Cx. pipiens не способны заражаться испытанным штаммом P. gallinaceum. Девять опытов, в которых комары контрольных видов заражались в самой разной степени и в которых исследовано более 400 особей не дали ни одного случая заражения. Надо отметить, что мы и ранее неоднократно пытались заразить эти виды комаров этим же возбудителем. Результат всегда был отрицателен, но, поскольку предыдущие опыты не сопровождались тщательным контролем, не было уверенности в том, что результат не вызван какими-либо сторонними причинами. Теперь таких сомнений нет. (Не исключено, что невосприимчивость - свойство данных видов в целом, но делать такой вывод на основании свойств лишь одной популяции преждевременно.)

Таблица 24. Объем исследованного материала.

N опыта

Паразитемия

Число исследованных особей

Ae. aegypti

An. atroparvus

An. sacharovi

Cx. pipiens

Все

1.0

2.0

2.5

3.0

3.5

4.0

260

442

265

448

Таблица 25. Заражаемость разных видов комаров возбудителем малярии Pl. gallinaceum.

N опыта	Вид комаров и показатель зараженности
	Ae. aegypti	An. atroparvus\|	An. sacharovi	Cx. pipiens
	ОИ \| 00	ОИ \| 00	ОИ \| 00	ОИ \| 00
1 2 3 4 5 6 7 8 9 Все	6 2 - 20 7 83 63 - 93 31 96 81 - 99 39 56 37 - 73 27 83 65 - 92 30 83 65 - 92 33 50 34 - 66 20 79 63 - 90 38 54 36 - 70 32 65 59 - 70 27	0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0	24 13 - 41 15 97 84 - 99 95 82 66 - 91 106 52 33 - 70 92 68 48 - 83 80 54 37 - 71 76 62 43 - 76 99 67 49 - 81 84 74 58 - 86 46 69 63 - 74 77	0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0 0 0 - 6 0

Обозначения: ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя; ОО - обилие ооцист.

Кроме различий в восприимчивости разных видов полученные данные выявили также отсутствие связи восприимчивости с таксономической близостью видов. Из видов-двойников (An. sacharovi и An. atroparvus) одним и тем же штаммом плазмодия заражается только один. Но этим же штаммом заражаются представители другого рода. Правда, количественные характеристики их восприимчивости не совпадали: доля заразившихся Ae. aegypti была обычно выше, чем An. sacharovi, а интенсивность заражения ниже (p<0.001). Как и в случае с Ае. togoi, зараженность не коррелировала (табл. 26.).

Таблица 26. Статистическая связь между заражаемостью комаров и уровнем паразитемии у донора возбудителя малярии Pl. gallinaceum, а также между собой.

Сопоставляемые показатели

R±m_R

Паразитемия донора и ОИ Ae. aegypti

Паразитемия донора и ОО Ae. aegypti

Паразитемия донора и ОИ An. sacharovi

Паразитемия донора и ОО An. sacharovi

ОИ Ae. aegypti и ОИ An. sacharovi

ОО Ae. aegypti и ОО An. sacharovi

ОИ Ae. aegypti и Ae. aegypti

ОИ An. sacharovi и ОО An. sacharovi

0.48±0.33

0.51±0.33

0.59±0.31

0.28±0.36

0.67±0.28

0.37±0.35

0.94±0.13

0.91±0.16

Обозначения: R±m_R - коэффициент корреляции и его ошибка репрезентативности при р=0.05; ОИ - ооцистный индекс; ОО - обилие ооцист.

На примере данного исследования бросается в глаза отсутствие корреляции между таксономической близостью видов и их восприимчивостью: Ae. aegypti и An. sacharovi (представители разных родов) могут воспринимать (и, как далее будет показано, обеспечивать полный цикл развития и передачу) P. gallinaceum, а An. atroparvus (вид-близнец An. sacharovi) даже не заражается.

Хотя два представителя разных родов комаров и воспринимали один и тот же вид плазмодиев, количественные характеристики их зараженности не совпадали. Доля заразившихся Ae. aegypti была обычно выше, чем доля заразившихся An. sacharovi (впрочем, эта разница статистически не достоверна, р>0.05). А вот интенсивность заражения An. sacharovi всегда была много выше интенсивности заражения Ae. aegypti (и сомневаться в этой разнице не приходится - вероятность того, что она вызвана ошибкой репрезентативности p<0.001). Зараженность сравниваемых видов отличалась не только количественными показателями, она и не коррелировала (табл. 25.). Как, впрочем, не было выявлено статистической связи между уровнем паразитемии донора и показателями зараженности каждого из видов комаров. При этом связь между экстенсивностью и интенсивностью заражения проявилась и у Ae. aegypti, и у An. sacharovi.

Конечно, в иных случаях коррелятивная связь между таксономическими критериями и отношением к ксеноорганизму может и проявиться, но ценность приведенного результата в том, что он показывает, что подобная корреляция возможна не всегда.

Как показали многочисленные исследования выполненные позднее на самых разных сочетаниях возбудителей и переносчиков, видовые и, более того, штаммовые различия восприимчивости - общее правило (Jones, Foster, 1978; Beaty et all., 1979; Duhrkopf, Trpis, 1980; Fujita, 1986 ; Moloo, Kutuza, 1988; Perlowagora-Szumlewicz et all., 1988).

Полезно отметить, что своеобразие реакции разных видов комаров на микроорганизмы проявляется не только в отношении плазмодиев. Аналогично, большие различия, не коррелирующие с таксономической близостью видов, выявлены и в реакции на энтомопатогенных бактерий (Расницын, Войцик, Ясюкевич, 1991; Расницын, Ясюкевич, Войцик, 1992).

Выводы.

1. Внутри семейства Culicidae нет корреляции между таксономической близостью видов и их восприимчивостью к плазмодиям малярии: виды одного рода могут различаться по этому свойству сильнее, чем представители разных родов; вплоть до того, что один из видов-двойников, может быть высоко восприимчив, а другой полностью рефрактерен.

2. Во всех случаях обнаружены различия между восприимчивостью разных видов. Не найдено ни одной пары видов, восприимчивость которых можно было бы считать идентичной или, хотя бы, коррелирующей.

5.5. Обзор данных о восприимчивости комаров России и сопредельных стран к экзотическим видам и штаммам плазмодиев.

Поскольку, как было показано выше, в настоящее время нет признаков, позволяющих предсказать восприимчивость определенных видов, для определения опасности завоза в нашу страну экзотических видов и штаммов малярии было предпринято специальное исследование на реальном материале. Основной целью было предвидеть последствия завоза, как это делается в других странах (Games, 1931; Shute, Maryon, 1951; Collins, et all., 1973, 1975; de Zulueta et all., 1976). Кроме того, определение восприимчивости комаров к экзотическими видами и штаммами возбудителей позволяет оценить влияние таксономии и географии на возможность восприимчивости в реальных случаях малярии человека.

До начала наших работ (Dashkova, Rasnitsyn, 1982) были лишь 2 публикации, касающиеся одного вида плазмодиев из одной географической точки (Тибурская, 1962, 1965), которые показали возможность переноса трех штаммов P. vivax из юго-восточной Азии комарами An. atroparvus.

Материалы и методы.

В работе использованы комары из лабораторных колоний (An. atroparvus и An. sacharovi) и взятые из природы (An. messeae и An. subalpinus). Выбор указанных видов определен их значением - они наиболее эффективные переносчики местной малярии. Возбудителей получали от людей, приехавших из-за рубежа. Чаще всего комаров заражали возбудителем венозной кровью больного путем искусственного кормления, но иногда и путем непосредственного кормления на доноре (естественно, только лабораторные штаммы и с согласия донора). Перед самым кормлением комаров кровь, которую они должны были пить, брали на анализ.

Результаты и обсуждение.

Результаты изучения восприимчивости комаров к завозным штаммам P. vivax (табл. 27) показывают, что все они способны заражаться указанным видом плазмодия из любой точки его ареала. Поскольку P. vivax имеет широкий круг переносчиков (Garnham, 1966), можно предполагать, что и другие виды комаров нашей фауны, восприимчивые к местным P. vivax, будут передавать и экзотические штаммы. Значит, завоз этого возбудителя опасен.

Таблица 27. Заражение комаров фауны России и сопредельных стран экзотическими штаммами Pl. vivax.

Источник штамма плазмодия		N		Обилие гаметоцитов				Ооцисты		Спорозоиты
				микро			макро	n	ОИ	n	СИ
	An. sacharovi
	Лаос		2		144 - 220	132 - 325		41	29	23	17
	An. atroparvus
	Лаос		3		70 - 220	139 - 325		67	34	28	7
	An. messeae
	Нигерия		1		30	51		33	12	41	7
	Индия		2		71 - 96	134 - 170		38	13	8	12
	Пакистан		3		17 - 44	32 - 90		43	5	40	5
	Йемен		13		12 - 325	325 - 541		21	25	275	15
	Лаос		5		63 - 220	123 - 325		273	24	134	15
	Бразилия		8		49 - 555	55 - 230		98	15	46	14

Примечание: Обилие гаметоцитов приведено по их числу на микролитр. В случае нескольких опытов с одним штаммом указаны предельные значения этого показателя.

Обозначения: N - число опытов, n - число исследованных особей, ОИ - ооцистный индекс (доля в % комаров, имеющих ооцисты); СИ - спорозоитный индекс (доля в % комаров, имеющих спорозоиты)

Сравнение развития различных штаммов P. vivax в одних и тех же видах комаров выявило достоверные количественные различия в их адаптации к переносчикам. Следовательно, можно ожидать, что разные его штаммы будут "осваивать" разные виды переносчиков с разной скоростью.

Оценка восприимчивости к P. falciparum (табл. 28 и 29) показала, что An. atroparvus и An. messeae не заражаются штаммами этого плазмодия из Африки и юго-восточной Азии. Как не заражаются ими популяции An. atroparvus из западной Европы (Shute, Maryon, 1951; de Zulueta et al., 1976). Заражение An. sacharovi и An. subalpinus, хотя и редко, но возможно. Это подтвердили и другие исследователи (Джавадов и др., 1978). Такие данные говорят об опасности завоза этого возбудителя на Кавказ.

Таблица 28. Заражение комаров An. subalpinus и An. sacharovi фауны Росси и сопредельных стран экзотическими штаммами Pl. falciparum.

Источник штамма плазмодия	N	Обилие гаметоцитов		Ооцисты		Спорозоиты
Источник штамма плазмодия	N	микро	макро	n	ОИ	n	СИ
An. subalpinus
Центр. Африка	1	29	48	0	-	4	25
An. sacharovi
Верхняя Вольта	2	13 - 14	26 - 28	35	0	22	0
Гана	1	30	48	14	0	7	0
Центр. Африка	6	13 - 29	13 - 48	17	0	30	20
Либерия	1	3	8	5	60	0	-
Конго	2	26	90	15	0	18	0
Заир	1	+	+	0	-	5	0
Гвинея-Биссау	6	5 - 19	5 - 48	43	2	31	0
Мали	4	8 - 12	8 - 25	32	0	19	0
Экв.Гвинея	1	17	51	9	0	4	0
Индия	1	+	+	10	0	8	0
Пакистан	1	+	+	11	0	11	0

Примечание и обозначения как в таблице 26.

Таблица 29. Заражение комаров An. atroparvus и An. messeae фауны России и сопредельных стран экзотическими штаммами Pl. falciparum.

Источник штамма плазмодия	N	Обилие гаметоцитов		Ооцисты		Спорозоиты
Источник штамма плазмодия	N	микро	макро	n	ОИ	n	СИ
An. atroparvus
Мали	7	7 - 12	8 - 25	214	0	246	0
Гвинея-Биссау	5	6 - 60	5 - 48	172	0	129	0
Гвинея	1	+	+	36	0	29	0
Берег Сл. Кости	1	48	36	33	0	22	0
Верхняя Вольта	2	13 - 40	26 - 28	86	0	60	0
Гана	1	30	40	51	0	31	0
Центр. Африка	2	13 - 27	13 - 27	50	0	46	0
Того	1	24	42	37	0	24	0
Сомали	2	38 - 71	50 - 114	65	0	38	0
Замбия	1	11	11	33	0	25	0
Экват. Африка	5	17 - 62	33 - 132	107	0	114	0
Конго	2	10 - 26	20 - 90	75	0	46	0
Индия	2	12	22	45	0	44	0
Пакистан	1	+	+	49	0	31	0
An. messeae
Мали	4	8 - 12	8 - 25	63	0	58	0
Гвинея-Биссау	3	6 - 12	5 - 18	62	0	53	0
Гвинея	1	+	+	27	0	21	0
Верхняя Вольта	2	13 - 14	26 - 28	39	0	38	0
Гана	1	30	46	19	0	18	0
Центр. Африка	2	13 - 27	13 - 27	29	0	19	0
Экват. Гвинея	1	17	51	10	0	7	0
Конго	1	26	90	26	0	7	0
Индия	1	+	+	22	0	16	0
Пакистан	1	+	+	18	0	16	0

Примечание и обозначения как в таблице 26.

Подобные результаты (различная восприимчивость к разным штаммам P. falciparum) были получены и с другими видами комаров (Games, 1931; Shute, Maryon, 1951). Причина, несомненно, в больших различиях штаммов этого плазмодия. И, вообще, P. falciparum очень неоднороден (Лысенко, Бароян, 1979). Не исключено, что под одним названием скрывается не один вид. Может быть, изучение восприимчивости комаров к различным штаммам P. falciparum послужит средством их диагностики.

Изучение восприимчивости комаров к P. ovale и экзотическим штаммам P. malariae проведено в небольших объемах т. к. завоз их в СССР происходит редко. Во всех опытах (табл. 30) развития этих паразитов в An. atroparvus не было.

Таблица 30. Заражаемость An. atroparvus фауны России и сопредельных стран экзотическими штаммами Pl. ovale и Pl. malariae.

Источник штамма плазмодия	N	Обилие гаметоцитов			Ооцисты		Спорозоиты
Источник штамма плазмодия	N	микро		макро	n	ОИ	n	СИ
Pl. malariae
Гвинея	1	25	33		10	0	21	0
Pl. ovale
Мали	1	9	13		27	0	24	0
Танзания	1	30	40		31	0	32	0
Мозамбик	1	20	30		29	0	16	0
Центр. Африка	1	12	24		68	0	27	0
Гвинея	2	9 - 14	14 - 18		41	0	50	0

Примечание и обозначения как в таблице 26.

Заключение.

Основной результат работы - выявление реального положения с опасностью завоза малярии на территорию нашей страны (Бибикова, 1973; Дашкова, 1977; Dashkova, Rasnitsyn, 1982).

Кроме того, получено подтверждение возможной восприимчивости комаров к экзотическим штаммам плазмодиев. Показано также, что степень преадаптации разных штаммов возбудителя по отношению к разным видам комаров (точнее их популяциям) выражена в разной степени. Такие данные свидетельствуют о том, что переносчиком плазмодиев малярии человека может стать любой вид Anopheles. Но происходить это будет с разной скоростью. В некоторых парах (например, P. vivax и. An. atroparvus) отбора не потребуется или он займет лишь несколько поколений, в других (например, P. falciparum и An. sacharovi) потребует больше времени, а в третьих (например, P. falciparum и An. atroparvus) этот процесс будет столь длительным, что говорить о реальной опасности не приходится.

Выводы.

1. Комары способны заражаться экзотическими штаммами возбудителей малярии, но для разных видов комаров в отношении разных видов плазмодиев эта способность различна.

2. Исследованные виды комаров воспринимают штаммы P. vivax из всех частей ареала этого плазмодия.

3. An. atroparvus, An. messeae не заражались экзотическими штаммами P. falciparum.

4. An. sacharovi воспринимал лишь некоторые из экзотических штаммов P. falciparum.

5. Случаев заражения комаров An. atroparvus плазмодиями P. ovale и P. malariae не было.

6. P. falciparum неоднороден. Не исключено, что под этим названием скрывается не один вид. Изучение восприимчивости комаров к различным штаммам этого плазмодия может послужить средством их диагностики.

Заключение главы 5.

Связь между таксономическим положением возбудителей и переносчиков прослеживается лишь в отношении высших таксономических категорий. При этом принадлежность членистоногого к определенной таксономической группе не является свидетельством того, что оно восприимчиво к соответствующей группе возбудителей, а лишь того, что эту восприимчивость нельзя исключить без проверки.

На уровне родов и видов внутри семейства Culicidae по отношению к гемоспоридиям нет связи между таксономической близостью видов и их восприимчивостью, какая наблюдается, например, у клещей по отношению к боррелиям (Филиппова, 1990). Виды одного рода могут различаться по этому свойству сильнее, чем виды из разных родов; вплоть до того, что один из видов-двойников, может быть высоко восприимчив, а другой рефрактерен. Во всех случаях обнаружены различия между восприимчивостью разных видов комаров к одним и тем же штаммам плазмодиев малярии. Аналогично, наблюдаются видовые различия восприимчивости комаров и к вирусам (McLintock, 1978). Во всех случаях обнаружены различия между восприимчивостью разных видов комаров к одним и тем же штаммам плазмодиев малярии. Единственная закономерность - связь возбудителей малярии человека с представителями рода Anopheles.

Географическая изоляция штаммов возбудителей от популяций членистоногих, не гарантирует отсутствия восприимчивости. Наличие восприимчивости (т.е. адаптации возбудителя к переносчику) возможно в случае видов членистоногих и микроорганизмов (конкретно, комаров и гемоспоридий), которые в естественных условиях встречаться не могли, а, значит, между которыми не мог проходить процесс длительной коэволюции взаимодействующих организмов. Указанная способность позволила создать новую модель циркуляции возбудителя малярии, в которой использованы комары - реальные переносчики этой болезни среди людей. Благодаря чему эта модель ближе к реальным эпидпроцессам.

Глава 6. ИНДИВИДУАЛЬНАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВОСПРИИМЧИВОСТИ.

Индивидуальная изменчивость свойственна всем характеристикам всех живых организмов от вирусов (Верета, Воробьева, 1990) до млекопитающих (Яблоков, 1966), в том числе и насекомым (McDonald, Overland, 1974; Качаворян, Тертерян, 1983), и плазмодиям (McBride, Walliker, 1982; Collins et all., 1986), и другим паразитам (Thompson, Limbery, 1988). Изменчивость комаров изучалась во всех, казалось бы, мыслимых аспектах: генетическая (Aslamkhan et all., 1972; Стегний и др., 1976; Tadei, 1980; Kasule, Cook, 1988), морфологическая (Зуйтин, 1926; Пархоменко, 1981; Beckett, Townson, 1982), физиологическая (Тамарина, 1972; Vandehey et all., 1979), по реакции на инсектициды (Некрасова, 1989), даже по способности переносить голодание (Расницын, Ясюкевич, 1988; Juliano, 1989). В отношение же восприимчивости к плазмодиям исследовались различия морфологических форм (Collins et all., 1979). На возможность индивидуальной изменчивости восприимчивости внимания не обращали. Разный уровень зараженности особей объяснялся видовыми и штаммовыми особенностями плазмодиев и разным их числом, попавшим в определенную особь (Boyd, 1940; James, 1931; James et al., 1932). На примере многих симбионтов известно (Кеннеди, 1978), что "зараженность" хозяев неравномерна. Это же относится и к комаром с плазмодиями. Хотя разброс зараженности комаров виден во всех работах (где приводятся соответствующие данные), он не привлекал внимания. Но знание характера распределения зараженности особей переносчика необходимо для понимания эпидемического процесса.

6.1. Распределение возбудителей среди переносчиков.

Ранее изучением индивидуальной изменчивости заражения комаров плазмодиями занимались лишь C.G. Huff (1929) и E. Eyles (1951). Они обратили внимание на то, что она высока и не соответствует биномиальному распределению и его производным - нормальному распределению и распределению Пуассона. Причин, которые могли это вызвать, они не касались.

Задача данного исследования состояла в том, чтобы определить характер распределения возбудителей между особями переносчика и выявить, как это связано с распределением возбудителей в крови донора.

Материалы и методы

В работе использованы Ae. aegypti, An. sacharovi и Pl. gallinaceum. Схема опытов: Партию комаров делили на две группы, каждую из которых кормили одной и той же кровью, но одна из них (группа "Е") пила ее из цыпленка, а вторая (группа "И") - искусственно (по методу, описанному ранее). В первой серии опытов кровь в кормушке была разбавлена только консервантом, который составлял 20 % к взятой крови, а во второй, кроме того, физиологическим раствором в 10 раз. Кровь в кормушках тщательно перемешивали. Объем материала и уровень паразитемии доноров возбудителя приведен в таблице 31.

Таблица 31. Объем исследованного материала и уровень паразитемии доноров возбудителя.

серия

опытов

опыта

Вид комаров

n_е

n_и

Ae. aegypti

An. sacharovi

2.5

2.0

2.5

2.0

165

140

119

195

142

125

175

108

Ae. aegypti

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5

Обозначения: П - паразитемия донора, n_е - число исследованных особей при естественном кормлении кровью, n_и - число исследованных особей при искусственном кормлении кровью.

Результаты и обсуждение.

Фактические результаты приведены в таблицах 32 и 33. При искусственном кормлении и интенсивность, и экстенсивность заражения комаров несколько снижены. Этому надо верить, т. к. различия обнаружены во всех шести опытах и, значит, вероятность случайного совпадения около 0,15.

Таблица 32. Зараженность Ae. aegypti при разных способах дачи крови.

Показатель

Способ кормления кровью

Номер опыта

Доля зараженных особей

Доверительный интервал доли зараженных особей

82 - 92

50 - 64

93 - 99

65 - 80

72 - 88

46 - 63

Среднее число ооцист у всех особей

Коэффициент вариации предыдущего показателя

123 %

210 %

63 %

140 %

127 %

106 %

Среднее число ооцист у зараженных особей

Коэффициент вариации предыдущего показателя

110 %

145 %

60 %

108 %

186 %

120 %

Медиана числа ооцист у всех особей

Медиана числа ооцист у зараженных особей

Максимальное число ооцист

141

106

174

Примечание: Все доли приведены в %.

Обозначения: Е - естественное кормление кровью, И - искусственное кормление кровью.

Таблица 33. Зараженность An. sacharovi при разных способах дачи крови.

Показатель

Способ кормления кровью

Номер опыта

Доля зараженных особей

Доверительный интервал доли зараженных особей

43 - 61

41 - 55

48 - 70

44 - 64

68 - 89

69 - 85

Среднее число ооцист у всех особей

105

Коэффициент вариации предыдущего показателя

223 %

267 %

211 %

186 %

125 %

146 %

Среднее число ооцист у зараженных особей

129

112

100

156

118

Коэффициент вариации предыдущего показателя

154 %

147 %

182 %

158 %

90 %

95 %

Медиана числа ооцист у всех особей

Медиана числа ооцист у зараженных особей

Максимальное число ооцист

277

282

235

216

332

250

Примечание: Все доли приведены в %.

Обозначения: Е - естественное кормление кровью, И - искусственное кормление кровью.

Анализ характера распределения плазмодиев у комаров (рис. 12 - 14) показал, что перемешивание крови в кормушке не способствует равномерности заражения, а разбавление крови дало результат, противоположный ожидаемому, - привело к повышению вариабельности (табл. 34). Распределение комаров по уровню зараженности не соответствует биномиальному распределению. Об этом свидетельствует большая разница между фактической долей незараженных особей и ее математическим ожиданием для нормального распределения (табл. 35). Причины этому могло быть две: плазмодии в крови собраны в группы и (или) разные особи комаров отличаются по уровню восприимчивости. Первая причина отпадает - перемешивание крови в кормушке не снижает вариабельности. Значит дело в неравной восприимчивости особей. Это подтверждает и совпадение фактического положения с негативным биномиальным распределением. Это распределение соответствует именно тем случаям, когда математическое ожидание событий не фиксировано в пределах совокупности (Бреев, 1972), в нашем случае, когда вероятность заражения разных особей различна.

Рис. 12. Распределение комаров Ae. aegypti по числу ооцист P. gallinaceum. (Опыт N 1.)

По оси абсцисс - класс по числу ооцист (под столбцом указано среднее значение класса).

По оси ординат - частоты классов в % от общего числа случаев.

Обозначения: заштрихованный столбик - комары, пившие кровь на доноре; не заштрихованный столбик - комары, пившие кровь того же донора из кормушки.

Рис. 13. Распределение комаров Ae. aegypti по числу ооцист P. gallinaceum. (Опыт N 2.)

По оси абсцисс - класс по числу ооцист (под столбцом указано среднее значение класса).

По оси ординат - частоты классов в % от общего числа случаев.

Рис. 14. Распределение комаров Ae. aegypti по числу ооцист P. gallinaceum. (Опыт N 3.)

По оси абсцисс - класс по числу ооцист (под столбцом указано среднее значение класса).

По оси ординат - частоты классов в % от общего числа случаев.

Таблица 34. Зараженность Ae. aegypti при естественном кровососании и искусственном кормлении разбавленной кровью.

Показатель

Номер опыта

Доля зараженных особей

Доверительный интервал доли зараженных особей

36 - 76

1 - 28

12 - 51

1 - 14

31 - 83

1 - 28

61 - 94

13 - 42

34 - 75

16 - 45

57 - 90

10 - 35

Среднее число ооцист у всех особей

7.6

0.1

0.4

0.0

12.4

0.1

27.8

0.5

7.4

1.4

11.7

1.0

Коэффициент вариации предыдущего показателя

179 %

400 %

193 %

600 %

160 %

400 %

145 %

306 %

192 %

289 %

139 %

321 %

Среднее число ооцист у зараженных особей

13.3

1.0

1.6

1.0

20.7

1.0

33.3

2.1

13.3

5.1

15.1

4.9

Коэффициент вариации предыдущего показателя

120 %

56 %

109 %

126 %

132 %

129 %

132 %

112 %

118 %

Медиана числа ооцист у всех особей

Медиана числа ооцист у зараженных особей

Максимальное число ооцист

151

Обозначения: К - Способ кормления кровью (Е - естественное кровососание на доноре, И - искусственное кормление разбавленной кровью).

Таблица 35. Сопоставление фактической зараженности комаров с ее теоретическим ожиданием.

Серия

опыт

Найдено

ооцист

всего

Вероятность

незаражения|

1 комара

Фактич. доля

незараженных

комаров

1-1

165

195

4125

1365

2х10^-9

0.17

0.12

0.34

1-2

140

142

7560

1420

4х10^-22

6х10^-3

0.03

0.27

1-3

125

729

625

9х10^-3

0.83

0.19

0.46

1-4

119

175

7735

7700

5х10^-27

1х10^-17

0.48

0.52

1-5

3888

3403

2х10^-22

1х10^-16

0.40

0.46

1-6

108

5355

9396

4х10^-45

1х10^-36

0.20

0.22

Обозначения: К - способ кормления (Е - естественное кормление кровью, И - искусственное кормление кровью); n - число исследованных комаров.

Вывод.

Неравномерное заражение комаров плазмодиями малярии нельзя объяснить неравномерностью распределения плазмодиев в крови донора, причина в разном уровне восприимчивости особей.

6.2. Наследование восприимчивости.

Возможность наследования восприимчивости переносчиков к возбудителям болезней известна давно (Huff, 1929; Garnham, 1964; Frizzi et all., 1975), хотя, впрочем, признается не всеми (Hovanitz, 1947). Вопрос заключается в том, чтобы определить роль этого фактора.

Материалы и методы.

Работа выполнена на Ae. aegypti, An. sacharovi и Pl. gallinaceum. Схема опыта: В один день несколько самок каждого вида накормили кровью одного незараженного цыпленка; от этих самок получили индивидуальные кладки; каждую семью (потомков одной пары родителей) вырастили отдельно, но в идентичных условиях; когда эти потомки окрылились, их всех в один день накормили кровью на одном и том же цыпленке, больном малярией; когда плазмодии в этих комарах достигли стадии ооцисты, комаров проанализировали на зараженность.

Результаты и обсуждение.

Заражение разных семей отличается по всем показателям. У An. sacharovi (таб. 36) максимальная разница между семьями по обилию ооцист в десятки раз, по доле зараженных особей - от 11 до 90 %, по вариабельность - от 70 до 150 %. У Ae. aegypti (табл. 37) различия меньшие: по обилию ооцист - от 5 до 43, по доле зараженных особей - от 55 до 100 %, по вариабельности - от 80 до 167 %. И у обоих видов есть семьи, различия между которыми нельзя объяснить случайностью. Разница между особями еще больше: некоторые не заражались, а другие имели десятки и сотни ооцист. У Ae. aegypti максимальная разница в зараженности особей одной семьи: от 0 до 145 ооцист, у An. sacharovi - от 0 до 570.

Таблица 36. Зараженность разных семей Ae. aegypti при кормлении их кровью одного донора.

N семьи	n	ОИ	ОО	КВ	МАКС
1	40	55 40 - 69	15 14	69 ±14	48
2	24	67 47 - 82	9 11	126 ±22	33
3	32	84 68 - 93	16 18	113 ±15	73
4	28	93 77 - 98	27 29	105 ±15	107
5	32	81 65 - 91	19 22	116 ±16	96
6	20	80 58 - 92	37 29	80 ±14	85
7	32	84 68 - 93	12 10	80 ±11	29
8	32	88 72 - 95	24 33	134 ±18	85
9	28	89 73 - 96	14 21	142 ±20	90
10	28	86 68 - 94	14 16	88 ±13	60
11	31	64 47 - 79	13 19	144 ±23	74
12	30	83 66 - 93	43 37	87 ±12	145
13	22	77 57 - 90	19 32	167 ±29	138
14	32	100 91 - 100	28 25	89 ±11	89
15	32	66 48 - 80	5 5	102 ±16	21
16	32	84 68 - 93	31 30	99 ±14	92

Примечания: Все доли приведены в %.

Обозначения: n - число исследованных комаров, ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя при р=0.05; ОО - обилие ооцист и s этого показателя; КВ - коэффициент вариации обилия ооцист и средняя ошибка этого показателя. МАКС - максимальное число ооцист у одной особи (минимальное всегда 0, кроме семьи N 14, где минимум - 2 ооцисты у одной особи).

Таблица 37. Зараженность разных семей An. sacharovi при кормлении их кровью одного донора.

N семьи	n	ОИ	ОО	КВ	МАКС
1	40	15 7 - 29	13 16	122±35	27
2	31	48 32 - 65	21 36	172±31	141
3	34	50 34 - 66	97 90	93±1	326
4	48	83 70 - 91	128 94	73±8	360
5	18	40 20 - 61	8 11	133±36	31
6	26	88 71 - 96	83 58	69±10	230
7	41	29 18 - 44	81 109	135±28	310
8	52	60 46 - 72	21 26	124±16	100
9	29	24 12 - 42	27 30	111±30	82
10	38	68 52 - 81	95 130	136±19	540
11	12	41 19 - 68	81 7	91±29	16
12	32	81 65 - 91	209 147	70±10	570
13	42	71 56 - 83	91 83	91±12	250
14	36	11 4 - 25	6 10	149±53	21
15	29	90 74 - 96	70 73	105±15	240
16	21	57 36 - 76	28 31	111±23	94

Примечания: Все доли приведены в %. В тех случаях, когда максимальное число ооцист у одной особи превосходит 200, оно как правило округлено (точно сосчитать невозможно).

Дисперсионный анализ показал (табл. 38), что принадлежность особи к определенной семье (т. е. наследственность) несомненно играет роль (р< 0.001), определяя до 40 % дисперсии экстенсивности и интенсивности заражения An. sacharovi и до 20 % Ae. aegypti. Бросается в глаза, что в культуре, ведущейся многие десятилетия (Ae. aegypti), роль наследственности в восприимчивости была достоверно ниже, чем в культуре, созданной недавно (An. sacharovi).

Таблица 38. Влияние наследственности на заражаемость комаров плазмодиями малярии (результаты дисперсионного анализа).

Показатель		Вид комаров
		An. sacharovi	Ae. aegypti
	Среднее значение степени влияния наследственности на дисперсию заражения комаров (%).	33	14
	Доверительные границы (при р=0.01) степени влияния наследственности на дисперсию экстенсивности заражения комаров (%).	25 - 41	7 - 21
	Среднее значение степени влияния наследственности на дисперсию интенсивности заражения комаров (%).	32	14
	Доверительные границы (при р=0.01) влияния наследственности на дисперсию интенсивности заражения комаров (%).	27 - 36	8 - 20

В настоящее время наследование восприимчивости - признанный факт (Graves, Curtis, 1982; Sluiters, Visser, van der Kaay, 1986; Chen, Laurence, 1987; Shetty et all., 1987; Feldmann, Ponnuduari, 1989; Collins, Paskewitz, Grews-Oyen, 1991). Предлагается даже использовать невосприимчивые штаммы для предотвращения заболеваемости людей (Kaay et all., 1982a, b; Curtis, 1983). Но это не выгодно, если уж идти таким путем, перспективнее использовать другое наследуемое свойство - продолжительности жизни (Расницын, 1993). Если удастся вытеснить нормальную популяцию комаров короткоживущим штаммом, то это сократит вероятность передачи ими не только малярии, а любых инфекций.

Выводы.

1. Внутри одной популяции, могут существовать особи, отличающиеся по способности воспринимать возбудителей болезней человека.

2. Существуют ненаследуемые факторы, которые в большой степени определяют возможность заражения переносчика.

Заключение гл. 6.

Восприимчивость, как и другие свойства живых организмов, подвержено большой индивидуальной изменчивости, связанной как с генетически обусловленными, так и с ненаследуемыми факторами. Размах изменчивости восприимчивости весьма велик: даже в одной лабораторной (весьма однородной) популяции в равных условиях в разных особях закрепляются от нуля до нескольких сотен особей плазмодия. Длительное культивирование приводит к нивелировке восприимчивости особей.

Глава 7. ВЛИЯНИЕ ЭНДОГЕННЫХ ФАКТОРОВ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ.

В течение жизни комаров происходит циклическая смена их состояний (Беклемишев, 1940). Поскольку восприимчивость зависит от состояния особей (Weathersby, 1952; Stochler, 1967; Балашов, 1984), можно ждать и смены восприимчивости. До начала наших работ были известны три фактора внутреннего состояния, влияющие на восприимчивость комаров: возраста (Terzian at all., 1956), наличия симбионтов (Jadin et all., 1966), которое проявлялась не всегда (Rozeboom et all., 1966), и "фактора гемолимфы" (Weathersby, 1965; Weathersby, McCall, 1968), выделить который не удалось (Weathersby et all., 1971). Нам удалось выявить новый фактор - связь восприимчивости с развитием яичников (Расницын, Званцов, Ясюкевич, 1993).

Материалы и методы.

Исследования выполнены на An. sacharovi и P. gallinaceum. В опыты брали самок, которых отделяли от самцов на фазе куколки. Благодаря этому имелась возможность определить, развивались ли яйца у каждой конкретной особи, т.к. у неоплодотворенных самок откладка яиц задерживается (Расницын и др., 1984; Bentley, Day, 1989). Там, где это специально не оговорено, в опыт брали "старых" самок, в возрасте 3-5 суток. "Старые" особи до заражающего кормления имели возможность питаться раствором глюкозы. Молодые комары (их возраст 0.5-1.5 суток) углеводов не получали. Кроме обычных особей, использованы также комары, развитие яичников которых, специально затормаживалось путем прерванного кровососания (их снимали с добычи, когда они успевали набрать лишь 40 - 60% от полной порции крови), т.к. известно, что в этом случае у малярийных комаров яйца не развиваются (Виноградская, 1974; Детинова, 1962). С этой же целью исследованы молодые комары, которые, как известно, редко развивают яйца после первого кровососания (Детинова, 1962; Mutero, Birley, 1989). Состояние яичников оценивалось в момент вскрытия комаров на зараженность по шкале Кристоферса-Мера. К этому времени либо не менее 80% фолликул достигало 5 стадии (особи с развитыми яйцами), либо все они находились не далее 2 стадии (особи без развитых яиц).

Результаты и обсуждение.

В серии экспериментов с обычными особями все опыты дали одинаковые результаты: самки с неразвитыми яйцами заражались реже и в меньшей степени, чем с развитыми (табл. 39). Опыты с молодыми самками показали, что и они могут заражаться, но, как правило, лишь в случае развития яиц (табл. 40). Недокормленные комары также заражаются плазмодиями лишь тогда, когда у них развиваются яйца (табл. 41). Контроль к двум последним сериям опытов (старые комары и особи с полной порцией крови) - еще одно подтверждение первой серии.

Таблица 39. Сравнение заражаемости An. sacharovi, развивших и неразвивших яйца при полном кровососании.

N опыта	Исследовано особей		Ооцистный индекс и его доверительный интервал		Обилие ооцист
	+Я	-Я	+Я	-Я	+Я	-Я
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Все	12 33 24 32 41 44 32 20 20 30 36 13 16 17 31 20 36 10 40 9 31 20 319 248		33 13 - 60 3 1 - 15 71 51 - 85 3 1 - 16 90 78 - 96 2 0 - 12 63 45 - 77 0 0 - 14 35 18 - 57 0 0 - 10 36 22 - 52 8 1 - 33 75 50 - 90 6 1 - 27 58 41 - 74 0 0 - 14 31 18 - 47 0 0 - 26 15 7 - 29 0 0 - 28 48 32 - 65 0 0 - 14 50 45 - 56 2 1 - 5		46 3 559 6 129 1 78 - 40 - 54 5 89 3 57 - 10 - 13 - 21 - 122 4

Обозначения: +Я - особи с развитыми яйцами; -Я - особи с неразвитыми яйцами.

Таблица 40. Влияние развития яиц на заражаемость An. sacharovi разного возраста при полном кровососании.

опыта

Возраст

особей

(сутки)

Экстенсивность заражения (ОИ)

Интенсивность заражения

+Я

-Я

+Я

-Я

+Я

-Я

1 М

1 С

1.5

21 9 - 40 0 0 - 9

28 16 - 45 0 0 - 78

2 М

2 С

2.5

53 36 - 69 3 1 - 16

69 51 - 82 0 0 - 95

173

3 М

3 С

3.5

83 66 - 93 0 0 - 10

84 68 - 93 0 0 - 28

329

265

4 М

4 С

1.5

5.5

100 74 - 100 4 1 - 16

191 76 - 97 23 8 - 50

239

106

5 М

5 С

1.5

3.5

100 61 - 100 11 4 - 27

100 91 - 100 0 0 - 39

356

290

6 М

6 С

1.5

3.5

50 34 - 66 0 0 - 9

62 48 - 80 0 0 - 5

7 М

7 С

1.5

3.5

56 39 - 72 0 0 - 9

56 39 - 72 0 0 - 22

8 М

8 С

1.5

3.5

47 31 - 70 6 1 - 28

71 54 - 83 0 0 - 45

Все М

Все С

все

198

258

232

57 50 - 64 3 2 - 6

70 64 - 75 5 2 - 15

139

145

Примечание: показатели экстенсивности заражения приведены в % вместе с доверительными интервалами их значений при р=0.05.

Обозначения: +Я - особи с развитыми яйцами; -Я - особи с неразвитыми яйцами. М – молодые комары; С – старые комары.

Таблица 41. Влияние развития яиц на заражаемость An. sacharovi при разном количестве выпитой крови.

опыта

Исследовано особей

Экстенсивность заражения (ОИ)

Интенсивность заражения

+Я

-Я

+Я

-Я

+Я

-Я

1 Н

1 П

3 32

32 32

33 6 - 79 0 0 - 9

53 36 - 69 3 1 - 16

8 -

38 17

2 Н

2 П

9 28

32 1

78 45 - 94 0 0 - 10

72 55 - 84 0 0 - 95

16 -

173 -

3 Н

3 П

28 32

32 3

50 33 - 67 0 0 - 9

63 45 - 77 0 0 - 28

139 -

136 -

4 Н

4 П

30 31

32 9

83 66 - 93 0 0 - 9

85 68 - 93 0 0 - 35

144 -

265 -

5 Н

5 П

16 32

32 7

69 44 - 86 0 1 - 16

63 45 - 77 0 0 - 22

25 -

38 -

6 Н

6 П

10 32

32 12

40 19 - 69 3 0 - 10

56 39 - 72 0 1 - 16

89 15

47 -

7 Н

7 П

2 30

24 32

50 10 - 90 0 0 - 10

63 43 - 79 3 0 - 63

12 -

99 13

8 Н

8 П

9 30

25 3

22 6 - 55 0 1 - 5

36 20 - 56 0 1 - 7

75 -

36 -

Все Н

Все П

107 247

241 99

61 51 - 60 <1 0 - 1

65 59 - 71 2 0 - 7

99 15

151 15

Обозначения: Н - комары с неполной (около 50%) порцией крови, П - комары с полной порцией крови, +Я - особи с развитыми яйцами; -Я - особи с неразвитыми яйцами.

Примечание: Ооцистный индекс (ОИ) приведен в %, указано его значение и доверительный интервал этого показателя при р=0.05.

Вероятность того, что связь восприимчивости с состоянием яичников - результат случайности, пренебрежимо мала (менее 1 на триллион). Скорее всего, на возможность развития возбудителя влияют гормоны, которые контролируют репродуктивный цикл комара (Rozeboom, 1961; Racioppi, 1984).

Наряду с основным результатом, полученные данные дают сведения и по другим аспектам биологии исследованного вида и отношений его с возбудителем малярии.

Во-первых, они показывают, что для заражения плазмодиями комары не обязательно должны получать углеводы. В тех случаях, когда развивались яйца, комары, не получавшие этой подкормки, заражались не хуже тех, которые ее имели (табл. 42). В общем молодые комары, не получавшие углеводной подкормки, заражаются реже, чем старые, получавшие таковую (табл. 43), но дело не в их возрасте и не в углеводах, а в том, что яйца у них развиваются реже. При одинаковом развитии яичников и те, и другие заражаются одинаково (табл. 44).

Таблица 42. Сопоставление зараженности An. sacharovi при наличии и отсутствии углеводной подкормки (при полном кровососании).

Номер

опыта

Наличие

развитых яиц

Ооцистный индекс

-У | +У

Интенсивность заражения

-У | +У

есть

нет

21 28

0 0

11 17

есть

нет

53 69

3 0

38 173

17 -

есть

нет

83 84

0 0

9 265

есть

нет

100 91

4 23

239 106

4 20

есть

нет

100 100

11 0

356 290

20 -

есть

нет

50 62

0 0

29 38

есть

нет

56 56

0 0

47 47

есть

нет

47 71

6 0

55 58

3 -1

Все

есть

нет

57 70

3 5

139 145

19 20

Обозначения: -У - особи (молодые), не получавшие углеводной подкормки; +У - особи (старые), получавшие углеводную подкормку.

Таблица 43. Суммарная (без учета развития яиц) зараженность An. sacharovi разного возраста при полном кровососании.

Номер

опыта

Ооцистный индекс

М | С

Обилие ооцист

М | С

Все

4 27

30 68

61 78

18 81

27 91

34 58

15 46

41 68

25 65

11 17

37 173

329 265

196 103

246 290

29 38

47 47

55 58

130 144

Обозначения: М - молодые комары, не получавшие углеводной подкормки; С - старые комары, получавшие углеводную подкормку.

Таблица 44. Заражение молодых и старых комаров при одинаковом развитии яичников.

Номер

опыта

Наличие развитых яиц

Ооцистный индекс

М | С

Интенсивность заражения

М | С

есть

нет

21 28

0 0

11 17

есть

нет

53 69

3 0

38 173

17 -

есть

нет

83 84

0 0

9 265

есть

нет

100 91

4 23

239 106

4 20

есть

нет

100 100

11 0

356 290

20 -

есть

нет

50 62

0 0

29 38

есть

нет

56 56

0 0

47 47

есть

нет

47 71

6 0

55 58

31 -

Все

есть

нет

57 70

3 5

139 145

19 20

Во-вторых, у An. sacharovi обнаружена способность развивать яйца при не полном кровососании (табл. 45) - явление, не свойственное большинству малярийных комаров (Виноградская, 1974; Детинова, 1962). А если яйца развились, комары могут заразиться. Если развитие яиц не принимать во внимание, доля зараженных среди недокормленных ниже, чем среди напитавшихся полностью (табл. 46). Если же учесть состояние яичников (табл. 47), то разница обнаружится лишь в том, что при не полном кровососании число ооцист примерно в два раза ниже, чем при полном.

Таблица 45. Влияние полноты кровососания на развитие яиц у An. sacharovi.

N опыта

7 2 - 18

53 42 - 64

11 6 - 19

98 88 - 100

105

30 22 - 40

96 88 - 99

133

30 22 - 40

93 88 - 97

125

17 11 - 26

94 89 - 97

11 6 - 18

82 72 - 90

3 1 - 11

41 30 - 54

22 12 38

89 73 - 96

Все

623

602

21 18 - 24

83 80 - 86

Обозначения: К – количество крови; Н - комары с неполной (около 50%) порцией крови П - комары с полной порцией крови, n - число исследованных особей, D - доля (%) особей с развитыми яйцами и доверительный интервал этого показателя при р=0.05.

Таблица 46. Зараженность комаров, принявших разное количество крови (без учета состояния яичников).

Номер опыта

Ооцистный индекс

П | НП

Обилие ооцист

П | НП

Все

30 3

71 9

60 16

80 25

59 12

43 7

27 2

32 5

54 13

37 8

173 16

136 139

265 144

38 25

47 61

50 1

83 12

150 98

Обозначения: П - комары, принявшие полную порцию крови, НП - комары, принявшие не полную порцию крови.

Таблица 47. Заражение комаров, принявших разное количество крови (с учетом состояния яичников).

Номер

опыта

Наличие

развитых яиц

Ооцистный индекс

П | НП

Интенсивность заражения

П | НП

есть

нет

53 33

3 0

38 8

17 -

есть

нет

72 78

0 0

173 16

- -

есть

нет

63 50

0 0

136 139

- -

есть

нет

85 83

0 0

265 144

- -

есть

нет

63 69

0 0

38 25

- -

есть

нет

56 40

0 3

47 89

15 -

есть

нет

63 50

3 0

99 12

13 -

есть

нет

36 22

0 0

36 75

- -

Все

есть

нет

65 61

2 <1

151 99

15 15

Обозначения: П - комары, принявшие полную порцию крови, НП - комары, принявшие не полную порцию крови.

В третьих, выявлено, что около половины (в среднем 40%) самок An. sacharovi в возрасте до двух суток может развивать яйца после первого кровососания, даже не имея углеводной подкормки (табл. 48). И, значит, стать переносчиками.

Вероятно, перечисленные способности входят в комплекс причин высокой эпидемиологической опасности An. sacharovi как переносчика малярии.

Таблица 48. Развитие яиц у An. sacharovi разного возраста при полном кровососании.

N опыта

Возраст особей (сутки)

1.5

145

17 12 - 24

97 88 - 99

2.5

53 42 - 64

98 88 - 100

3.5

111

131

74 65 - 81

93 88 - 96

1.5

5.5

15 8 - 25

86 78 - 91

1.5

3.5

18 8 - 34

91 81 - 96

1.5

3.5

125

67 58 - 76

94 89 - 97

1.5

3.5

121

26 19 - 34

82 72 - 90

1.5

3.5

115

111

86 78 - 91

96 91 - 99

Все

все

768

696

40 36 - 44

92 90 - 94

Обозначения: n - число исследованных особей, D - доля (%) особей с развитыми яйцами и доверительный интервал этого показателя при р=0.05. М - молодые особи, С - старые особи.

После окончания наших работ появилось много сообщений, подтверждающих влияние внутреннего состояния членистоногих на их восприимчивость. Так, показано, что на возможность заражения комаров плазмодиями влияет некий "фактор гемолимфы" (Weathersby, McCroddan, 1982; Weathersby, 1985) и ферменты кишечника (Paskewitz et all., 1989). Подобное обнаружено в отношении восприимчивости к вирусам (Hardy et all., 1983; Paulson et all., 1989) и филяриям (Sutherland et all., 1984). Это относится не только к комарам: зависимость восприимчивости от состояния особей выявлена у целого ряда переносчиков (Distelmans et all., 1982; Walker, Fletcher, 1985; Разумова, Чунихин, 1989; Okolo et all., 1990; Разумова, Алексеев, 1991). Подтверждено, что на развитие возбудителей влияет возраст переносчика (Distelmans et al., 1982; Ганушкина, 1992) и наличие в нем других симбионтов (Mellor, Borman, 1980; Turell et all., 1984; Seitz et all., 1987; Алексеев, 1989; Weismann et all., 1991; Ганушкина, 1992). Впрочем, взаимное влияние микроорганизмов в их действии на членистоногих свойственно не только возбудителям болезней (Расницын и др., 1992б).

Выводы

1. Восприимчивость комаров к возбудителям малярии связана с состоянием их яичников. Вероятно, для развития плазмодиев необходимы гонадотропные гормоны переносчика.

2. Комары An. sacharovi восприимчивы к плазмодиям малярии без предварительного питания углеводами.

3. Комары An. sacharovi в возрасте 3-5 суток заражаются плазмодиями малярии чаще, чем более молодые.

4. Существенная доля An. sacharovi способна развивать яйца и заражаться плазмодиями при неполном кровососании.

5. Комары An. sacharovi способны развивать яйца после первого кровососания. Чем старше особи, тем чаще встречается эта способность.

6. Внутреннее состояние членистоногого влияет на возможность его заражения возбудителями болезней человека.

Глава 8. ВЛИЯНИЕ ПИТАНИЯ ПЕРЕНОСЧИКОВ НА ИХ ВОСПРИИМЧИВОСТЬ.

Строение пищеварительной системы, пища и сам процесс питания важнейшая часть функционирования живых организмов. Странно было бы, если бы эта сторона не влияла на восприимчивость членистоногих, тем более, что в подавляющем большинстве случаев возбудитель и входит в них, и выходит из них "через рот". Естественно, что ученые обращали внимание на эту связь (Houk et all., 1979). Наиболее четко она выявлена в "теории связи типов питания и пищеварения кровососущих членистоногих с их способностью быть специфическими переносчиками возбудителей трансмиссивных инфекций" А.Н. Алексеева (1984а, 1984б, 1985а). Но теория эта работает лишь на уровне семейств, отрядов, классов, типов. Вопрос о влиянии факторов питания на заражение особей остается открытым. Задача данного раздела - ответить на него.

8.1. Необходимость углеводов.

Согласно теории А.Н. Алексеева (1984а, 1985а) поступление углеводов в желудок переносчика необходимо в момент нахождения там возбудителя для обеспечения энергией микрогамет. Этот вывод основывался на том, что эксфлагелляции микрогамет in vitro способствует добавление в кровь сахаров (Bishop, McConnachie, 1960; Lachmajer, Antonowicz, 1983; Nodler, Miller, 1984), что в процессе развития ооцисты интенсивно поглощают сахара из гемолимфы комаров (Mack et al., 1979), и что число ооцист зависит от того, какими углеводами питались комары (Weatherby, Noblet, 1973). Однако, до нашей работы (Алексеев, Расницын, 1987) прямой проверки теории не было.

Материалы и методы

В работе использованы P. gallinaceum и Ae. aegypti. Ход опытов: партию комаров делили на две группы (по 100 - 150 самок), одна из которых имела возможность пить раствор глюкозы с момента окрыления, а другая получала ее спустя 1-2 суток после заражающего кормления (когда половой процесс плазмодиев был заведомо завершен). Параметры опытов указаны в табл. 49.

Таблица 49. Условия опытов.

Показатель	Номер опыта
Показатель	1	2	3	4	5	6	7	8	9
Паразитемия донора (баллы)	3	3	2	5	5	4	-	3	2
Продолжительность выдержки самок от вылета до кровососания (сутки)	5	5	4	4	3	3	3	5	5

Результаты и обсуждение.

Опыты не выявили различий ни в доле зараженных особей (табл. 50, 51), ни в обилии плазмодиев (табл. 52). По всем показателям сравниваемые группы коррелировали: R=0.87±0.17 по экстенсивности заражения и R=0.64±0.32 по интенсивности. У комаров, не получавших углеводов, инфективность спорозоитов не нарушилась: в двух опытах (N 1 и 2) такие комары были накормлены на здоровых цыплятах, и оба цыпленка заболели.

Таблица 50. Экстенсивность заражения комаров на стадии ооцисты в связи с наличием углеводной подкормки.

опыта

Без сахара

Контроль

все

156

88 53 - 98

81 60 - 92

23 12 - 39

19 9 - 36

64 39 - 84

10 3 - 29

73 43 - 90

87 63 - 96

45 37 - 53

105

83 44 - 97

56 37 - 73

31 14 - 56

50 24 - 76

14 4 - 40

81 57 - 93

88 53 - 98

53 44 - 63

Обозначения: n - число исследованных особей, ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя при р=0.05.

Таблица 51. Зараженность комаров плазмодием малярии на стадии спорозоита при наличии и отсутствии углеводной подкормки.

опыта

Без сахара

Контроль

СИ

CИ

Все

152

90 69-98

83 67-97

79 62-89

25 14-61

20 8-42

86 60-96

8 2-26

82 52-94

100 74-100

59 50-66

121

90 60-98

82 59-94

55 28-79

33 14-61

32 15-54

46 23-71

11 3-31

90 69-98

54 45-62

Обозначения: n - число исследованных особей, СИ - спорозоитный индекс и доверительный интервал этого показателя при р=0.05.

Таблица 52. Интенсивность заражения комаров плазмодием малярии на стадии ооцисты в связи с наличием углеводной подкормки.

опыта

Без сахара

Контроль

ОО

Все

Обозначения: n - число исследованных особей, ОО - обилие ооцист.

Полученные данные четко подтверждают факты предыдущего раздела об отсутствии зависимости между питанием углеводами и возможностью заражения переносчиков плазмодиями. Поскольку это выявилось в экспериментах с двумя видами комаров, можно быть уверенным, что дело не в исключительных свойствах определенной пары. Такое мнение подтверждает и ряд не специальных наблюдений по заражению An. atroparvus P. vivax и An. stephensi P. berghei. Данный вывод подтвержден и независимыми исследователями (Freier, Friedman, 1987).

Есть, правда, объяснение "кажущегося" противоречия теории и фактов (Алексеев, 1992). Оно сводится к тому, что отсутствие "сахаров растительного происхождения" компенсируется наличием сахаров в крови донора. Но углеводы крови получают все кровососы, а заражаются плазмодиями малярии только комары (да и то не все и не любыми плазмодиями).

Отсутствие исследованной зависимости имеет прямое практическое значение: в лаборатории отказ от кормления комаров углеводами перед заражением экономит материалы и время; в поле избавляет от ложной надежды на возможность перерыва передачи болезни путем лишения комаров доступа к углеводам. В теоретическом плане: поскольку углеводное питание комаров не является механизмом, обеспечивающим возможность развития в них представителей Sporozoa, следует искать другие механизмы.

Вывод

Двойственное (кровью и сахаром) питание комаров не является причиной их восприимчивости к плазмодиям малярии.

8.2. Влияние количества выпитой крови.

Необходимость крови донора для заражения возбудителями малярии, связана с тем, что в естественных условиях гаметоциты могут быть только в ней и с наличием некоего "фактора крови" (Rosenberg et all., 1984). Как влияет количество крови, никто не интересовался. Ответ, казался само собой разумеющимся: изменение количества крови изменяет количество возбудителя, и задача сводится к известной. Однако, как показали наши исследования (Ясюкевич и др., 1990), это не так.

Материалы и методы

Работа выполнена на P. gallinaceum и Ae. aegypti. Изменение количества выпитой комарами крови достигалось двумя способами: 1) специально выращивались партии крупных и мелких особей, которые для полного насыщения выпивали разное количество крови; 2) при кормлении группы комаров некоторым особям не давали выпить полную порцию, снимая их с донора. В специальной серии опытов комаров, получивших неполную порцию крови, тотчас докармливали на здоровом цыпленке до насыщения. Количество выпитой крови определяли путем взвешивания комаров до и после кровососания.

Результаты и обсуждение

8.2.1. Заражаемость комаров разных размеров.

В табл. 53 приведены данные, характеризующие размеры крупных и мелких комаров и количество крови, которое они выпивают. Из этой таблицы видно, что вес крови пропорционален весу комаров (R=0.9±0.1) и составляет в среднем 91 % от веса голодных особей (то есть комар выпивает примерно столько же крови, сколько весит сам). Несмотря на разницу в количестве выпитой крови, различия в зараженности крупных и мелких комаров отсутствовали (табл. 54). Не было разницы и в сохранении возбудителя (табл. 55). Тот факт, что различия не выявились в большом числе опытов, в которых использовано более 300 особей, говорит о том, что если они и имеются, то весьма слабые.

Таблица 53. Размеры комаров и количество крови, которое они выпивают при полном насыщении.

N группы	n	Средний вес самок		Средний вес выпитой крови		Вес крови к весу самки, %
		мг	%	мг	%
1К 50 2.8 100 2.6 100 93 1М 80 1.3 46 1.0 38 77
2К 50 2.5 100 2.2 100 88 2М 50 1.5 60 0.9 41 60
3К 50 2.4 100 2.0 100 83 3М 50 1.4 58 1.0 50 71
4К 50 2.5 100 2.2 100 88 4М 100 1.3 52 1.1 50 85
5К 50 2.5 100 2.5 100 100 5М 100 1.3 52 1.5 60 115
6К 100 2.2 100 2.3 100 104 6М 100 1.3 59 1.5 65 115

Обозначения: К – специально выращенные крупные комары, М - специально выращенные мелкие комары; n - число исследованных особей.

Таблица 54. Сравнение заражаемости комаров разного размера.

N группы

ОИ

ОО

1К

1М

90 70 - 97

78 58 - 90

2К

2М

96 79 - 99

93 77 - 98

3К

3М

100 86 - 100

100 92 - 100

4К

4М

70 52 - 84

82 66 - 91

5К

5М

92 74 - 98

88 72 - 95

6К

6М

61 42 - 76

67 45 - 83

Обозначения: буква у номера группы обозначает: К - специально выращенные крупные комары, М - специально выращенные мелкие комары; n - число исследованных особей; ОО - обилие ооцист; ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя.

Таблица 55. Сохранение возбудителя в комарах, выпивших разное количество крови (средние данные по всем опытам каждой серии).

Показатели	Сравниваемые группы
	По размеру особей \| По принятой крови
	Крупные \| Мелкие \| Нормальные\|Докормленные
Число опытов	6	6	8	8
Число особей, исследованных на ооцисты	96	127	300	251
Число особей, исследованных на спорозоиты	88	91	82	55
Ооцистный индекс, %	38	65	129	144
Спорозоитный индекс, %	50	59	65	46
Сохранение возбудителя, %	57	65	79	84

Примечания: Нормальные особи - те, которые выпили полную порцию заразной крови; докормленные особи - те, которые выпили неполную порцию заразной крови и были докормлены на здоровом доноре.

Такой результат кажется весьма странными. Если бы он не совпал с независимыми данными о влиянии условий развития на заражаемость комаров (см. ниже), я бы сам ему не поверил. Объяснение одно: комары получали кровь с высоким обилием гаметоцитов. Видимо, число ооцист, которые у них образовывались, было близко к пределу для исследованной пары видов. Несомненно, что при низкой концентрации возбудителя зараженность будет зависеть от количества выпитой крови и, значит, от размеров комаров.

8.2.2. Сравнение заражаемости особей, выпивших полную и неполную порцию крови.

В тех случаях, когда комарам не давали выпить полную порцию крови, их зараженность резко снижалась (табл. 56), но это снижение не было пропорциональным: при получении 20-30 % от полной порции, они почти не заражаются, при получении 40-50 % зараженность резко повышается. И значение имеет не абсолютное количество выпитой крови, а относительное (к весу самки). В опытах 7-12 использованы крупные особи, высасывающие в норме более 2.2 мг крови, но когда им удавалось получить только 0.5 - 0.7 мг они почти не заражались. В опытах 12 и 13, где использованы мелкие особи (насасывающие в норме менее 1.5 мг крови), то же количество крови (0.6 мг) приводило к повышению заражаемости. И все же, приняв половинную порцию крови, комары заражаются хуже, чем с полной порцией. Считать полученные результаты ошибкой репрезентативности не приходится - ее вероятность менее 0.01. Если учесть аналогичные данные следующей серии из 9 опытов, то надежность вывода возрастает (Р>0.9999).

Таблица 56. Заражаемость комаров при законченном (полная порция) и незаконченном (неполная порция) кровососании.

группы

Выпито крови

Зараженность

мг

ОИ

ОО

7П

7Н

2.6

0.5

100

70 - 97

1 - 26

8П

8Н

2.2

0.5

100

79 - 99

0 - 11

9П

9Н

2.4

0.7

100

86 - 100

1 - 14

10П

10Н

2.5

0.6

100

74 - 98

0 - 13

11П

11Н

2.3

0.6

100

42 - 76

0 - 9

12П

12Н

1.5

0.6

100

72 - 95

24 - 59

13П

13Н

1.1

0.6

100

66 - 91

48 - 89

Обозначения: буква у номера группы обозначает: П - комары, выпившие полную порцию крови, Н - комары, выпившие не полную порцию крови; n - число исследованных особей; ОО - обилие ооцист; ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя.

8.2.3. Влияние докармливания комаров кровью здорового донора на их заражаемость.

Поскольку зараженность зависит от относительного количества крови, надо думать, что дело тут в растяжении стенок средней кишки. Чтобы проверить это предположение, была поставлена серия опытов, в которой комарам давали возможность заполнить среднюю кишку до отказа, не увеличивая при этом количества заглоченных гаметоцитов, путем докармливания их на здоровом доноре.

Как и в предыдущей серии, комары, не получившие полной порции крови, заражались хуже контрольных (табл. 57). Обилие ооцист у них в среднем было в 250 раз ниже, притом, что крови (и с ней возбудителя) они получали меньше лишь в 4 - 12 раз. Когда этих комаров докармливали на здоровом доноре, зараженность их резко повышалась. При этом обилие ооцист становилось пропорциональным количеству принятой заразной крови: они выпивали около 16 % полной порции, и обилие ооцист у них составило 19 % от контроля. Докармливание не отразилось на сохранении возбудителя.

Таблица 57. Влияние на заражаемость комаров их докармливания на здоровом доноре.

группы

Зараженная кровь

Незараженная кровь, мг

Зараженность

мг

ОИ

ОО

14П

14Н

14Д

2.6

0.3

100

2.3

65 47 - 79

3 1 - 16

34 24 - 47

15П

15Н

15Д

2.6

0.4

100

2.2

41 29 - 55

0 0 - 10

41 28 - 56

16П

16Н

16Д

2.5

0.6

100

2.0

73 59 - 83

0 0 - 9

72 60 - 81

17П

17Н

17Д

2.3

0.2

100

2.1

97 87 - 100

3 1 - 15

31 20 - 44

18П

18Н

18Д

2.0

0.3

100

1.6

35 22 - 52

0 0 - 15

6 2 - 20

19П

19Н

19Д

2.4

0.4

100

2.1

89 77 - 95

7 2 - 21

53 39 - 67

20П

20Н

20Д

2.9

0.6

100

2.4

71 58 - 82

0 0 - 9

52 38 - 66

21П

21Н

21Д

3.2

0.4

100

2.9

90 80 - 95

4 1 - 20

57 41 - 72

22П

22Н

22Д

3.0

0.7

100

2.3

97 84 - 99

6 2 - 20

64 50 - 76

Обозначения: буква у номера группы обозначает: П - комары, выпившие полную порцию заразной крови, Н - комары, выпившие не полную порцию зараженной крови, Д - комары, выпившие не полную порцию заразной крови, и докормленные незаразной; n - число исследованных особей; ОО - обилие ооцист; ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя.

Приведенные факты свидетельствуют о большой роли насыщения комаров кровью на их заражение плазмодиями. Эта зависимость говорит в пользу предположения А.Н. Алексеева (1986) о том, что восприимчивость связана со слипанием клеток эпителия средней кишки; может быть, растяжение ее принятой кровью ослабляет это слипание. В еще большей степени данные факты подтверждают гормональную теорию: ведь именно сигнал от растянутой средней кишки вызывает выделение гонадотропных гормонов (отсюда и связь зараженности с развитием яичников).

В эпидемиологическом плане полученные данные подтверждают, как важно не допускать контакта комаров с больными и паразитоносителями. Если комар выпьет даже ничтожное количество заразной крови и докормится на здоровом доноре, он может стать эпидемически опасным.

8.2.4. Поиск оптимальной заражающей дозы возбудителя.

Данные, полученные в ходе оценки влияние количества выпитой крови (табл. 58), позволяют искать оптимальную заражающую дозу возбудителя, наличие которой, по мнению А.Н. Алексеева (1985б), необходимое условие для признания переноса специфическим. Если бы оптимальная заражающая доза существовала, то при высоком (превосходящем оптимум) обилии гаметоцитов разбавление крови приводило к повышению заражения комаров. Реальная картина иная: когда гаметоцитов в крови много, снижение их дозы путем не полного насыщения комаров либо снижает число образовавшихся ооцист (опыты NN 17 и 19), либо не сказывается (опыты NN 20 - 22). Можно, конечно, возразить, что ни в одном случае оптимальная доза не была превзойдена. Но в опытах использованы животные с предельным (предсмертным) уровнем гамонтемии. Если уж в этом случае оптимальная доза гамонтов не была достигнута, значит в реальных условиях болезни цыплят P. gallinaceum она недостижима.

Таблица 58. Поиск оптимальной заражающей дозы возбудителя.

N опыта	Комары, получившие зараженную кровь,
	полной порцией			не полной (докоромленные).
	КК	ОО	ОО/КК	КК	ОО	ОО/КК
18	2.0	1	0.5	0.3	0.2	0.6 =
15	2.6	7	2.7	0.4	8	20.0 +
14	2.6	12	4.6	0.3	3	10.0 +
16	2.5	14	5.6	0.6	10	16.7 +
20	2.9	10.3	30	0.6	6	10.0 =
19	2.4	30	12.5	0.4	3	7.5 -
22	3.0	2	24.0	0.7	16	22.9 =
21	3.2	77	24.1	0.4	10	25.0 =
17	2.3	63	27.4	0.2	1	5.0 –
Все	23.5	306	13.0	3.7	57	15.4 =

Обозначения: КК - количество заразной крови (мкл), выпитое в среднем одним комаром; ОО - обилие ооцист (число ооцист у одной зараженной особи в среднем); ОО/КК - число ооцист, образовавшихся из 1 мкл заразной крови; значки у чисел в последней колонке: "=" - число ооцист, образовавшихся из 1 мкл заразной крови при неполной ее порции, примерно равно их числу при полной порции, "+" - число ооцист, образовавшихся из 1 мкл заразной крови при неполной ее порции, выше их числа при полной порции, "-" - число ооцист, образовавшихся из 1 мкл заразной крови при неполной ее порции, ниже их числа при полной порции.

Выводы

1. Возможность заражения комаров возбудителями малярии зависит от степени насыщения их кровью: при не полном кровососании заражение резко снижается вплоть до полного прекращения; докармливание кровью здорового донора повышает заражение.

2. При высоком уровне паразитемии донора и при полном насыщении комаров кровью их заражение плазмодиями не зависит от размеров особей.

3. В исследованной триаде видов оптимальная заражающая доза возбудителя не обнаружена.

Заключение гл. 8.

Пища влияет на заражение переносчиков возбудителями. Но этот фактор действует не всегда. Так, питание углеводами не является причиной восприимчивости комаров к плазмодиям малярии. Заражение комаров плазмодиями зависит от полноты кровососания. При высоком обилии возбудителя заражение комаров не зависит от размеров особей. В исследованной триаде видов (P. gallinaceum, Ae. aegypti, цыплята) оптимальная заражающая доза возбудителя отсутствует.

Глава 9. ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ РАЗВИТИЯ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Условия развития членистоногих могут резко повлиять на их физиологическое состояние, плодовитость, размеры, чувствительность к инсектицидам и т. п. (Устинов, 1941; Clements, 1963; Тажибаев, 1974; Ruhm, Sander, 1975; Lance, 1981; Некрасова, 1986; Leprince, Bigras-Poulin, 1988). Не исключено, что они могут сказаться и на их отношениях с симбионтами - возбудителям болезней человека, как сказываются на отношениях с патогенным бактериям (Расницын, Войцик, Евсеева, 1986; Расницын, Войцик, Званцов, 1988; Войцик, Расницын, 1991; Расницын, Войцик, Скидан, 1993; Расницын, Войцик, Ясюкевич, 1993).

Работы предыдущих исследователей показали, что скорость спорогонии плазмодиев и сама ее возможность зависят от условий, в которых находятся комары (Николаев, 1935; Мошковский, 1946; Лысенко, Левитанская, 1952; Vandenberg, Yoeli, 1965; Jadin et all., 1966). То же показано и для других переносчиков и других возбудителей (Ouhelli, Schein, 1988; Kay, Fanning, 1989a, 1989b). По этой причине большинство работ посвящено условиям существования имаго. Данные о влиянии на восприимчивость условий развития личинок, не многочисленны и противоречивы. В самой ранней работе (Бук, Свелленгребль, 1935) утверждалось наличие изменений восприимчивости, вызванных сезонными изменениями условий развития. Позднее сообщалось об отсутствии влияния условий развития на восприимчивость (Ward, 1963; Yoeli, 1965), затем - опять о том, что влияние есть (Gaaboub, Busvine, 1976). Так, что не ясно, есть ли оно или нет, а уж о том, что влияет и как и вовсе не известно. А вопрос этот важен. В первую очередь, конечно, для предсказания эпидемического процесса. Но и для исследований. Когда определяется влияние на восприимчивость биологически активных веществ (Noireau, Karch, 1983; Жарова, Расницын, 1984; Расницын, Жарова, 1985; Ганушкина, 1987), необходимо учитывать, что они действуют не только сами по себе, но и меняют условия развития. Быть может, опосредованное влияние этих агентов не уступает прямому.

В данной работе (Званцов, Ясюкевич, Расницын, 1989) определялось влияние на восприимчивость трех наиболее вариабельных факторов: температуры, концентрации особей и количества получаемого ими корма. Для убедительности каждый фактор взят в значениях, близких к предельным.

Материалы и методы.

Исследования выполнены на P. gallinaceum и Ae. aegypti. Личинок сравниваемых групп выращивали в условиях, отличавшихся только по одному фактору (табл. 59). При нормальной концентрации особей и оптимальном количестве корма выживаемость была не ниже 96 %. При повышенной плотности и голодной диете в конце развития около половины личинок погибало; оставшиеся особи жили просторнее и получали больше корма. В разных условиях образовывались имаго разного размера, которые выпивали разное количество крови (Расницын, Званцов, Ясюкевич, 1991а).

Таблица 59. Условия выращивания комаров.

Серия

Вариант

опыта

Условия выращивания

Температура ⁰С

Плотность посадки особей/кв дм

Количество

корма мг/лич

4.0

250

4.0

III

1.5

4.0

Результаты и обсуждение.

Температура не сказывалась на экстенсивности заражения комаров ни ооцистами, ни спорозоитами (табл. 60). Влияние этого фактора проявилось лишь в обилии возбудителя, да и то слабо - комары, выращенные при повышенной температуре, имели в среднем в 1.5 раза меньше ооцист, чем выращенные в нормальных условиях. Аналогичная картина наблюдается при анализе влияния концентрации личинок и количества корма: на долю зараженных особей эти факторы не повлияли, а обилие возбудителя у особей, развивавшихся в условиях повышенной плотности и дефицита корма, было понижено. Таким образом, комары, выросшие в более благоприятных условиях и, потому, более крупные и, следовательно, принимавшие больше крови и, вместе с ней, возбудителя, были заражены интенсивнее. Однако четкой корреляции между массой комаров и обилием в них возбудителя нет. Так, во II серии, где разница в массе куколок ничтожна, разница в обилии возбудителя близка к 30% его среднего значения, а в III серии, где масса особей различается в 2 раза, эта разница не достигает и 20 %. Позднее столь неожиданные данные об отсутствии связи между размерами комаров и их заражаемостью малярии были подтверждены (Kitthawee et all., 1990).

Таким образом, условия развития комаров влияют на их восприимчивость постольку, поскольку от них зависят размеры вылетающих особей. Так, масса куколок Ae. aegypti, выросших в разных условиях может отличаться в 4.1 раза; An. atroparvus - в 1.8 раза; An. sacharovi - в 1.6 раза; An. stephensi - в 2.1 раза; Cx. pipiens - в 2.8 раза. Количество крови, которое высасывает комар до полного насыщения, тесно связано с его размерами. Коэффициент корреляции между массой куколки и массой крови, которую может выпить самка, вылетевшая из нее r = 0.76±0.06. Уравнение К = 0.36+(0.49±0.04)М, где К - максимальное количество выпитой комаром крови (мг), М - масса куколки (мг), позволяет определять один показатель по другому.

Поскольку мелкие комары выпивают меньше крови, вероятность попадания в них плазмодия понижена. Таким образом, ухудшение условий развития снижает восприимчивость комаров. Но влияние снижения восприимчивости на интенсивность и особенно на экстенсивность заражения проявляется лишь тогда, когда концентрация гаметоцитов в крови донора не велика; в этом случае доля зараженных особей среди мелких комаров снижается и возбудитель развивается в них в меньшем числе. Когда же возбудителя в крови донора много, заражение мелких комаров почти не уступает заражению крупных (табл. 60). И это понятно. Если концентрация гаметоцитов велика, они попадают во всех комаров, а поскольку минимальная заражающая доза низка (см. главу 4), заражаются все восприимчивые особи, независимо от их размеров. При большом числе гаметоцитов, попадающих в комаров, число образующихся ооцист ограничивается не столько числом гамет, сколько "емкостью" комаров (см. главу 4), и, потому, разница в количестве выпитой крови играет слабую роль. Весьма вероятно, что мнение об отсутствии влияния условий развития на восприимчивость комаров, которого придерживаются некоторые авторы (Baqar, Hayes, Ahmed, 1980; Kitthawee et all., 1990), вызвано тем, что они заражали сравниваемых особей высокими дозами возбудителя.

Условия развития влияют. Но это влияние настолько слабо, что не может иметь существенных эпидемиологических последствий.

Таблица 60. Зараженность комаров, выращенных в разных условиях.

Показатель	Различающиеся факторы условий
	Температура	Концентрация особей	Количество корма
	норма \| высокая	норма \| высокая	норма \| малое
Вариант выращивания Число опытов Масса куколок самок, мг Средняя ошибка массы куколок самок, мг Число особей, исследованных на ооцисты Ооцистный индекс, % Обилие ооцист Число особей исследованных на спорозоиты Спорозоитный индекс, %	1 2 6 6 4.1 3.7 0.1 0.1 131 130 94 93 83 59 90 82 92 88	3 4 6 6 3.8 3.7 0.1 0.1 107 88 94 99 169 126 97 115 90 96	5 6 8 8 4.0 2.0 0.1 0.1 201 181 96 91 68 57 119 96 96 94

Выводы

1. Условия развития влияют на восприимчивость переносчика тем, что определяют размер особей и, соответственно, количество крови, которое они насасывают, а также вероятность попадания в них возбудителя.

2. При низкой концентрации возбудителя в крови донора влияние условий развития сводится к изменению экстенсивности и интенсивности заражения переносчика.

3. При высокой концентрации возбудителя в крови донора изменение условий развития не оказывает существенного влияния на заражение переносчика.

4. Влияние условий развития слабо и не может иметь существенных эпидемических последствий.

Глава 10. ВЛИЯНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Из всех биологически активных веществ наибольшее значение имеют инсектициды, т. к. они применяются именно тогда, когда надо подавить или предотвратить вспышку заболеваемости. От влияния контакта с инсектицидом на восприимчивость переносчиков зависит выбор мероприятий. Дело в том, что часть особей получает сублетальные дозы, которые вызывают существенные изменения в их организме (Samaranayaka-Ramasamy, 1978; Srivastava et all, 1980) и сказываются на их поведении (Алексеев и др., 1977; Дробозина и др., 1980). Поскольку восприимчивость зависит от состояния членистоногого (Baquar et all, 1980; Sneller et all, 1981), можно ожидать влияния и инсектицидов, подобного влиянию других химических факторов и физических воздействий (Ragab, 1949; Terzian, Stahler, 1960).

К началу наших работ было показано влияние ДДТ на восприимчивость Ae. aegypti к Brugia pahangri (Gaaboub et all, 1975, 1976) и P. gallinaceum (Mohan, 1955). Но работа по малярии ограничивалась исследованием контакта лишь непосредственно перед заражающим кормлением и только лишь на экстенсивность заражения. По этой причине результаты, приведенные в ней, нельзя считать окончательными. Кроме того, за 20 лет (от ее публикации до начала наших работ) никто ее не подтвердил.

Задача настоящей работы (Расницын, Жарова, 1985а) - оценить влияние контакта с инсектицидом на все характеристики заражения, и не только перед заражающим кормлением, но и задолго до него.

Материалы и методы

Работа выполнена с P. gallinaceum, Ae. aegypti и ДДТ. Ход опыта: партию комаров делили на две группы, одна из которых служила контролем, а другую подвергали контакту с бумагой, пропитанной 4 %-ным раствором ДДТ, по методике ВОЗ. После контакта с инсектицидом обе группы кормили кровью зараженного донора. Опыты выполнены в двух вариантах: контакт с инсектицидом за сутки и за час до заражающего кормления.

Результаты и обсуждение.

Контакт комаров с инсектицидом за сутки до заражающего кормления не оказывал влияния ни на долю заразившихся особей, ни на обилие возбудителя в комарах (табл. 61). В случае контакта за час до заражающего кормления были различия в доле зараженных особей возбудителем на стадии ооцисты (табл. 62) и на стадии спорозоита (табл. 63). Но эти различия невелики и статистически недостоверны (р=0.05). На обилие возбудителя контакт с инсектицидом не повлиял. Раз уж в эксперименте это влияние не выявилось, значит, в естественных условиях ожидать его не приходится. Опыт с одним инсектицидом не аргумент, чтобы думать, будто все биологически активные вещества не влияют на восприимчивость, он лишь доказывает, что этим свойством обладают не все из них (и, в частности, такой практически важный как ДДТ).

Таблица 61. Зараженность комаров возбудителем малярии при наличии и отсутствии их контакта с инсектицидом за сутки до заражающего кормления.

Партия

ОИ

ОО

100 90 - 100

88 64 - 96

82 64 - 92

Все

96 86 - 100

92 82 - 96

Обозначения: К - продолжительность контакта с ДДТ (в мин); n - число исследованных особей; Г - доля (%) особей, погибших от контакта с ДДТ; ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя; ОО - обилие ооцист.

Таблица 62. Зараженность комаров возбудителем малярии на стадии ооцисты при наличии и отсутствии их контакта с инсектицидом за час до заражающего кормления.

Партия

ОИ

ОО

84 67 - 93

96 78 - 99

50 34 - 66

72 54 - 84

31 18 - 47

33 19 - 49

Все

102

54 44 - 64

63 52 - 72

Таблица 63. Зараженность комаров возбудителем малярии на стадии спорозоита при наличии и отсутствии их контакта с инсектицидом за час до заражающего кормления.

Партия

ОИ

92 74 - 97

97 84 - 100

39 19 - 46

17 3 - 56

40 19 - 64

55 28 - 79

83 55 - 95

97 83 - 99

83 67 - 92

Все

113

71 61 - 79

80 70 - 88

Обозначения: К - продолжительность контакта с ДДТ (в мин); n - число исследованных особей; Г - доля (%) особей, погибших от контакта с ДДТ; СИ - спорозоитный индекс и доверительный интервал этого показателя.

Позднейшие работы подтвердили это заключение. Были исследованы различные инсектициды (Ellisa et all., 1987; Hill et al., 1989), биологические агенты борьбы (Young et all. 1990), регуляторы развития (Ганушкина и др., 1991), водоросли и удобрения (Чунина и др., 1991), гербициды и фунгициды (Якубович и др., 1991) и даже антибиотики (Ганушкина, 1986). В большинстве случаев они на восприимчивость не влияли, а когда и влияли, то слабо (Алексеев, Ганушкина, 1988; Ганушкина и др., 1992). Все это говорит о тесной связи между комарами и плазмодиями, нарушить которую не так то просто. Однако, поскольку для других возбудителей найдены факторы, влияющие на восприимчивость их переносчиков (Noblet, Weathersby, 1973; Takahashi, 1976; Richey, Rodriguez, 1979; Steward, Soifer, Steward, 1979; Akhtar, Hayea, Baquar, 1981; Sharma, Das, Bendle, 1981), следует ожидать, что они будут найдены и для плазмодиев.

Вывод.

Биологически активные вещества могут повлиять на восприимчивость членистоногих к возбудителям болезней человека, но влияние это проявляется не всегда и чаще всего в слабой степени. В частности, контакт комаров с ДДТ не вызывает существенного изменения их восприимчивости к плазмодиям малярии.

Глава 11. ПРЯМОЕ ВЛИЯНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ НА ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Любой живой организм влияет на среду, в которой он обитает. Поскольку переносчик являются средой обитания возбудителя, следует ожидать, что это влияние проявляется и в данном случае. Этот тезис неоднократно подтвержден на многих объектах (Garnham, 1955; Burgdorfer, Owen, 1956; Балашов, 1967, 1968, 1972; Балашов, Дайтер, 1969, 1973; Балашов и др., 1969; Hamilton, Bradley, 1979; Roychowdhury et al, 1979; Christensen, 1981), особенно ярко на примере блох и чумы (Кондрашкина, 1969; Бибикова, Павлова, 1970; Бибикова, Классовский, 1974; Ващенок, 1984; Кононов и др., 1986). Обнаруживали и влияние плазмодиев на комаров (Huff, 1934; Шишляева-Матова, 1943; Thompson, Huff, 1944; Maier, 1975; Freier, Friedman, 1976; Mack et al., 1979a, 1979b; Gad et al., 1979; Klein al., 1982).

Казалось бы, вопрос ясен, но, поскольку в эпидемиологии особенности выживания и поведения зараженных комаров игнорировались, следовало проверить факты.

11.1. Влияние возбудителей на чувствительность переносчиков к инсектицидам.

Защита людей от трансмиссивных болезней, как правило, включает в себя истребление переносчиков инсектицидам. Особенно желательно зараженных особей Алексеев (1979). Чтобы этого достигнуть, надо знать их чувствительность к применяемым препаратам. Поскольку чувствительность членистоногих к инсектицидам зависит от их физиологического состояния (Reinhardt, Ester, 1971; Shipp, Otton, 1976; Rawlings et al., 1981), а плазмодии, как считалось, изменяют его, следовало ожидать существенной разницы между зараженными и незараженными особями. В случае других возбудителей она была обнаружена (Rosen, 1980; Golder et al., 1982), а о комарах, зараженных малярией, сведений не было. По этой причине в первую очередь мы исследовали влияние зараженности комаров плазмодиями на их чувствительность к инсектицидам (Расницын, Жарова, 1985а).

Материалы и методы.

Исследования выполнены на Ae. aegypti, P. gallinaceum и ДДТ. Контакт длился 30-50 мин с бумагой, пропитанной 4 % раствором препарата по методике ВОЗ (Резистентность к инсектицидам и борьба с переносчиками. М., 1972). В опытах оценивали долю комаров, погибших от контакта с инсектицидом, в зависимости от наличия и стадии возбудителя. С этой целью партию насекомых делили на 2 группы, одну из которых кормили на здоровом, а другую - на больном малярией цыпленке. Все остальные манипуляции с этими группами проводили одинаково. Зараженность комаров определялась по особям, оставшимся живыми после контакта с инсектицидом. При работе с начальными стадиями развития плазмодиев комаров выдерживали до образования зрелых ооцист.

Проведено 4 серии опытов: первая - в период прохождения полового процесса у возбудителя (через час после кормления комаров кровью); вторая - в начальный период развития ооцисты (через 2 суток после кровососания); третья - в период окончания развития ооцисты (через 6 суток после кровососания); четвертая - после завершения спорогонии (через 10 суток после кровососания).

Результаты и обсуждение.

Полученные данные (табл. 64) показывают, что в начальный период спорогонии и после ее завершения смертность комаров под действием инсектицида в сравниваемых группах одинакова. В период развития ооцисты наблюдается статистически достоверное увеличение чувствительности зараженных особей к действию инсектицида, но оно очень невелико.

Таблица 64. Смертность комаров Ae. aegypti под действием ДДТ, в связи с их зараженностью возбудителем малярии Pl. gallinaceum.

РВ	LP	n	ДП	p
I	84 0	197 109	45 38 - 52 52 42 - 62	>0.05
II	88 0	153 82	84 79 - 89 71 60 - 80	>0.05
III	93 0	159 160	7 4 - 12 1 0 - 4	<0,05
IV	92 0	110 114	45 36 - 55 43 34 - 53	>0,05

Обозначения: РВ - период развития возбудителя (I - период прохождения полового процесса у возбудителя, II - начальный период развития ооцист, III - окончание развития ооцист, IV - после завершения спорогонии); ДЗ - доля зараженных особей (%), n - число особей, исследованных на чувствительность к инсектициду; ДП - доля (%) особей, погибших от контакта с инсектицидом и доверительный интервал этого показателя; р - вероятность случайной разницы сравниваемых групп.

Эти факты объясняются так: когда возбудители находятся в кишечнике комаров или в их железах внешней секреции, возможности их влияния на переносчика ограничены самим положением. Выделяемые ими метаболиты могут быть легко выведены, потребность в питательных веществах не велика, да и биомасса (особенно гамет) мала. В стадии ооцисты влияние проявляется, поскольку масса плазмодиев нарастает, происходит развитие, что требует повышенного количества пищи; в этот период экскреты плазмодиев поступают в полость тела комаров.

Таким образом, угнетающее влияние плазмодиев на устойчивость комаров к инсектициду существует, но оно не велико и кратковременно. Такой вывод нельзя, конечно, распространять на все возможные сочетания объектов, но, несомненно, заражение переносчиков не всегда будет сказываться на их чувствительности к инсектицидам.

Вывод.

В случае ДДТ возбудители малярии вызывают ничтожное и кратковременное увеличение чувствительности комаров к инсектициду.

11.2. Влияние возбудителей на летные способности переносчиков.

Передвижение переносчиков играет большую роль в распространении трансмиссивных болезней. Для практики в первую очередь надо знать передвижения зараженных особей - тех, кто несет непосредственную угрозу. Поскольку зараженность переносчиков может повлиять на их состояние, есть основания думать, что зараженные особи летают иначе, чем не зараженные. Эти различия были продемонстрированы на примере филярий (Berry et all., 1986, 1987, 1988). В единственной работе о плазмодиях (Schiefer et all., 1977) сделан вывод, что зараженные комары летают хуже здоровых. Одна работа на одной паре видов не может служить основой для общих заключений. Необходимо было продолжить исследования. В первой серии опытов (Алексеев, Абдуллаев, Расницын, 1984) зависимость получилась обратной: возбудитель стимулировал полет переносчика. Но этот вывод основывался на небольшом числе опытов и, потому, мог быть результатом ошибки репрезентативности. По этой причине эксперименты были продолжены на двух переносчиках, причем учитывалось не только зараженность донора, но и каждого комара.

Материалы и методы.

Работа выполнена на Ae. aegypti, An. sacharovi и P. gallinaceum, по известной методике (Schiefer et all., 1977). Каждый опыт проводился одновременно с двумя особями, которых за неделю до того кормили кровью цыплят (одного - на здоровом, другого - на больном). После "прокрутки на мельнице" у комара, пившего кровь больного донора, определяли наличие плазмодиев. Таким образом имелась возможность сравнить полет зараженных особей (тех, у которых возбудитель обнаружен), незараженных (тех, которые пили кровь больного донора, но не заразились) и "чистых" (тех, которые пили кровь здорового донора). В качестве показателей летных способностей использованы следующие характеристики: число полетов за 24 часа; расстояние, которое пролетел комар за 24 часа; расстояния, которые пролетал комар без перерыва, и скорость полета.

Результаты и обсуждение.

Ни в опытах с Ae. aegypti (табл. 65), ни с An. sacharovi (табл. 66) не обнаружено достоверной разницы между летными способностями зараженных, не зараженных и чистых особей. Отсутствие достоверной разницы не служит, конечно, доказательством сходства. Но можно быть уверенным, что эта разница ничтожна по сравнению с межвидовой, которую эти же опыты четко выявили - протяженность разовых полетов An. sacharovi превосходила таковую Ae. aegypti в среднем почти в 10 раз (и различия эти статистически достоверны). Этот вывод подтвердился: независимые авторы (Rowland, Boersma, 1988) показали, что плазмодии снижают летную активность комаров максимум на 30 %, и лишь в краткий период окончания развития ооцист.

Таблица 65. Сравнение летных способностей комаров Ae. aegypti в связи с их заражением возбудителем малярии.

Показатель

Показатель - |

Состояние особей

ЗЗ | НЗ | ЧИ

Число исследованных особей

7 5 12

Среднее число полетов в сутки

Доверительный интервал

Коэффициент вариации (%)

3.6 4.4 3.4

1.1 - 6.0 2.0 - 5.2 2.2 - 4.7

66 62 56

Средняя дальность суточного полета

Доверительный интервал

Коэффициент вариации (%)

452 455 449

131 - 773 68 - 1068 227 - 671

71 80 78

Средняя скорость полета (м/мин)

Доверительный интервал

Коэффициент вариации (%)

11.4 11.2 12.0

6.5 - 16.3 1.1 - 20.8 8.3 - 5.8

47 62 49

Средняя дальность разового полета

Доверительный интервал

Коэффициент вариации (%)

127 109 129

59 - 195 21 - 197 81 - 177

128 172 120

Примечание: дальность полета указана в метрах.

Обозначения: ЗЗ - зараженные комары (те, у которых найден плазмодий); НЗ - незараженные комары (те, которые пили кровь зараженных цыплят, но сами не заразились); ЧИ - чистые комары (те, которые пили кровь незараженных цыплят).

Таблица 66. Сравнение летных способностей комаров An. sacharovi в связи с их заражением возбудителем малярии.

Показатель

Показатель - |

Состояние особей

ЗЗ | НЗ | ЧИ

Число исследованных особей

5 7 12

Среднее число полетов в сутки

Доверительный интервал

Коэффициент вариации (%)

1.8 1.6 1.6

0.6 - 3.0 0.8 - 2.4 1.1 - 2.1

46 50 50

Средняя дальность суточного полета

Доверительный интервал

Коэффициент вариации (%)

940 826 1038

0 - 1963 311 - 2285 429 - 179

78 76 82

Средняя скорость полета (м/мин)

Доверительный интервал

Коэффициент вариации (%)

15.4 16.3 15.4

2.9 - 27.9 7.5 - 25.1 10.0 - 20.8

58 55 55

Средняя дальность разового полета

Доверительный интервал

Коэффициент вариации (%)

525 826 731

239 - 811 355 - 1297 485 - 977

128 172 120

Примечание: дальность полета указана в метрах.

Вывод.

Нет существенных различий в летных способностях комаров, связанных с их зараженностью возбудителем малярии или приемом заразной крови.

11.3. Влияние возбудителей на агрессивность переносчиков.

Агрессивность комаров по отношению к добыче зависит от смены этапов гонотрофического цикла (Беклемишев, 1940), от внешних условий и от количества нападающих особей (Алексеев, Расницын, Витлин, 1977; Расницын, Алексеев, Витлин, 1978) и от воздействия инсектицидов (Алексеев, Суворова, 1977; Дробозина и др., 1977; Дробозина, Бондарева, 1980). Можно ждать изменения агрессивности комаров и под влиянием плазмодиев. Это предположение требовало проверки, которой до начала наших работ не было.

Материалы и методы.

Работа выполнена на Ae. aegypti, An. sacharovi и P. gallinaceum. В опытах использовали по две группы комаров каждого вида, одну из которых кормили кровью здорового, а другую - больного малярией цыпленка. Спустя неделю после этого, когда первая порция крови была переварена, а яйца отложены, проводили опыт: По 30 комаров каждой группы помещали в отдельный садок длинной 35 и сечением 10 на 10 см. Через 20 часов, в течение которых комары не получали ни воды, ни сахаров, к торцевым сторонам садка экспериментатор прикладывал руки. После 5-ти минутной экспозиции руки убирали, комаров умерщвляли и просматривали. При просмотре определялось количество принятой ими крови по следующей шкале: 0 - отсутствует, 1 - кровь есть, но желудок не увеличен, 2 - наполнение желудка привело к его растяжению, но порция крови не полная, 3 - принята полная порция крови. Итоговыми показателями агрессивности были: доля (%) комаров, пивших кровь, и, среди них, средний балл наполненности желудка кровью. Комаров, питавшихся перед этим на больном цыпленке, исследовали, кроме того, на зараженность. Благодаря этому, как и в предыдущем разделе, имелась возможность сравнить зараженных, не зараженных и чистых особей.

Результаты и обсуждение.

Полученные результаты (табл. 67) не выявили разницы между сравниваемыми группами комаров ни в привлечении к добыче, ни в скорости насыщения кровью. Учитывая объем исследованного материала, следует считать, что если это влияние и существует (отсутствие достоверной разницы не доказывает сходства), оно не велико и уступает видовым отличиям, которые проявились четко и статистически достоверно.

Таблица 67. Агрессивность комаров в связи с их зараженностью возбудителем малярии.

Вид комаров и их состояние	Показатели
Вид комаров и их состояние	N	n	Д	Н
Ae. aegypti зараженные	6	125	87 80 - 92	2.7 2.6 - 2.8
Ae. aegypti не зараженные	6	55	82 70 - 90	2.6 2.4 - 2.9
Ae. aegypti чистые	6	180	64 57 - 71	2.5 2.4 - 2.6
An. sacharovi зараженные	6	72	42 31 - 53	1.9 1.7 - 2.2
An. sacharovi не зараженные	6	108	49 40 - 58	1.9 1.7 - 2.1
An. sacharovi чистые	6	180	38 32 - 46	2.0 1.9 - 2.1

Обозначения: N - число опытов; n - число исследованных особей; Д - доля (%) особей, пивших кровь и доверительный интервал этого показателя; Н - средний балл наполненности желудка кровью у особей, пивших ее и доверительный интервал этого показателя.

Вывод.

Наличие в комарах плазмодиев малярии (равно как и принятие ими заразной крови) не вызывает существенного увеличения их агрессивности.

11.4. Влияние возбудителей на продолжительность жизни переносчиков.

Сама возможность влияния возбудителя на продолжительность жизни переносчика хорошо известна и не только на примере блох и чумы. Те же блохи страдают от заражения сальмонеллами (Eskey et al., 1949), клещи - от туляремии (Davis, 1943; Петров, 1958), москиты - от лейшманий (Алексеев и др., 1975). О влиянии плазмодиев единого мнения не было. Первая публикация утверждала, что они не сокращают продолжительности жизни комаров (Mayne, 1920), следующая (Sinton, Shute, 1938) - что сокращают, затем опять - нет (Ragab, 1958), а последняя опять: сокращают (Gad et al., 1979). Поскольку поднятый вопрос имеет большое эпидемиологическое значение, основываться на столь противоречивых данных литературы нельзя. Пришлось провести специальное исследование.

Материалы и методы.

В исследованиях использовано 6 видов комаров и 3 вида плазмодиев (табл. 68). Ход опытов: каждую партию комаров делили на три группы: "З", "З-1" и "НЗ". Комаров групп "З" и "З-1" кормили на зараженном доноре, а группы "НЗ" - на здоровом. После кормления в садках оставляли лишь тех особей, которые приняли полную порцию крови. В садках "З" и "НЗ" оставленных особей подсчитывали. Садки "З" и "НЗ" держали 10 суток, после чего определяли число комаров, оставшихся в живых в каждом из них. (В опытах с Ae. togoi выживание определялось ежедневно.) Садки "З-1" держали 4 - 5 суток, после чего в них определяли зараженность комаров, если доля зараженных особей была ниже 50 %, опыт выбраковали.

Таблица 68. Выживаемость комаров в течение 10 суток в связи с их зараженностью возбудителем малярии.

Переносчик и возбудитель

Число

опытов

Число особей

Выживаемость

НЗ

Ae. aegypti

Pl. gallinaceum

300

78 73 - 82

Ae. togoi

Pl. gallinaceum

750

69 65 - 73

62 58 - 66

An. atroparvus

Pl. vivax

112

31 23 - 42

44 35 - 54

An. pulcherrimus

Pl. gallinaceum

103

146

18 12 - 26

24 17 - 33

An. sacharovi

Pl. gallinaceum

300

47 41 - 53

54 48 - 60

An. stephensi

Pl. bergey

105

17 11 - 25

19 12 - 32

Примечание: выживаемость указана как доля (в %) особей, оставшихся живыми к определенному сроку; под средним значением данного показателя приведен его доверительный интервал.

Результаты и обсуждение.

Во всех исследованных сочетаниях возбудителей и переносчиков существенных и статистически достоверных различий в выживаемости сравниваемых групп комаров не было (табл. 68). Поскольку такой результат получен на большом материале (34 опыта на трех тысячах особей), можно быть уверенным: если влияние плазмодиев на продолжительность жизни комаров и существует, оно пренебрежимо мало. Идентичны не только итоговые результаты отмирания комаров в период спорогонии плазмодиев, но и ход его во времени (рис. 15).

За период наблюдения (10 суток) проходит весь период спорогонии. Если уж в это время плазмодий не повлиял на переносчика, ожидать, что его действие проявится позднее, не приходится.

Рис. 15. Ход отмирания Ae. togoi после кровососания.

По оси абсцисс - дни с момента принятия крови.

По оси ординат - доля (в %) живых особей.

Обозначения: 1 - комары, пившие кровь здоровых цыплят; 2 - комары, пившие кровь цыплят с гаметоцитами P. gallinaceum.

Приведенные в этом разделе данные - результат специальных опытов. Этот результат подтверждают многие факты, полученные в ходе других исследований, приведенные выше; особенно показательны данные об отсутствии разницы в зараженности живых и погибших особей.

Вывод.

Заражение комаров плазмодиями малярии не оказывает существенного влияния на продолжительность их жизни.

11.5. Влияние возбудителей на плодовитость переносчиков.

Отсутствие влияния плазмодиев на продолжительность жизни комаров, их способность к полету и чувствительность к инсектицидам привело к сомнению в "паразитности" отношений взаимодействующих организмов (Расницын, 1986б). Чтобы проверить это предположение, исследовано влияние плазмодиев на самый реактивный морфофизиологический индикатор - плодовитость (Расницын, 1986а). Литературные данные, имевшиеся к началу работы, были противоречивы: сначала утверждалось, что наличие плазмодиев не угнетает плодовитости комаров (Hovanitz, 1947), а позднее - угнетает (Freier, Friedman, 1976; Hacker, 1971; Hacker, Kilama, 1974). Но и те, и другие выводы основаны на небольшом и плохо обработанном материале; принять их без проверки невозможно. Чтобы внести ясность мы провели исследование этого вопроса на той же паре видов, что и наши предшественники, но на большом материале и подробнее (Жарова, Расницын, Дашкова, 1984).

Материалы и методы

Работа выполнена на Ae. aegypti и P. gallinaceum. Влияние возбудителя на плодовитость комаров оценивали в течение всей спорогонии - трех гонотрофических циклов. Для опытов каждую партию комаров разделяли на две группы: опытную (которых кормили кровью зараженного донора) и контрольную (которых кормили кровью не зараженного донора). Плодовитость определялась на IV - V стадии развития яичников (по Кристоферсу). При анализе опытная группа комаров подразделялась на две: заразившихся и не заразившихся.

Результаты и обсуждение

Существенного влияния возбудителя на плодовитость комаров не было. Число яиц на первом гонотрофическом цикле отличались не более чем на 25 % (табл. 69). Пониженная плодовитость наблюдалась то у контрольных (опыт N 2), то у зараженных особей (опыт N 1). Также не велики и недостоверны различия плодовитости в период окончания развития ооцист (табл. 70). После завершения спорогонии плодовитость зараженных особей также не отличается от плодовитости незараженных (табл. 71). Исследование большого материала (8 опытов, 415 особей) позволяет быть уверенным, что P. gallinaceum не вызывает существенного угнетения воспроизводительной функции Ae. aegypti. Подтверждением этого мнения служит материал Hovanitz (1947), анализ которого выявляет прямую корреляция между количеством яиц и ооцист у комаров.

Таблица 69. Сравнение плодовитости незараженных и зараженных комаров в начальный период развития в них возбудителя (I гонотрофический цикл).

Показатели	Группа комаров
Показатели	З	НЗ	ЧИ
Опыт N 1
Число исследованных комаров	15	0	7
Число яиц (M±m)	106±9	-	131±14
Вариабельность числа яиц (%) (C±m_c)	33±6	-	28±7
Опыт N 2
Число исследованных комаров	51	14	36
Число ооцист (M±m)	37.5±5	0	0
Число яиц (M±m)	112±4	101±6	100±3
Вариабельность числа яиц (%) (C±m_c)	28±3	24±4	21±2
Корреляция между числом ооцист и числом яиц (r±m_r)	-0.14±0.14	-	-

Обозначения: ЧИ - чистые (контрольные) комары; НЗ - комары, пившие зараженную кровь, но не заразившиеся плазмодиями; З - комары, зараженные плазмодиями малярии.

Таблица 70. Сравнение плодовитости незараженных и зараженных комаров в период завершения развития ооцист (II гонотрофический цикл).

Показатели	Группа комаров
Показатели	З	НЗ	ЧИ
Опыт N 3
Число исследованных комаров	23	0	9
Число ооцист (M±m)	37.8±7.3	-	0
Число яиц (M±m)	88±3		66±4
Вариабельность числа яиц (%) (C±m_c)	34±5		20±5
Корреляция между числом ооцист и числом яиц (r±m_r)	0.09±0.21		-
Опыт N 4
Число исследованных комаров	8	14	10
Число ооцист (M±m)	5.9±2.2	0	0
Число яиц (M±m)	83±6	99±6	86±3
Вариабельность числа яиц (%) (C±m_c)	20±5	21±4	11±2
Корреляция между числом ооцист и числом яиц (r±m_r)	0.34±0.31	-	-

Таблица 71. Сравнение плодовитости незараженных и зараженных комаров после завершения спорогонии.

Показатели	Группа комаров
	З		НЗ	ЧИ
Опыт N 5, второй гонотрофический цикл
Число исследованных комаров	16	15		28
Число яиц (M±m)	114±4	112±6		109±4
Вариабельность числа яиц (%) (C±m_c)	13±2	21±4		18±2
Опыт N 6, второй гонотрофический цикл
Число исследованных комаров	7	9		31
Число яиц (M±m)	111±10	120±5		101±4
Вариабельность числа яиц (%) (C±m_c)	23±6	13±3		20±3
Опыт N 7, третий гонотрофический цикл
Число исследованных комаров	15	18		24
Число яиц (M±m)	76±8	80±5		78±2
Вариабельность числа яиц (%) (C±m_c)	39±7	27±6		13±2
Опыт N 8, третий гонотрофический цикл
Число исследованных комаров	23	10		32
Число яиц (M±m)	95±4	87±4		95±3
Вариабельность числа яиц (%) (C±m_c)	18±3	15±3		15±2

Вывод

Развитие плазмодиев малярии в комарах не сказывается на репродуктивной функции последних.

Заключение гл. 11.

Чаще всего отмечается слабое угнетающее влияние возбудителей на переносчиков. Существенное изменение поведения и выживаемости зараженных переносчиков, которое известно на примере блох и чумы, гельминтов и муравьев редко, и даже в этом случае бывают исключения (Нельзина и др., 1970). Не известно ни одного случая мутуализма членистоногих и возбудителей.

В паре комары - плазмодии малярии существенное влияние возбудителя на переносчика отсутствует. Этот вариант симбиоза является не паразитизмом, а комменсализмом. Все дикие животные носят в своем теле "паразитов", но это обычно не отражается на их жизни (Scott, Dobson, 1989), так и комары не получают пользы от плазмодиев, а только лишь устойчивы к их наличию. Между возбудителем и переносчиком существует гомеостаз, обеспечивающий выживание и тех, и других (Кеннеди, 1978; Rodhain, Hannoun, 1979; Gregory, Keymer, 1987; Guttowa, 1988).

Из этого заключения следует практический вывод: нет нужды исследовать наново все аспекты жизнедеятельности комаров, зараженных малярией, как исследовались интактные особи - разница между теми и другими по всей шкале эпидемиологически важных свойств пренебрежимо мала.

Такое заключение подтверждают многочисленные позднейшие публикации: Отсутствие существенного патогенного влияния возбудителей на переносчиков обнаружено и у клещей (Пчелкина и др., 1980; Gray, 1982; Ершова, Васильева, 1989; Васильева, Ершова, 1989; Randolph, 1991), и у кровососущих двукрылых (Jenny et all., 1983; Ham, Gale, 1984), в том числе, комаров под влиянием филярий (Bredly, Nayar, 1984; Kasai, Williams, 1986; Huang, He G., 1988), трематод (Webber et al., 1987), вирусов (Turell et all., 1985); впрочем, вирусов - не всегда (Patrican, DeFoliart, 1985). Наиболее сильное воздействие оказывают червеобразные на тараканов (Moore, 1984). В основном же отмечается небольшое изменение поведения переносчика (Molyneux, Jefferies, 1986; Friedhoff, 1987, 1990; Кауфман, 1988). Обнаружен даже мутуализм: вирус клещевого энцефалита способствует выживаемости иксодовых клещей и поискам добычи (Алексеев и др., 1988, 1993; Алексеев, 1993).

Появились новые данные и о комарах и плазмодиях. Подтверждено разрушительное действие возбудителя на эпителий кишечника переносчика (Максимова и др., 1988). Жизнеспособность зараженных комаров не отличалась от контрольных (Freier, Friedman, 1987), а если и отличалась, то незначительно (Клейн и др., 1986). Отличия в поведении зараженных особей в момент кровососания были также не велики (Rossignol et all., 1984).

Глава 12. КОСВЕННОЕ ВЛИЯНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ НА ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Косвенное влияние возбудителя на переносчика - это влияние через третьего сочлена системы - хозяина. Все работы об отношениях возбудителей и переносчиков посвящены исследованию прямого влияния, о косвенном даже не упоминается. А оно может играть существенную роль. Возбудитель вызывает изменение состояния человека, что может сказаться на отношениях переносчика с хозяином. Можно предположить три фактора косвенного воздействия возбудителя малярии на комаров: изменение доступности хозяина, его привлекательности для переносчика, изменение питательных свойств крови.

То, как изменяется состав крови позвоночных из-за паразитирования возбудителей малярии, хорошо известно из медицинской литературы. А то, как эти изменения влияют (вернее не влияют) на переносчиков, прослежено в предыдущей главе при сравнении, особей накормленных на незараженном доноре (контрольных), и накормленных на зараженном, но не заразившихся. В этой главе рассматривается влияние возбудителей на привлекательность и доступность хозяев для переносчиков.

12.1. Влияние возбудителей на привлекательность хозяев для переносчиков.

Комаров к добыче привлекают, среди прочего, обонятельные стимулы и инфракрасное излучение, зависящее от температуры источника. У больного малярией во время приступа наблюдается учащенное дыхание, обильное потоотделение, повышенная температура, что, вероятно, усиливает его привлекательность для переносчиков. Задача заключается в том, чтобы проверить так ли это и дать количественную оценку явлению. Опыты, в которых искали ответ на поставленный вопрос, проводились в разных условиях и разными методами; по этой причине они излагаются независимо друг от друга.

12.1.1. Привлекательность больных людей.

Опыты выполнены в связи с необходимостью перевить возбудителя малярии людям (по их собственному желанию) через комаров. Эксперименты проведены с добровольцами (АВ и РАЖ), заразившими себя P. vivax. Контролем был один и тот же человек (СР). Каждая серия состояла из трех опытов, первый из которых проводился до начала заболевания, второй - во время приступа болезни, третий - после излечения. Метод каждый раз был один: в центральную камеру специального садка (рис. 16) помещали 100 самок An. atroparvus, садок прикладывали к бедрам двух человек (один торец к одному, другой - к другому) и открывали заглушки; после 15-и минутной экспозиции заглушки закрывали, садок доставляли в лабораторию, где подсчитывали число комаров, в каждом его отделении, степень их насыщения, и определяли количество крови, у особей, насосавших полную порцию.

Результаты (табл. 72 и 73) показывают, что в период болезни привлекательность человека увеличивается в 2 - 3 раза. При этом заметно возрастает доля особей, выпивших не полную порцию крови. Вес полной порции крови от состояния человека не зависит.

Таблица 72. Привлекательность для комаров An. atroparvus человека, больного малярией. (Результаты опыта с больным РА.)

Показатель	На больном			На здоровом
Показатель	До болезни	В приступ	После болезни	До болезни	В приступ	После болезни
N	41	80	38	18	9	19
ПП	90	50	79	95	90	85
НП	8	50	10	5	0	5
БК	2	0	10	0	10	10
ВК	3	4	3,0	3,6	3,5	3,1

Обозначения: N - число подлетевших комаров; ПП - доля (%) комаров с полной порцией крови; НП - доля (%) комаров с не полной порцией крови; БК - доля (%) комаров без крови ВК - вес выпитой крови (мг).

Таблица 73. Привлекательность для комаров An. atroparvus человека, больного малярией. (Результаты опыта с больным АВ.)

Показатель	На больном			На здоровом
Показатель	До болезни	В приступ	После болезни	До болезни	В приступ	После болезни
N	21	66	12	23	12	30
ПП	100	46	100	70	83	70
НП	0	39	0	17	0	13
БК	0	15	0	13	7	17
ВК	3,7	3,3	3,5	3,6	3,4	3,4

12.1.2. Привлекательность людей во время физической нагрузки.

Человек, занятый тяжелой работой подобен больному малярией - он тоже обильно потеет и выделяет много углекислого газа. Оценивая привлекательность для комаров таких людей, можно представить себе привлекательность истинных больных, эксперименты с которыми возможны крайне редко.

Приведенные ниже наблюдения выполнены в полевых условиях на людях, которые по очереди рыли почвенную яму, рубили толстое дерево и т. п. Когда была моя очередь отдыхать, я убивал и считал комаров на себе и на моих товарищах.

Результаты (табл. 74) показывают, что физическая нагрузка (имитация болезни) увеличивает привлекательность человека для комаров в среднем в 2.6 раза, и эта разница не случайна (p<0.001). А максимальная разница была десятикратной. При этом следует учесть, что контроль (отдыхающий) был не совсем чистым: этот человек только что закончил работу и отдохнул еще не полностью.

Таблица 74. Сравнение привлекательности для комаров работающих и отдыхающих людей.

опыта

Самый многочисленный вид комаров

Число комаров, напавших на

работающего

отдыхающего

Все

Ae. cinereus

Ае. communis

Ae. vexans

Ae. cataphylla

Ae. excrucians

Ae. pionips

Ae. punctor

все

191

683

266

12.1.3. Привлекательность больных цыплят.

Опыты выполнены на Ae. aegypti и цыплятах, зараженных P. gallinaceum. Цыплят брали в двух состояниях: на начальной стадии болезни (бодрых, которые по поведению не отличаются от здоровых) и на последних стадиях (вялых, которые почти не двигаются). Опыты проведены с помощью того же садка, который использовался в опытах на людях (рис. 16). В садок сажали по 200 комаров, к торцевым стенкам его приставляли маленькие (10Х10Х10 см.) клетки с цыплятами (здоровым и больным). Чтобы избежать влияния посторонних факторов каждые 15 минут садок вместе с клетками поворачивали на 180 градусов. После экспозиции в 1 час подсчитывали число комаров, подлетевших к больной и здоровой птице (укусить их они не могли).

Рис. 16. Камера (садок) для испытания привлекательности различной добычи для комаров в лабораторных условиях.

Материал - капроновая сетка на стальном каркасе. Размеры в см.

Результаты (табл. 75 и 76) дали неожиданную картину: привлекательность зараженных, но бодрых цыплят оказалась равной привлекательности здоровых, а вялые больные особи привлекали комаров почти в 5 раз хуже здоровых. И разница эта статистически достоверна (p<0.01).

Таблица 75. Привлекательность для комаров Ae. aegypti цыплят, зараженных малярией. (Зараженный цыпленок бодр.)

Число комаров, подлетевших	N опыта
Число комаров, подлетевших	1	2	3	4	5	6	7	8	Все
К больному	89	63	63	83	62	79	60	85	584
К здоровому	72	78	58	63	70	51	81	67	540

Таблица 76. Привлекательность для комаров Ae. aegypti цыплят, зараженных малярией. (Зараженный цыпленок вял.)

Число комаров, подлетевших	N опыта
Число комаров, подлетевших	1	2	3	4	5	6	7	8	Все
К больному	26	24	20	13	13	25	21	28	160
К здоровому	112	109	92	107	96	110	126	11	763

В многочисленных опытах, когда комарам разных видов давали возможность кормиться на здоровых и зараженных Pl. gallinaceum цыплятах, разницы в количестве выпитой ими крови обнаружено не было (табл. 77).

Таблица 77. Сравнение количества крови, которое насасывают комары на здоровых донорах и на больных P. gallinaceum.

Вид комаров

Число опытов

Число случаев

Б=З Б>З Б<З

Ae. aegypti

Ae. togoi

An. atroparvus

An. pulcherrimus

An. sacharovi

An. superpictus

Cx. pipiens

Все

5 4 3

6 4 4

1 0 1

1 2 3

4 7 4

0 2 1

1 0 1

18 19 17

Обозначения: Б=З - количество крови, выпитой на больном доноре, равно количеству крови, выпитой на здоровом доноре; Б>З - на больном доноре выпито крови больше, чем на здоровом; Б<З - на больном доноре выпито крови меньше, чем на здоровом.

Выводы.

1. В период приступа больной малярией человек привлекает комаров в несколько раз сильнее, чем здоровый.

2. Зараженные малярией, но бодрые цыплята привлекают комаров в той же степени, как и здоровые, когда же в результате болезни их подвижность угнетена, их привлекательность для комаров падает.

3. Нападая на человека с приступом малярии, комары чаще, чем в норме выпивают не полную порцию крови.

4. Количество крови, выпиваемое комарами, не зависит от наличия в ней возбудителя малярии.

12.2. Влияние возбудителей на защищенность хозяев от переносчиков.

Возбудитель малярии изменяет поведение человека: общеизвестная слабость, особенно после приступа. В таком состоянии человек становится, вероятно, более доступным для комаров. Проверить это предположение на больных совесть не позволяет. Но удалось выполнить две серии опытов, в одной из которых больных имитировали уставшие люди, а в другой использована лабораторная модель. Поскольку опыты проводились разными методами, они излагаются независимо друг от друга.

12.2.1. Влияние усталости на защищенность людей от комаров.

Наблюдения проведены в полевых условиях при нападении комаров на людей во время ночлега. В экспедициях в многодневные походы я обычно брал с собой двух помощников. Останавливались мы в зимовье или в палатке, откуда и ходили в рабочие маршруты. Причем ходили они со мной по очереди. "Свободный" оставался "дома" - отдыхал. Спали под пологами. Каждое утро я имел возможность оценить число комаров в этих пологах. Оно зависело от того, как тщательно человек готовил свою постель и насколько полно уничтожал залетевших комаров. Подсчеты (табл. 78) показали, что тот, кто пришел из маршрута (т.е. усталый, в нашем случае имитатор больного), становится более легкой добычей: число комаров, насосавшихся на нем крови, в 17 раз выше, чем у отдыхавщего (101 против 6).

Таблица 78. Доступность для комаров людей в зависимости от их усталости.

опыта

Самый многочисленный вид комаров

Число комаров в пологе человека

Усталого | отдыхавшего

С кровью|Без крови|С кровью|Без крови

Все

Ae. cinireus

Ае. communis

28 2 1 2

12 1 1 3

13 1 1 0

5 0 0 0

20 1 3 2

9 6 0 0

14 1 0 1

101 12 6 8

12.2.2. Влияние малярии на защищенность цыплят.

Исследованы Ae. aegypti и цыплята, зараженные P. gallinaceum. Опыт состоял в том, что трех цыплят (здорового, зараженного, но бодрого, и больного вялого) сажали по одиночке в кубические садки с ребром 15 см. В эти садки впускали по 50 комаров. Через 20 минут цыплят вынимали и подсчитывали число комаров в каждом садке и наличие у них крови.

Результаты (табл. 79) показали, что нападение комаров на здорового и бодрого цыпленка не эффективно: большинство их склевывается, а из оставшихся лишь единицам удается получить полную порцию крови. Больной вялый цыпленок - легкая добыча. В этом нет ничего удивительного - то, что ограничение подвижности птицы способствует эффективности нападения комаров, было продемонстрировано и раньше (Edman, Kale, 1971).

Таблица 79. Эффективность нападения комаров на больных и здоровых цыплят.

N опыта	Число комаров на цыплятах
	здоровом			бодром			больном
	К+	К±	К-	К+	К±	К-	К+	К±	К-
1	3	12	15	2	21	12	32	6	10
2	2	15	12	2	10	13	26	10	14
3	3	8	13	2	9	10	28	15	3
4	2	17	4	3	17	10	28	15	6
5	2	16	14	3	11	16	27	22	0
6	4	12	18	2	14	8	28	18	4
Все	16	80	76	14	82	69	169	86	37

Условные обозначения: К+ - число комаров с полной порцией крови; К+ - число комаров с не полной порцией крови; К- - число комаров без крови.

Опыты на людях и цыплятах однозначно свидетельствуют о том, что заболевание делает хозяина более легкой добычей для комаров. Как было показано позднее (Rossignol et all., 1985), на больных животных (и при малярии, и при вирусной инфекции) комары насасываются крови быстрее, чем на здоровых.

Полученные данные еще раз подчеркивают необходимость изоляции больных от переносчиков, т. к. возбудитель делает таких людей не только более привлекательными, но и более доступными для комаров.

Вывод.

Заболевание малярией делает человека более легкой добычей для комаров.

Заключение гл. 12.

Возможность косвенного влияния возбудителя на переносчика не вызывает сомнений. В случае малярии оно выражается в повышенной привлекательности и в большей доступности хозяев. Это влияние может иметь существенные эпидемические последствия и, потому, должно учитываться при проведении противоэпидемических мероприятий: изоляция больных от переносчиков - важное средство общественной профилактики.

В настоящее время в развитых странах повышение привлекательности и доступности людей, больных малярией, для комаров может сыграть роль лишь в экстремальных ситуациях. В норме больных изолируют от комаров в больницы просто для того, чтобы удобнее было лечить. Когда же с цивилизацией хуже, они остаются там, где нападают комары. А всего лишь 200 лет назад (для эволюции это не срок) такое положение было повсеместным. Нельзя исключить, что косвенное влияние играло роль в отборе, как плазмодиев, так и комаров. Свидетельством тому служит наличие сезонной и суточной синхронизации тех аспектов их жизнедеятельности, которые способствуют переходу возбудителей из человека в комара (Worms, 1972).

Гл. 13. СОХРАНЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ В ПЕРЕНОСЧИКАХ

Сохранение возбудителя в членистоногом - необходимое условие для того, чтобы оно могло быть переносчиком. А при большой продолжительностью жизни, как, например, у клещей (Хейсин и др., 1954; Попов, 1959; Калмыков, 1961; Бабенко, Рубина, 1968; Жмаева, 1966, 1969; Лутта и др., 1970), то и хранителем.

Сохранение возбудителей в переносчиках имеет два аспекта. Во-первых, речь может идти о сохранении их в течение жизни той фазы членистоногих, которая заражает людей (обычно это имаго), а во-вторых, о сохранении популяции возбудителя за счет циркуляции микроорганизмов среди членистоногих без участия позвоночных. Такая циркуляция может происходить путем трансфазовой и трансовариальной передачи, способностью к которой обладает ряд возбудителей (Балашов, 1984). Особенно хорошо это явление исследовано в отношении вируса весенне-летнего энцефалита у иксодовых клещей (Чумаков, Гладких, 1939; Шубладзе, Сердюкова, 1939; Павловский, 1940; Павловский, Соловьев, 1940; Чумаков, 1944; Чурилова и др., 1963; Жмаева, Пчелкина, 1967; Гурбо и др., 1969; Ильенко и др., 1970; Коренберг, 1974). Второй путь - трансиндивидуальная передача: со спермой, при каннибализме, при совместном питании на одном доноре (Philip, Parker, 1933; Померанцев, Сердюкова, 1947; Wagner-Jevseenko, 1958; Thompson, Beaty, 1978; Чунихин и др., 1983, 1989; Алексеев, Чунихин, 1990а, б, 1991; Алексеев, 1993; Labuda et all., 1993).

Математическая модель (Расницын, 1976) дает следующую картину. Заражение каждого последующего поколения за счет указанных путей передачи:

Р1 = PAD[C+BE-PC(1-E+BE)]/1-P[1-E+(1-D)(C+BE)]+P2C(1-D)(1-E-BE),

где

P - доля зараженных особей исходного поколения;

Р₁ - доля зараженных особей следующего поколения;

A - вероятность трансфазовой передачи;

B - вероятность трансовариальной передачи;

C - вероятность трансиндивидуальной передачи;

D - относительная выживаемость зараженных особей;

E - относительная плодовитость зараженных особей.

Анализ этой модели показывает, что в некоторых случаях членистоногие будут основными хранителями инфекции. Это особенно касается клещей, благодаря их большой продолжительности жизни (Хейсин и др., 1954; Попов, 1959; Калмыков, 1961; Бабенко, Рубина, 1968; Жмаева, 1966, 1969; Лутта и др., 1970).

Плазмодии не обладают способностью к трансфазовой и трансовариальной передаче (A=B=0). Трансиндивидуальная передача также отсутствует: каннибализма у комаров нет; передача со спермой исключена; перехода спорозоитов к незараженным особям при совместном их питании с зараженными не происходит (12 опытов по проверке этой возможности, в которых было исследовано 1288 комаров, дали отрицательный результат). Следовательно С=0. И, значит, при любых значениях остальных коэффициентов Р₁=0 - сохранение популяции плазмодиев комарами без участия позвоночного невозможно. По этой причине есть смысл анализировать сохранение плазмодиев в комарах лишь в течение индивидуальной жизни последних.

В норме спорозоиты остаются в слюнных железах комаров пожизненно (Shute, Maryon, 1951), но нельзя исключить, что определенные воздействия уничтожат их. По крайней мере, известно, что так может действовать температурный режим (Лысенко, Левитанская, 1952). В данной главе оценивается зависимость сохранения возбудителей в переносчиках от инсектицида и повторного кровососания - факторов, действие которых наиболее вероятно.

13.1. Влияние биологически активных веществ на сохранение возбудителей в переносчиках.

Из всех биологически активных веществ самые важные - инсектициды, т.к. именно ими мы пытаемся уничтожить зараженных особей. Поскольку инсектициды влияют на биохимию и физиологию членистоногих (Samaranayaka-Ramasamy, 1978; Dabbour, Ahmed, 1979; Brooks, 1980; Karabensch, Otto, 1980; Srivastava, Verma, 1980), нельзя исключить, что они прямо или косвенно затронут и возбудителя, как это происходит при действии лекарств (Terzian et all., 1968). Несмотря на большую важность данного вопроса, на эту тему были опубликованы лишь две работы одного автора (Mochan, 1955, 1960). Он показал, что ДДТ не снижает доли зараженных особей. Как влияет инсектицид на обилие и вирулентность возбудителя, и как он действует на разные стадии плазмодиев, известно не было. Наша задача - восполнить указанный пробел (Жарова, Расницын, 1984).

Материал и метод.

Работа выполнена на Ae. aegypti, P. gallinaceum и ДДТ. Влияние инсектицида оценивалось на всех этапах развития возбудителя: 1) в период прохождения полового процесса; 2) в период оокинеты; 3) в начальный период развития ооцист; 4) в период окончания созревания ооцист; 5) после окончания спорогонии. Ход опыта: Партию комаров накармливали кровью больного цыпленка. Когда возбудитель достигал заданной стадии, эту партию делили на две группы. Одну группу (опыт) подвергали 30-40 минутному контакту с бумагой, пропитанной 4 % раствором ДДТ, по методике ВОЗ ("Резистентность к инсектицидам и борьба с переносчиками. Семнадцатый докл. ком. экспертов ВОЗ по инсектицидам.", 1972). Другую оставляли интактной. По достижении плазмодиями стадии ооцисты и спорозоита определяли зараженность комаров.

Результаты и обсуждение.

Зараженность комаров, получивших сублетальные дозы инсектицида, существенно не отличались от контрольных особей (табл. 80). Несмотря на большой объем исследований (более 1000 особей), достоверных различий не было ни в экстенсивности, ни в интенсивности заражения. Микроскопия не выявила патологии спорозоитов в комарах, получивших сублетальные дозы инсектицида. Три кормления зараженных комаров, контактировавших с ДДТ, на здоровых цыплятах привели к заражению хозяина. Следовательно, возбудитель не утрачивает вирулентность.

Таблица 80. Зараженность комаров возбудителем малярии после разных вариантов контакта их с инсектицидом.

Период развития возбудителя

ОИ

ОО

83 69 - 90

83 73 - 89

95 85 - 98

88 76 - 96

III

118

206

92 85 - 96

91 86 - 94

96 89 - 98

78 68 - 85

144

202

85 77 - 91

90 85 - 93

В среднем

454

651

90 88 - 92

87 84 - 89

Обозначения: К - наличие контакта с ДДТ ("+" - был, "-" - нет); n - число исследованных особей; Г - доля (%) особей, погибших от контакта с ДДТ; ОИ - ооцистный индекс и доверительный интервал этого показателя; ОО - обилие ооцист.

Результаты опытов на одной модели, не доказывают, конечно, отсутствия эффекта во всех подобных случаях. Более того, позднее было обнаружен инсектицид (дельтамитрин), который убивает плазмодиев в комаре (Carle et al., 1986). И все же полученные данные заслуживают внимания: явно, что в случае ДДТ (и, вероятно, во многих других) особи, уцелевшие от обработок, могут сохранять эпидемическую угрозу. Кроме того, учитывая возможность действия инсектицидов на восприимчивость переносчиков и на сохранение возбудителей, целесообразно оценивать соответствующие препараты не только по их прямому действию, но и косвенному - на векторные способности.

Выводы.

1. ДДТ не вызывает гибели или снижения вирулентности возбудителей малярии в комарах-переносчиках.

2. Целесообразно оценивать инсектицидные препараты по их действию на векторные способности целевого агента.

13.2. Роль повторного кровососания в сохранении возбудителей в переносчиках.

От того, как влияет повторное кровососание на сохранение возбудителей, зависит эффективность мероприятий по сокращению контакта переносчиков с донорами крови и допустимость тех или иных вариантов экспериментального изучения развития возбудителя и поддержания его штаммов. Несмотря на важность вопроса, он привлекал мало внимания. Имеются лишь 2 работы (Ghoch, Ray, 1957; Ghoch, 1980) по влиянию повторного кровососания на скорость развития ооцист.

На протяжении спорогонии плазмодиев комары, как правило, пьют кровь неоднократно. Питание резко влияет на их физиологическое состояние (Clements, 1963), а состояние хозяина обычно отражается на обитающих в нем организмах. Известно, например, что развитие бесполого поколения плазмодиев тормозится белково-энергетической недостаточностью пищи хозяина (Edirisinghe et al., 1981), а выживаемость трипаносом в мухах цеце, зависит не только от питания, но даже от вида доноров крови (Moloo, 1981). Следовательно, мы в праве ожидать, что отсутствие повторного кровососания комаров отразится на развитии в них возбудителей малярии. Это предположение тем более оправдано, что вся жизнь плазмодиев связана с органами, которые непосредственно участвуют в приеме и переработке крови. Ожидание, однако, не доказательство.

Настоящая работа (Расницын, Жарова, 1984) выполнена для того, чтобы оценить роль повторного кровососания в сохранении плазмодиев.

Материалы и методы.

Исследования выполнены на Ae. aegypti и P. gallinaceum. Ход опыта: Партию комаров, накормленных на зараженном малярией цыпленке, делили на 2 группы: "К" и "Г". Особей группы К в период между заражающим кормлением и вскрытием 1 - 2 раза (по мере завершения гонотрофических циклов) кормили кровью, а особей группы Г кровью в этот период не кормили.

Результаты и обсуждение.

Анализ результатов (табл. 81 и 82) не обнаружил достоверной разницы сравниваемых групп ни по экстенсивности, ни по интенсивности заражения. Отсутствие достоверной разницы не является доказательством сходства, но, поскольку различия не выявились в 5 опытах с 380-ю особями, можно быть уверенным, что отсутствие повторного кровососания если и влияет на зараженность комаров плазмодиями, то лишь в малой степени.

Таблица 81. Сравнение зараженности комаров возбудителем на стадии ооцисты при наличии и отсутствии повторного кровососания.

N опыта	ЧПК	n	D	ОО
1	1	33	52 43 - 68	8.9 9.5
1	0	333	70 52 - 83	7.0 1.5
2	1	32	100 90 - 100	46.9 33.8
2	0	32	94 80 - 98	64.3 32.4

Обозначения: ЧПК - число повторных кровососаний; n - число исследованных особей; D - доля зараженных особей (в %) и доверительный интервал этого показателя; ОО - интенсивность заражения и среднеквадратичное отклонение этого показателя.

Таблица 82. Сравнение зараженности комаров возбудителем на стадии спорозоита при наличии и отсутствии повторного кровососания.

N опыта	ЧПК	n	D
1	2	33	70 52 - 83
	1	35	69 51 - 82
	0	33	67 49 - 80
2	2	18	100 84 - 100
	1	31	100 90 - 100
	0	31	94 80 - 97
3	2	32	78 60 - 88
3	0	27	89 72 - 96

Обозначения: ЧПК - число повторных кровососаний; n - число исследованных особей; D - доля зараженных особей (в %) и доверительный интервал этого показателя.

Позднее было показано, что повторное кровососание, как и предварительный прием крови, хотя и влияют, но не являются облигатным для развития в комарах личинок филярий (Travi et all., 1986) и трипаносом в редувиидах (Tolezano J.E. et all., 1983; Vargas, Zeledon, 1985).

Вывод

Отсутствие повторного кровососания комаров не приводит к гибели в них возбудителя малярии.

Заключение гл. 13.

Наличие трансфазовой, трансовариальной и трансиндивидуальной передачи возбудителей среди членистоногих (особенно при большой длительности жизни переносчиков) может привести к тому, что они выступят в роли основных хранителей инфекции. Поскольку плазмодии не способны к указанным путям передачи, комары не могут быть их основными хранителями.

Внешние воздействия могут уничтожать возбудителей в переносчиках, но далеко не все. По крайней мере, ДДТ и отсутствие повторного кровососания не снижают ни доли зараженных комаров, ни обилия в них плазмодиев малярии.

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Не на все вопросы взаимоотношений возбудителей и переносчиков удалось найти ответы. Да вряд ли когда и удастся - чем больше ответов, тем больше вопросов. Главное, однако, сделано. Теперь мы знаем, что пригодность переносчика для возбудителя ("восприимчивость") не всегда обусловлена длительным периодом коэволюции взаимодействующих организмов и не определяется одним единственным свойством переносчика.

Восприимчивость специфична на уровне видов и популяций, а не только крупных таксономических категорий. А это значит, что принадлежность членистоногого к определенной таксономической группе не свидетельствует о том, что оно восприимчиво к определенной группе возбудителей, а лишь о том, что эту восприимчивость нельзя исключить без проверки.

Переносчики могут быть "преадаптированы" к членистоногим, с которым они не могли встречаться ни по географическим, ни по экологическим причинам. А это означает возможность появления новых, неожиданных переносчиков известных возбудителей и переноса известными переносчиками возбудителей, с которыми они ранее не были связаны.

В то же время, мы всегда можем столкнуться с не или мало восприимчивыми популяциями членистоногих (естественно, что по отношению к определенным видам и штаммам возбудителей). При этом надо иметь в виду, что в случае возникновения циркуляции, возбудитель способен быстро "подстраиваться" к новому хозяину (отбор тут идет только по возбудителю, и, следовательно, адаптация односторонняя). В результате, "плохой" переносчик (в смысле "мало восприимчивый") может стать очень даже "хорошим".

Восприимчивость зависит от множества как наследуемых, так и ненаследуемых свойств особей и от внешних условий.

Восприимчивость - не качественное, а количественное свойство. Оно зависит от наследуемых индивидуальных свойств особей, но не только. На его наличие и уровень могут повлиять состояние половой системы, возраст особей, условия их развития, биологически активные вещества, в частности, инсектициды. По этим причинам восприимчивость варьирует на популяционном и индивидуальном уровне, и даже в течение жизни особи. Это значит, что, восприимчивость не определяется каким-то одним врожденным стабильным фактором, общим для крупной таксономической группы, а лабильное свойство, связанное со многими сторонами состояния членистоногого, и подверженное влиянию эндогенной ритмикой жизни особи и внешними воздействиям.

Заражение комаров возбудителями малярии зависит от количества выпитой крови только при низкой концентрации гаметоцитов, не зависит от повторного кровососания и от питания углеводами. Нижний порог обилия плазмодиев, который определяет возможность заражения комаров, близок к единице (один макро- и один микрогаметоцит). В естественных условиях нет верхнего предела обилия плазмодиев, превышение которого приводило бы к снижению зараженности комаров, соответственно, нет и оптимальной заражающей дозы. По этой причине наличие у донора половых форм плазмодиев всегда (сколько бы их ни было) представляет эпидемическую опасность.

Влияние возбудителя на переносчика весьма разнообразно: от явно патологического, до положительного. В конкретном случае комаров и плазмодиев малярии мы имеем дело с комменсализмом - возбудители не оказывают существенного прямого действия на переносчиков (такого, которое бы значительно изменяло их эпидемиологически важные характеристики или сказалось на самом реактивном морфофизиологическом индикаторе комаров - их плодовитости). Однако я вовсе не призываю считать зараженных и "здоровых" особей идентичными. Наоборот, поскольку те и другие принадлежат к разным совокупностям, вероятность того, что они идентичны, практически равна нулю. Отсутствие статистически достоверной разницы между зараженными и здоровыми особями не служит доказательством их сходства - статистика, вообще, может доказать наличие разницы (точнее, указать вероятность того, что различия не вызваны ошибкой репрезентативности), но не сходства - такая задача в ней и не ставится. Речь идет о степени различий, которые связаны с "паразитированием" плазмодиев в комарах. Когда членистоногие заражаются действительно патогенными микроорганизмами, их действие проявляется четко и ярко - различие здоровых и зараженных особей не вызывает сомнений. (Не зря такие микроорганизмы используются для подавления численности целевых объектов.) В данном же случае влияние "паразита" на переносчика таково, что нет смысла его искать т.к. невозможно представить себе реальную ситуацию предотвращения заражаемости людей, в которой это влияние следовало бы учесть.

Обнаружено косвенное влияние плазмодиев на комаров. Оно состоит в том, что возбудители повышают доступность для переносчиков позвоночных хозяев и облегчают их обнаружение. Это влияние велико и имеет явное эпидемиологическое значение: больные малярией люди особенно привлекательны для комаров и, в то же время, беззащитны перед их нападением. Изменение состава крови больного позвоночного на комарах, которые ее пьют, не отражается.

Для эпидемиологии такое заключение, конечно, не в радость. Вместо твердой уверенности: "этот - переносчик, этот - нет", оно требует разбираться с каждым случаем конкретно. В то же время и облегчение: нет, вероятно, надобности исследовать наново все аспекты жизнедеятельности комаров, зараженных малярией, как исследовались интактные особи - разница между теми и другими по всей шкале эпидемиологически важных свойств если и имеется, то пренебрежимо мала. Единственно, что необходимо иметь в виду, это повышенную привлекательность для комаров больных малярией людей и их беззащитность.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ.

1. Восприимчивость членистоногого для возбудителя болезни человека определяется его пригодностью служить средой обитания и распространения соответствующего микроорганизма.

2. Принадлежность членистоногого к определенной таксономической группе свидетельствует не о том, что оно восприимчиво к определенной группе возбудителей, а о том, что это свойство нельзя исключить без проверки.

3. Внутри семейства Culicidae по отношению к гемоспоридиям нет связи между восприимчивостью и таксономическим положением.

4. Участие членистоногих в циркуляции возбудителей возможно и без предварительного периода взаимной адаптации. Это свидетельствуют о возможности появления новых, непредвиденных переносчиков. Однако экзотические штаммы воспринимаются хуже аборигенных.

5. Наличие и уровень восприимчивости комаров к плазмодиям малярии различны для разных видов и популяций взаимодействующих организмов.

6. Восприимчивость лабильна. Её наличие и уровень зависят от наследственности, условий развития, полноты принятой порции крови и возраста особей. В результате, она варьирует на популяционном и индивидуальном уровне, и даже в течение жизни одной особи.

7. На восприимчивость комаров к плазмодиям малярии могут повлиять биологически активные вещества (в частности, инсектициды). Однако, влияние последних проявляется редко.

8. Заражение комаров плазмодиями малярии зависит от количества выпитой крови, но не зависит от повторного кровососания и от питания углеводами.

9. Для заражения комара может быть достаточно попадание в него одного макро- и одного микрогаметоцита. По этой причине наличие у донора даже очень малого числа гаметоцитов представляет эпидемическую опасность.

В естественных условиях нет верхнего предела обилия плазмодиев малярии, превышение которого приводило бы к снижению зараженности переносчика или к его гибели, т. е. нет оптимальной заражающей дозы. Существует верхний предел числа плазмодиев, развитие которых может обеспечить комар. Этот предел различен для разных видов, популяций и особей.

10. Плазмодии малярии - комменсалы комаров. Они не вызывают изменений в их жизнедеятельности, существенных для эпидемиологии (продолжительность жизни, агрессивность, способность к полету, чувствительность к инсектициду).

11. Плазмодии малярии оказывают на комаров косвенное влияние через изменение состояния позвоночного хозяина. Это влияние проявляется в том, что больной малярией становится более привлекательной и легкой добычей.

12. В случае наличия трансовариальной и трансфазовой передачи возбудителя членистоногие могут быть не только переносчиками, но и основными хранителями очагов инфекций, а при наличии трансиндивидуальной передачи - даже единственными. Осуществление этой возможности определяется количественными характеристиками каналов передачи.

Список цитированной литературы.

1. Абдуллаев И. Т., Алексеев А. Н., Расницын С. П. Первый опыт использования "летательной мельницы" для сравнительного изучения летных способностей комаров Anopheles pulcherrimus Theobald (Diptera, Culicidae). / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983, N 1. С. 11-15.

2. Александрова К. В., Тамарина Н. А., Резник Е. П. Опыт лабораторного культивирования комара Aedes togoi (Diptera, Culicidae). / Паразитология. 1978, т. 12, N 2. С. 167-170.

3. Алексеев А.Н. Основные направления исследований для борьбы с зараженными кровососущими клещами и насекомыми - переносчиками болезней человека. / Паразитология. 1979, т. 13, вып. 3. С. 185-191.

4. Алексеев А.Н. Об особенностях развития и питания кровососущих членистоногих, обеспечивающих их становление специфическими переносчиками возбудителей болезней. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984а, N 2. С. 34-39.

5. Алексеев А. Н. О специфичности членистоногих в качестве переносчиков трансмиссивных болезней и о характере симбиотических отношений между ними и возбудителями. / Паразитол. сб. Т. 32. Л.: Наука. 1984б. С. 42-59.

6. Алексеев А.Н. Основные механизмы, обеспечивающие восприятие, сохранение, развитие и передачу возбудителей трансмиссивных болезней кровососущими членистоногими переносчиками. / 9 Съезд Всес. энтомол. о-ва. Киев; окт., 1984. Тез. докл. Ч. I. Киев. 1984в. С. 19-20.

7. Алексеев А.Н. Теория связи типов питания и пищеварения кровососущих членистоногих с их способностью быть специфическими переносчиками возбудителей трансмиссивных инфекций. / Паразитология. 1985а. т. 19, вып. 1. С. 3 - 7.

8. Алексеев А.Н. Возможное значения фактора оптимальных заражающих доз в системе возбудитель-переносчик при малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985б, N 3. С. 10-17.

9. Алексеев А.Н. Взаимоотношения возбудителя малярии и беспозвоночного хозяина. / Малярийные паразиты млекопитающих. Протозоология. Вып. 11. Л.: Наука. 1986. С. 53-77.

10. Алексеев А.Н. Состав "паразитокосмоса" беспозвоночного хозяина и его значение для передачи возбудителей трансмиссивных инфекций. / Паразитол. сб. т. 36. Л.: Наука, 1989. С. 5-20.

11. Алексеев А.Н. Роль сахара растительного происхождения и сахара крови для развития возбудителя болезней в насекомых - переносчиках. / Успехи энтомологии в СССР: Двукрылые: сист., экол., мед. и вет. значение: матер. 10 съезда Всес. энтомол. о-ва, Ленинград, 12-15 сент., 1989 г. СПб. 1992. С. 86-88.

12. Алексеев А.Н. Система клещ-возбудитель и ее эмерджентные свойства. / Санкт-Петербург. Зоологический институт РАН. 1993. 203 С.

13. Алексеев А.Н., Абдуллаев И.Т., Расницын С.П. Сравнение способности к полету зараженных и незараженных плазмодиями Aedes aegypti. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 1. С. 11-13.

14. Алексеев А. Н., Арумова Е.А., Буренкова Л.А., Чунихин С.П. Об особенностях распространения возбудителя болезни Лайма и поведения зараженных им клещей рода Ixodes. / Паразитология 1993. т. 27, вып. 6. С. 389-398.

15. Алексеев А.Н., Бибикова В.А., Брикман Л.И., Контарбаев Ж.К. О сохранении микробов чумы на покровах и в кишечном тракте рыжего домового муравья (Monomorium pharaonis) в эксперименте. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1972, т. 41, N 2. С. 237-239.

16. Алексеев А.Н., Буренкова Л.А., Чунихин С.П. Особенности поведения клещей Ixodes persulcatus P. Sch. (Ixodidae), зараженных вирусом клещевого энцефалита. / Мед. паразитол. и паразитарные. болезни. 1988. N 2. С. 71-75.

17. Алексеев А.Н., Ганушкина Л.А. Экспериментальные доказательства возможности управления векторной способностью переносчиков плазмодиев малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1988. N 6. С. 22-26.

18. Алексеев А. Н., Кондрашова З. Н. Организм членистоногих как среда обитания возбудителей. / Свердловск: УНЦ АН СССР. 1985, 181 С.

19. Алексеев А.Н., Расницын С.П. Всегда ли необходимы сахара для заражения комаров плазмодиями малярии? / Паразитология. 1987. т. 21, вып. 2. С. 97-100.

20. Алексеев А.Н., Расницын С.П., Витлин Л.М. О групповом поведении самок кровососущих комаров (Diptera, Culicidae, Aedes). Сообщ. 1. Обнаружение "Эффекта приглашения." / Мед. паразитол. 1977, Т. 42, N 1, С. 23-24.

21. Алексеев А. Н., Сафьянова В.М., Карапетьян А.Б. О жизнеспособности москитов (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) под влиянием заражения промастиготами различных видов лейшманий. / Паразитология 1975. т. 9, вып. 3. С. 271-277.

22. Алексеев А.Н., Соколова Э.И., Расницын С.П. Ганушкина Л.А. Бикунова А.Н. Влияние плотности личинок комаров Aedes aegypti на их гибель под действием препаратов Bacillus thuringiensis Berl. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983, N 1. С. 78-80.

23. Алексеев А.Н., Суворова Н.И. Увеличение активности нападения резистентных Anopheles maculipennis sacharovi Favre под влиянием контакта с ДДТ. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1977, вып. 4. С. 349-444.

24. Алексеев А. Н., Чунихин С.П. Обмен вирусом клещевого энцефалита между иксодовыми клещами, совместно питавшимися на животном с подпороговым уровнем вирусемии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1990. N 2. С. 48-50.

25. Алексеев А. Н., Чунихин С.П. Передача вируса клещевого энцефалита иксодовыми клещами в эксперименте (механизмы, сроки, видовые и половые различия). / Паразитология 1990. т. 24, вып. 3. С. 177-185.

26. Алексеев А. Н., Чунихин С.П. Обмен вирусом между питающимися клещами при отсутствии вирусемии у позвоночного хозяина (дистантная передача). / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991. N 2. С. 50-54.

27. Артемьев М. М. Комары Anopheles - переносчики малярии в СССР. / Борьба с малярией экологически безопасными методами. Ч. 2. М.: Центр международных проектов ГКНТ. 1984. С. 44-60.

28. Астафьев Б.А., Яроцкий Л.С., Лебедева М.Н. Экспериментальные модели паразитозов в биологии и медицине. / М. Наука. 1989. 279 С.

29. Бабенко Л. В., Рубина М. А. Закономерности развития таежного клеща в районе Кемчугского стационара. / В кн.: Вопросы эпидемиологии клещевого энцефалита и биологические закономерности в его природном очаге. М. 1968. С. 138-168

30. Балашов Ю.С. Кровососущие клещи (Ixodoidea) - переносчики болезней человека и животных. / "Наука", Л. 1967. 319 С.

31. Балашов Ю.С. Патогенность возбудителей трансмиссивных инфекций для членистоногих переносчиков. / Итоги развития учения о природной очаговости болезней человека и дальнейшие задачи. М. 1972. С. 162-179.

32. Балашов Ю. С. Роль морфофизиологических особенностей кровососущих членистоногих в передаче возбудителей инфекций. / Паразитол. сб. АН СССР 1984, т. 32. С. 22-42.

33. Балашов Ю. С ., Дайтер А. Б. Интенсивность газообмена у клещей Hyalomma asiticum P. Sch. et E. Schl., зараженных риккетсиями Coxiella burneti и Dermacentroxenus sibiricus / Паразитология. 1969. т. 3, вып. 1.

С. 12-16.

34. Балашов Ю. С ., Дайтер А. Б. Кровососущие членистоногие и риккетсии. / Л.: Наука, 1973. 251 С.

35. Балашов Ю. С ., Дайтер А. Б., Станюкович А. К. Влияние инфицирования риккетсиями Coxiella burneti и Dermacentoroxenos sibiricus на содержание свободных аминокислот в организме клеща Hyalomma asiaticum. / Паразитология. 1969. т. 3, вып. 4. С. 281-286.

36. Балашов Ю. С. Трансовариальная передача спирохеты Borrelia sogdiana клещом Ornitodoros papillipes и ее влияние на биологические особенности возбудителя. / Паразитология. 1968. т. 2, вып. N 3. С. 193-201.

37. Беклемишев В.Н. Гонотрофический ритм как один из основных принципов биологии малярийного комара. / В кн: Вопросы физиологии и экологии малярийного комара. М. 1940, вып. 1. С. 3-22.

38. Беклемишев В.Н. О факторах, определяющих маляриогенную роль отдельных видов Анофелес. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1941.т. 10, N 1. С. 5-8.

39. Беклемишев В. Н. Экология малярийного комара Anopheles maculipennis Mg. / М.: Медгиз. 1944, 300 С.

40. Беклемишев В. Н. О принципах сравнительной паразитологии в применении к кровососущим членистоногим. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1945. т. 14, N 1. С. 3-11.

41. Беклемишев В.Н. О взаимоотношениях между систематическим положением возбудителей и переносчиков трансмиссивных болезней наземных позвоночных и человека. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1948. т. 17. N 5. С. 385-400.

42. Беклемишев В.Н. (Ред.) Учебник медицинской энтомологии. Часть I. 1949./ М. Медгиз, 490 С.

43. Беклемишев В.Н. Круг естественных переносчиков трансмиссивных болезней, поражающих человека. / Зоол. ж. 1955, т. 34, N 1. С. 3-16.

44. Беклемишев В.Н. Некоторые вопросы эпидемиологии и эпизоотологии клещевого энцефалита. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1959, т. 28, N 3. С. 310-318.

45. Беклемишев В.Н. Термины и понятия, необходимые при количественном изучении популяций эктопаразитов и нидиколов. / Зоол. ж. 1961, т. 40, N 2. С. 149-158.

46. Беклемишев В. Н., Желоховцев А. Н. Ареалы некоторых видов Anopheles и причины их обуславливающие. / Бюлл. Московск. о-ва испытателей природы. Отдел биологии. 1945. т. 50. N 1-2. С. 56-73.

47. Бибикова В. А. Восприимчивость комаров к завозным штаммам возбудителя малярии человека (обзор литературы). / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1975, N 2. С. 219-225.

48. Бибикова В. А. Экспериментальное изучение восприимчивости комаров к завезенным штаммам возбудителя человеческой малярии. / Тез. докл. XVI Всесозн. съезда микробиол. и эпидемиол. Ульяновск. 1977. С. 259-261.

49. Бибикова В.А., Бгытова С.И. Воздействие возбудителя на организм переносчика. / Вопросы природной очаговости болезней. Алма-Ата. 1968. С. 107-116.

50. Бибикова В.А., Дашкова Н.Г., Расницын С.П., Сулейманов Г.Д., Тибурская Н.А. Передача комарами Anopheles maculipennis atroparvus бразильского штамма трехдневной малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3. С. 63-67.

51. Бибикова В.А., Классовский Л.Н.. Передача чумы блохами. 1974. / М. Медицина. 188 стр.

52. Бибикова В.А., Павлова А.Е. Влияние зараженности блох микробами чумы на их дыхание. / Вопросы природной очаговости болезней. 1970. С. 155-159.

53. Биологический энциклопедический словарь. 1986. / М. 831 С.

54. Биология малярийных паразитов: Докл. Науч. группы ВОЗ. / Женева. ВОЗ. М. Медицина. 1988, 223 С. (Серия технических докладов ВОЗ, N 743).

55. Бреев К.А. Применение негативного биномиального распределения для изучения популяционной экологии паразитов. / Методы паразитологических исследований. Вып. 6. Л. Наука. 1972. 72 С.

56. Брей Р., Гарнэм П. (Bray R.S., Garnham P.C.) Anopheles как переносчики паразитов малярии животных. / Бюлл. ВОЗ. 1964, т. 316 N 1. С. 150-152.

57. Бук А. де, Свелленгребель Н. (Buck A. de, Swellengrebel N.H.) О сезонных изменениях A. maculipennis, влияющих на их способность передавать малярию. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1935, т. 4, N 1-2. С. 29-35.

58. Васильева И.С., Ершова А.С. Влияние боррелий - возбудителей клещевого возвратного тифа на переносчика. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 3. С. 16-20.

59. Ващенок В.С. Блохи и возбудители бактериальных болезней человека и животных. / Паразитологический сб. Л. Наука. 1984, т. 32. С. 79-123.

60. Верета Л. А., Воробьева М. С. Природная гетерогенность и целенаправленный отбор штаммов вируса клещевого энцефалита. / М.: Медицина, 1990. 124 С.

61. Виноградская О.Н. Взрослые комары . / Руководство по мед. энтомол. М.: Медицина, 1974. С. 59-79.

62. Войцик А.А., Расницын С.П. Влияние экспозиции и корма на результаты тестирования бактериальных инсектицидов на личинках комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991, N 1. С. 21-23.

63. Ганушкина Л.А. Действие биологически активных веществ на восприимчивость комаров к плазмодиям малярии. / "Пути совершенствования микробиологической борьбы с вредными насекомыми и болезнями растений." Всес. конф. Велегож, 13-15 мая, 1986. Тез. докл. и стен. сообщ. Оболенск. 1986. С. 185.

64. Ганушкина Л. А. Оценка влияния ларвицидов на основе Bacillus thuringiensis var. israilensis Н-14 и Bacillus sphaericus на восприимчивость взрослых комаров к плазмодиям малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1987, N 1. С. 10-13.

65. Ганушкина Л.А. Связь между изменением микрофлоры кишечника личинок комаров под действием фитобактериомицина и восприимчивостью самок к возбудителю малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992. N 2. С. 47-50.

66. Ганушкина Л.А., Захарова Н.Ф., Алексеев А.Н., Чунина Л.М., Якубович В.Я. О возможности воздействия на восприимчивость к возбудителю малярии ее переносчиков. / Успехи энтомологии в СССР. СПб. 1992. С. 106-108.

67. Ганушкина Л.А., Захарова Н.Ф., Чунина Л.М., Якубович В.Я., Дадашева Н.Р. Экспериментальное изучение влияния различных биологически активных веществ на восприимчивость комаров к возбудителю малярии. Сообщение 1. Регуляторы развития насекомых. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991. N 1. С. 3-6.

68. Гурбо Г. Д., Дубов А. В., Катин А. А., Силалова З.З. Материалы по трансовариальной передаче вируса клещевого энцефалита. / В кн.: Вопросы краевой инфекционной патологии. Тюмень. 1969. С. 31.

69. Дашкова Н.Г. Новые данные о восприимчивости комаров рода Anopheles фауны СССР к завозным штаммам возбудителей малярии человека. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1977, N 6. С. 652-657.

70. Дашкова Н.Г., Расницын С.П. Сравнение заражаемости комаров возбудителями малярии при кровососании на человеке и через биомембранну. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3. С. 88-91.

71. Дашкова Н. Г., Степенко А.С., Глушкова М.Р., Яроцкий Л.С. Завоз малярии в Москву из-за границы. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978. т.47. N 4. С. 105-109.

72. Демина Н. А., Левитанская П. Б., Авраменко В. А. Заражение разных видов комаров (рода Aedes и Culex) Plasmodium gallinaceum. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1951, N 5. С. 472-473.

73. Демина В.Т., Шагов Е.М., Расницын С.П. Оптимизация плотности содержания личинок Anopheles sacharovi Favre (Diptera, Culicidae) в культурах. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 4. С. 56-58.

74. Дербенева-Ухова В.П. (Ред.) Руководство по медицинской энтомологии. 1974. / М. Медицина. 360 С.

75. Детинова Т.С. Методы установления возрастного состава двукрылых насекомых, имеющих медицинское значение. / Женева: ВОЗ, 1962. 220 С.

76. Детинова Т.С., Расницын С.П., Маркович Н.Я., Куприянова Е.С., Аксенова А.С., Ануфриева В.Н., Бандин А.И. Жаров А.Н. Унификация методов учета численности кровососущих двукрылых насекомых. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, Т. 47, N 5, С. 84-92.

77. Детинова Т.С, Смелова В.А. К вопросу о медицинском значении комаров (Culicidae, Diptera) фауны Советского Союза. / Мед. паразитол. и паразитарные. болезни. 1973. N 4. С. 455-471.

78. Джавадов Р. Б., Трофимов Г.К., Куроченко Г.Н. О восприимчивости Anopheles maculipennis atroparvus V.Thiel к заражению азербайджанскими штаммами плазмодиев трехдневной малярии (Plasmodium vivax). / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1977, т. 46, N 2б. С. 190-191.

79. Джавадов Р. Б., Трофимов Г.К., Куроченко Г.Н., Дашкова Н.Г., Борисова Л.П., Киясов А.Я., Алиева С.И. О восприимчивости комаров Anopheles maculipennis sacharovi и Anopheles maculipennis subalpinus к заражению возбудителем тропической малярии из Африки. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3. С. 84-87.

80. Дробозина В.П., Алексеев А.Н., Бондарева Н.И., Суворова Н.И. Раздражимость и поведение Anopheles sacharovi Favre в обработанных помещениях поселков Азербайджанской ССР. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1977, т. 46, N 1. С. 51-57.

71. Дробозина В. П., Бондарева Н. И. Активность нападения на добычу резистентных к ДДТ Anopheles labranchiae atroparvus Thiel после контакта с этим инсектицидом. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1980, вып. 1. С. 9-12.

82. Духанина Н.Н., Баранова А.М. (сост.) Руководство по эпидемиологическому надзору за малярией в СССР. Ч. 1. / М. НПО Союзмединформ. 1989. 264 С.

83. Ершова А. С., Васильева И. С. Влияние возбудителя клещевого возвратного тифа на выживание переносчика / 12-я Всесоюз. конф. по природной очаговости болезней. Тез. Докл. (10-12 окт. 1989 г., Новосибирск). М., 1989. С. 60-61.

84. Жарова А.Н., Расницын С.П. Сохранение возбудителя малярии в комарах, получивших сублетальные дозы инсектицида. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 5. С. 82-84.

85. Жарова А.Н., Расницын С.П., Дашкова Н.Г. Плодовитость комаров Aedes aegypti в связи с их зараженностью возбудителем малярии Plasmodium gallinaceum. / Паразитология. 1984. т. 18, вып. 6. С. 469-472.

86. Жмаева З. М. Цикл развития Ix. persulcatus P.Sch. в Европейских южнотаежных лесах. / Тезисы докл. 1-го акарологического совещания. Л. 1966. С. 94-95.

87. Жмаева З. М. О развитии Ixodes persulcatus P.Sch. в Европейских южнотаежных лесах. / В кн.: Клещевой энцефалит в Удмуртии и прилежащих областях. Ижевск. 1969. С. 118-141

88. Жмаева З. М., Пчелкина А. А. Клещи Ixodidae и вирусы комплекса клещевого энцефалита. / В кн.: Биологическое взаимоотношение кровососущих членистоногих с возбудителями болезней человека. М. 1967. С. 32-58.

89. Заречная С.Н. Введение в медицинскую энтомологию. 1975. / М. 21 С.

90. Захарова Н. Ф., Ганушкина Л. А., Чернов Ю. В., Чунина Л.М., Якубович В,Я., Ясюкевич В.В. Восприимчивость к малярийным плазмодиям комаров Aedes aegypti L., пораженных энтомопатогенным вирусом. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1988, N 6. С. 18-22.

91. Захарова Н.Ф., Расницын С.П. Половая активность Anopheles sacharovi Favre в лабораторных условиях. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 4. С. 58-64.

92. Званцов А.Б., Ясюкевич В.В., Расницын С.П. Влияние условий развития комаров Aedes aegypti L. на их заражаемость Plasmodium gallinaceum Brumpt. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 6. С. 68-71.

93. Злотин А.З. Техническая энтомология. Наукова думка, Киев, 1989, С. 1-184.

94. Зуйтин А.Н. Изменчивость комаров. 2. Изменчивость малярийного комара Anopheles maculipennis Meig. Сравнение изменчивости у Anopheles и Culex. / Тр. Петергофск. ест.-науч. ин-та. 1926, N 3. С. 76-98.

95. Ильенко В. И., Горожанкина Т.С., Смородинцев А. А. Основные закономерности трансовариальной передачи вируса клещевого энцефалита клещами-переносчиками. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1970, N 3. С. 263-269.

96. Калмыков П. Г. Развитие иксодовых клещей в природных условиях островов Японского моря. / В кн.: Природная очаговость болезней и вопросы паразитологии. Вып. 3. Алма-Ата. 1961. С. 506-509.

97. Карибов Н. Прибор для насильственного кормления комаров. / Вестн. троп. мед. 1928, т. 1, N 1Б. С. 73-74.

98. Кауфман Б.З. Паразитарные инвазии и преферентное поведение промежуточных хозяев - беспозвоночных. / Экол.-популяцион. анализ паразито-хозяин. отношений. Петрозаводск. 1988. С. 162-167.

99. Качаворян Э.А., Тертерян А.Е. Морфологическая изменчивость личинок мошек Cnetha australe Rubz. и Cnetha chubarevae Kach. et Tert. (Dipters, Simuliidae). / Энтомол. обозрение. 1983, т. 62, N 2. С. 348-355.

100. Кеннеди К. (Kennedy C.R.) Экологическая паразитология. / М. Мир. 1978. 230 С.

101. Кисленко Г.С., Чунихин С.П., Расницын С.П., Курунков В.Б., Изотов В.К. Изучение репродукции вирусов Повассан и Западный Нил в комарах Aedes aegypti и в культуре их клеток. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1982, N 3. С. 13-15.

102. Клейн Т.А., Хэррисон Б.А., Гроув Дж. С., Диксон С.В., Андре Р. Дж. Корреляция показателей выживаемости комаров Anopheles dirus A (Diptera: Culicidae) с различными индексами плотности Plasmodium cynomolgi. / Бюлл. ВОЗ. 1986, т. 64, N 6. С. 66-72.

103. Кондрашкина К.И. Болеют ли блохи чумой? / Проблемы особо опасных инфекций. 1969. N 5. С. 212-222.

104. Кононов Н.П., Демченко Т.А., Анисимов П.И., Кондрашкина К.И., Лукьянова А.Д. Патогенное действие чумного микроба на организм блохи Xenopsylla cheopis и ультраструктура возбудителя в различные сроки пребывания в переносчике. / Паразитология. 1986, т. 20, N 1, 19-22.

105. Коренберг Э. И. О некоторых общих закономерностях эпизоотологии клещевого энцефалита. / В кн.: Природноочаговые инфекции и инвазии. Вильнюс. 1974. С. 62-67.

106. Коренберг Э.И., Баннова Г.Г., Ковалевский Ю.В., Караванов А.С. Внутрипопуляционные различия инфицированности взрослых Ixodes persulcatus

P.Sch. вирусом клещевого энцефалита и оценка его суммарного содержания в клещах. / Вопросы вирусологии. 1988, N 4. С. 456-461.

107. Коренберг Э.И., Баннова Г.Г., Ковалевский Ю.В., Караванов А.С. Определение степени инфицированности взрослых иксодовых клещей вирусом клещевого энцефалита. / Вопросы вирусологии. 1996, N 3. С. 319-321.

108. Крючечников В.Н. Понятие "специфический переносчик" в медицинской паразитологии. / В сб. "Вопр. природ. очаговости болезней" (Алма-Ата), 1983, N 13. С. 56-67.

109. Кучерук В.В., Росицкий Б. Природная очаговость инфекций - основные термины и понятия. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 2. С. 7-16.

110. Лутта А. С., Лобкова М. П., Усова З. В. Изучение кровососущих членистоногих Карелии. / Учен. записки Петрозаводск. у-та. 1970, т.16, N 14. С. 166-171.

111. Лысенко А. Я., Бароян О. В. Малярия. / В кн.: Новые аспекты тропической патологии. М., Медицина. 1979.

112. Лысенко А.Я., Левитанская П.Б. К вопросу о так называемой "биологической пробе" (ксенодиагностике) при малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1951, т. 20, N 3. С. 251-256.

113. Лысенко А.Я., Левитанская П.Б. О влиянии переменных температур на спорогонию Pl. relictum и Pl. vivax. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1952. N 4. С. 345-351.

114. Максимова Н.В., Чунина Л.М., Жарова А.Н., Чернов Ю.В. Электронно-микроскопическое изучение воздействия ооцист и спорозоитов малярийного паразита на эпителий средней кишки комара. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1988. N 1. С. 9-12.

115. Методы изучения природных очагов болезней человека. / М. Медицина. 1964. 308 С.

116. Мошковский Ш.Д. О зависимости скорости развития плазмодиев малярии в комаре от температуры. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1946. N 6. С. 19-28.

117. Мошковский Ш.Д. Основные закономерности эпидемиологии малярии. / М. Медгиз. 1950. 323 С.

118. Некрасова Л. С. Изменчивость некоторых количественных и качественных признаков комаров Aedes dorsalis из личиночных культур разной плотности. / Паразитология. 1986, N 1. С. 23-31.

119. Некрасова Л.С. Связь гибели личинок кровососущих комаров в хлорофосе с их биологической неоднородностью. / Экология. 1989, N 4. С. 39-46

120. Нельзина Е.Н., Алутин И.М., Сорокина Л.Я. Устойчивость блох к инсектицидам и ее влияние на "блокообразование" при чуме. / Переносчики особо опасных инфекций и борьба с ними. Ставрополь. 1970. С. 38-43.

121. Немировская А.И. Закон реинокуляции при малярии. / Мед. паразитол. и паразитные болезни. 1941. Вып. 3-4. С. 324-339.

122. Немировская А. И. Сравнительный анализ завезенной малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1969, т. 38. С. 200-206

123. Николаев Б.П. О влиянии температуры на развитие плазмодия малярии в организме комара. / Тр. Ленинградского ин-та бактериологии им. Пастера, 1935, т. 2. С. 108-109

124. Орлов В.С. Актуальные вопросы изучения эпидемиологии малярии в СССР. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1987. N 4. С. 3-6.

125. Павловский Е. Н. О природной очаговости инфекционных и паразитарных болезней. / Вестн. АН СССР. 1939. т. 10. С. 98-108.

126. Павловский Е. Н. Переносчики и резервуары вируса клещевого (весенне-летнего) энцефалита. / Арх. биол. наук. 1940. т. 59. N 1-2. С. 58-71.

127. Павловский Е. Н., Соловьев Г. В. Экспериментальное исследование над циркуляцией вируса клещевого энцефалита в организме клеща переносчика (Ixodes persulcatus). / Архив биол. наук. 1940, N 1-2. С. 111-117.

128. Павловский Е.Н. Микроорганизм, переносчик и внешняя среда в их соотношениях. / Зоол. ж. 1947, т. 26, N 4. С. 312-397.

129. Пархоменко С.И. Изменчивость и полиморфизм популяций Aedes cinereus и Mg. Aedes rossicus D.G.M. / Экол.-морфол. особенности животных и среда их обитания. Киев. 1981. С. 108-110

130. Петрищева П.А. (Ред.) Биологические взаимоотношения кровососущих членистоногих с возбудителями болезней человека. / Медицина, М. 1967. 304 С.

131. Померанцев Б. И., Сердюкова Г. В. Экологические наблюдения над клещами семейства Ixodidae - переносчиками весенне-летнего энцефалита на Дальнем Востоке. / В кн.: Паразитология. Сб. зоол. ин-та АН СССР. 1947, вып. 9. С. 47-67

132. Попов В. М. Переносчик клещевого энцефалита. / М. 1959. 116 С.

133. Пчелкина А. А., Гроховская И. М., Бердыев А., Подборонов В. М., Куксгаузен Н. А. Исследование взаимоотношений рикетсий Бернета и клещей Ixodoidea / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1980. т. 49, N 2. С. 11-17.

134. Петров В.Г. Экспериментальное изучение клещей Dermacentor marginatus Sulz и Rhipicephalus rossicus Jak. как переносчиков туляремии. / Вопросы эпидемиологии и профилактики туляремии. М. Медгиз. 1958. С. 117-123.

135. Рабинович С. А., Мошковский Ш. Д. Экспериментальное изучение противомалярийного препарата галохина (циклохин). Сообщ. 1. Сравнение гематошизотропной активности галохина и хлорохина при равных дозах. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1964, т. 33, N 4. С. 472-478.

136. Разумова И. В., Алексеев А. Н. Влияние физиологического возраста клещей Dermacentor marginatus (Ixodidae) на их заражение и проникновение вируса клещевого энцефалита в слюну. / Паразитология. 1991. т. 25, вып. 2. С. 147-155.

137. Разумова И. В., Чунихин С. П. Оценка связи физиологического возраста и зараженности клещей-переносчиков в очаге клещевого энцефалита. / 12-я Всесоюз. конф. по природной очаговости болезней. Тез. Докл. (10-12 окт. 1989 г., Новосибирск). М., 1989. С. 132-133.

138. Расницын С.П. Изучение активности слепней при помощи чучелообразных ловушек. / Зоол. ж. 1963, т. 42, N 6, c. 951-953.

139. Расницын С.П. Применение таксономического анализа для сравнения биотопов по их фауне и населению. / Ж. Общей биологии. 1965, т. 26, N 3. С. 335-340.

140. Расницын С.П. Методы сбора и учета кровососущих двукрылых. Руководство по медицинской энтомологии. / М. "Медицина". 1974, С. 163-175.

141. Расницын С.П. Оценка значения трансфазовой и трансовариальной передачи для сохранения популяции возбудителя. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1976, т. 41 N 3. С. 269-273.

142. Расницын С.П. Некоторые критерии оценки методов количественного учета животных. / Зоол. ж. 1978, т. 57, N 1, С. 124-131.

143. Расницын С.П. Вероятные причины эффективности звуковых генераторов, предназначенных для отпугивания комаров. / "Докл. МОИП. Зоол. и ботаника. 2-е полугодие 1977 г." М. Из-во МГУ. 1980а. С. 12-13.

144. Расницын С.П. Питательная среда для выращивания личинок желтолихорадочного комара Aedes aegypti. / Авт. свид. СССР N 790389. 1980б.

145. Расницын С.П. Задачи и возможности классификационных систем. / В сб. "Теория классификации и анализ данных". Ч. 1. Новосибирск, Изд-во ВЦ СО АН СССР. 1981. С. 25-26.

146. Расницын С. П. Алгоритмы для расчета размеров культур насекомых. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1982а, N 3. С. 37-42.

147. Расницын С.П. Стратегия массового культивирования насекомых. / "Докл. МОИП. Зоол. и ботаника. 1980 г." М. Из-во МГУ. 1982б. С. 35-37.

148. Расницын С.П. Влияние концентрации и численности личинок Anopheles stephensi на их смертность под действием Bacillus thuringiensis. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985а, N 3. С. 31-35.

149. Расницын С.П. Массовое культивирование Anopheles sacharovi Favre. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985б. Вып. 6. С. 54-56.

150. Расницын С.П. Анализ применимости показателей, характеризующих размеры, вес и плодовитость комаров в качестве морфофизиологических индикаторов. / Паразитология. 1986а, т. 20, N 2. С. 106-111.

151. Расницын С.П. Влияние возбудителей малярии на векторные способности Anopheles. / "Малярийные паразиты млекопитающих". Паразитология, вып 11, Л. "Наука". 1986б. С. 162-167.

152. Расницын С.П. Проблемы культивирования переносчиков болезней человека и животных. / В сб. "1-е Всесоюзн. совещание по проблемам зоокультуры" ч. 3., М. 1986в. С. 245-247.

153. Расницын С.П. Новый вариант использования генетики для ограничения переноса возбудителей болезней комарами. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993, т. 27, N 5. С. 44-47.

154. Расницын С.П. Концепция медицинской энтомологии: Определение влияния членистоногих на здоровье людей. / Изв. АН России. Сер. биологическая. 1996, N 4. С. 437-445.

155. Расницын С.П. Концепция медицинской энтомологии: Управление влиянием членистоногих на здоровье людей. / Изв. АН России. Сер. биологическая. 1997, N 2. С. 196-203.

156. Расницын С.П., Алексеев А.Н., Витлин Л.М. Групповое поведение самок кровососущих комаров. / "Доклады МОИП. Зоол. и ботаника. 1-е полугодие 1975 г." М., Из-во МГУ. 1978, С. 11-12.

157. Расницын С.П., Алексеев А.Н., Горностаева Р.М., Куприянова Е.С., Потапов А.А., Разумова О.В. Отрицательные результаты испытания образцов звуковых генераторов, предназначенных для отпугивания комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1974, Т. 39, N 6, С. 106-109.

158. Расницын С.П., Бикунова А.Н. Результаты сравнения некоторых методов оценки нападения мошек на человека. / Мед. паразитол. 1979, т. 48, N 4. С. 56-62.

159. Расницын С.П., Войцик А.А., Евсеева В.Е. Влияние концентрации и численности личинок комаров (Diptera, Culicidae) на результаты токсикологических испытаний бактериальных инсектицидов. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1986, N 1. С. 13-15.

160. Расницын С.П., Войцик А.А., Званцов А.Б. Влияние условий развития личинок комаров на их чувствительность к бактериальным инсектицидам. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1988, N 1. С. 15-18.

161. Расницын С.П., Войцик А.А., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Оценка совместного действия двух видов энтомопатогенных бактерий на личинок комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 5-6. С. 44-45.

162. Расницын С.П., Войцик А.А., Скидан К.Б. Применимость бактериальных препаратов, предназначенных для борьбы с комарами, в соленой воде. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993. N 3, C. 33 - 34.

163. Расницын С.П., Войцик А.А., Ясюкевич В.В. Сравнение нескольких видов малярийных комаров по реакции на бактериальные инсектициды. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991, N 4, C. 6-9.

164. Расницын С.П., Войцик А.А., Ясюкевич В.В. Влияние температуры на действие бактериальных препаратов на личинок комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993, N 1. С. 8-10.

165. Расницын С.П., Войцик А.А., Ясюкевич В.В. Лебедева Н.Н. Федин В.В. Оценка стабильности метода тестирования инсектицидной активности бактериальных препаратов в отношении личинок комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1995. N 2. С. 4-7.

166. Расницын С.П., Волкова Л.Б. Анализ эффекта группы на примере личинок комаров Aedes aegypti (Diptera, Culicidae). / Экология. 1982, N 4. С. 73-77.

167. Расницын С.П. Демина В.Т. Способ культивирования личинок малярийных комаров. / Авт. свид. СССР N 660638. 1979.

168. Расницын С.П., Демина В.Т. Среда для выращивания личинок малярийного комара Anopheles sacharovi. / Авт. свид. СССР N 1081781. 1983.

169. Расницын С.П., Жарова А.Н. Отсутствие влияния повторного кровососания комаров на их зараженность возбудителем малярии. / Паразитология. 1984, т. 18, N 2. С. 179-181.

170. Расницын С.П. Жарова А.Н. Влияние контакта комаров с ДДТ на их восприимчивость к возбудителю малярии. / Паразитология. 1985а, т. 19, N 4. С. 287-289.

171. Расницын С.П., Жарова А.Н. Чувствительность к ДДТ комаров Aedes aegypti, зараженных возбудителем малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985б, N 1. С. 15-17.

172. Расницын С.П., Захарова Н.Ф., Демина В.Т. Изменение осемененности самок Anopheles sacharovi Favre в зависимости от условий содержания. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 1. С. 6-10.

173. Расницын С.П., Званцов А.Б., Войцик А.А., Ясюкевич В.В. Создание лабораторной колонии комаров Anopheles pulcherrimus. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 3. С. 88.

174. Расницын С.П., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Возможность использования массы куколок и имаго Aedes aegypti для определения количества поглащаемой ими крови. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991а, N 1. С. 16-20.

175. Расницын С.П., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Новые модели циркуляции возбудителя малярии Plasmodium gallinaceum с использованием малярийных комаров фауны СССР. / Паразитология. 1991б. т. 25, вып. 3. С. 196-202.

176. Расницын С.П., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Экспериментальная модель циркуляции возбудителя малярии. / Авт. свид. СССР N 1681331, 1991г.

177. Расницын С.П., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Влияние состояния репродуктивной системы самок комаров на их заражаемость возбудителем малярии. / Паразитология. 1993, т. 27, N 4. С. 280 - 288.

178. Расницын С.П., Косовских В.Л. Влияние продолжительности экспозиции на число кровососущих двукрылых (Diptera), выловленных темным колоколом. / Мед. паразитол. 1983, N 6, С. 69-72.

179. Расницын С.П., Косовских В.Л. Усовершенствованный метод учета обилия комаров сачком вокруг человека и сравнение его с учетом темным колоколом. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1979, N 1, С.18-24.

180. Расницын С.П., Лебедева Н.Н. Привлечение самок городского комара для откладки яиц. / Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. 1996, N 1, С. 29 - 33.

181. Расницын С.П., Лебедева Н.Н., Давыдов Б.В. Опыт использования ловушек для сбора яйцекладок городского комара (Culex pipiens). / Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. 1996, N 4. С. 22-25.

182. Расницын С.П., Макарова С.И., Шевелева Г.А. Распределение мошек (Diptera, Simuliidae) в ручьях Приангарья. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1966, т. 35, N 1. С. 3-7.

183. Расницын С.П., Шагов Е.М., Демина В.Т. Возможность использования массы куколок как показателя состояния особей у комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983, N 4. С. 42-45.

184. Расницын С.П., Ясюкевич В.В. О способности личинок комаров (Diptera, Culicidae) переносить голодание. / Энтомол. обозр. 1988, т 67, N 4. С. 708-715.

185. Расницын С.П., Ясюкевич В.В. Связь способов питания личинок малярийных комаров с их строением и поведением. / Зоол. ж. 1989а, т. 68, N 7, с. 155-158.

186. Расницын С.П., Ясюкевич В.В. Способ выращивания личинок малярийных комаров. / Авт. свид. СССР N 1488983. 1989б.

187. Расницын С.П., Ясюкевич В.В., Войцик А.А. Связь между способом питания личинок малярийных комаров и их устойчивостью к бактериальным инсектицидам. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 3. С. 28-30.

188. Расницын С.П., Ясюкевич В.В., Званцов А.Б. Особенности восприимчивости Aedes togoi к Plasmodium gallinaceum. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1990, N 6. С. 24-26.

189. Расницын С.П., Ясюкевич В.В., Званцов А.Б., Артемьев М.М. Воссоздание лабораторной колонии Anopheles superpictus. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1990, N 1. С. 7-9.

190. Расницын С.П., Ясюкевич В.В., Званцов А.Б., Сорокин Н.Н., Степнов А.П. Создание лабораторной культуры комаров Anopheles martinius Schingarev, 1926. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 1. С. 17-18.

191. Резистентность к инсектицидам и борьба с переносчиками. Семнадцатый докл. ком. экспертов ВОЗ по инсектицидам. / М. 1972. 366 С.

192. Ременникова В.Н. О влиянии отдельных факторов на зараженность малярийных комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1946. N 5. С. 440-448.

193. Сергиев П. Г. Методика вскрытия комаров. / Лаборатор. практика. 1934, N 11. С. 15-17.

194. Сергиев П. Г., Жукова Т.А., Сарикян С.Я. Малярия в СССР в 1963-1965 г. и пути ее предупреждения в 1966-1970. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1966. т. 35. N 4. С. 444-457.

195. Сергиев П.Г., Тибурская Н.А. Особенности штаммов Pl. vivax. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1944, т. 13, N 5. С. 36-47.

196. Смирнов Е.С. Таксономический анализ. / М. Из-во МГУ. 1969, 187 С.

197. Стегний И.Н., Кабанова В.М., Новиков Ю.М. Кариотипическое исследование малярийного комара. / Цитология. 1976, т. 18, N 6. С. 760-766.

198. Степнюк В.Д., Литвин В.П. Эпизоотологический словарь. / "Урожай". Киев. 1976. 120 С.

199. Супряга В.А., Дашкова Н.Г., Расницын С.П. Сравнение некоторых способов искусственного кормления кровью трех видов комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3. С. 111-112.

200. Тажибаев Д.Т. Биология и сезонная изменчивость морфологических структур Wilhelmia mediterranea (Simuliidae, Diptera). / Фрунзе, 1974. 7 С. (Рукопись деп. в ВИНИТИ 12 апр. 1974 г., N 973-74 Деп.)

201. Тамарина Н.А. Физиологическая разнокачественность Culex p. molestus. / Тр. XII Междунар. Энтомол. конгресса. 1972, т. 3, c. 258.

202. Тамарина Н.А. Техническая энтомология - новая отрасль прикладной энтомологии. / Итоги науки и техники. Энтомология. Т.7. М. 1987. С. 5-245.

203. Тамарина Н.А. Основы технической энтомологии. / Из-во МГУ, 1990, 204 c.

204. Тамарина Н.А., Максимов В.Н. Общие принципы оптимизации и стандартизации культур насекомых. / Энтомологическое обозрение. 1989, т. 68, вып 2. С. 241-250.

205. Тарасов В.В. Медицинская энтомология. / МГУ. 1996. 350 С.

206. Терминология по малярии и ликвидации малярии. ВОЗ. / Женева. 1964. 144 С.

207. Тибурская Н. А. Продолжительность инкубационного периода при малярии вызванной Корейским штаммом P. vivax. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1962, т. 31, N 6. С. 643-648.

208. Тибурская Н. А. Группировка штаммов P. vivax по типу инкубации. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1964, N 2. С. 204-211.

209. Тибурская Н. А. Описание штаммов возбудителя трехдневной лихорадки, вызывающей острую инфекцию после непродолжительной инкубации. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1965, т. 34, N 6. С. 667-672.

210. Устинов А.А. Сезонные изменения размеров An. m. maculipennis в Абхазии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1941, т. 10, N 3-4. С. 457-458.

211. Фасулати К.К. Полевое изучение наземных беспозвоночных. Изд. 2. / М., Мир. 1971. 424 С.

212. Филиппова Н.А. Таксономические аспекты переноса возбудителей болезни Лайма. / Паразитология. 1990, т, 24, N 4. С. 257-267.

213. Хейсин Е. М., Павловская О., Михайлова Р. П., Рыбак В.Ф. Продолжительность цикла развития Ixodes persulcatus в природных условиях Карело-Финской ССР. / Труды Карело-Финского ун-та. 1954, т.6. С. 102-123.

214. Чагин К. П. Наблюдения за циклом развития Aedes (F.) togoi в лабораторных и природных условиях. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1943, т. 12, N 2. С. 44-52.

215. Чагин К. П. Завоз малярии в СССР и предупреждение его эпидемиологических последствий. / В сб.: Актуальные проблемы этиологии, патогенеза, клиники и лечения тропических болезней. М. 1976. С. 19-21.

216. Чагин К. П., Жукова Т.А., Духанина Н.Н., Лопухина Н.Г., Алексеева З.М. Проблема завоза малярии в СССР. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1975, т.44, N 4. С. 396-405.

217. Чернов Ю.В., Чунина Л.М. Начальные стадии постспорозоитного развития малярийного паразита в комаре. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1988. N 4. С. 7-10.

218. Чумаков М. П. Изучение ультравирусных энцефалитов. Сообщ. 6. Передача вируса клещевого энцефалита потомству у иксодовых клещей - природных резервуарах этой инфекции. / Мед паразитол. 1944, N 6. С.38-42.

219. Чумаков М. П., Гладких С. Г. К вопросу о роли иксодовых клещей в передаче весенне-летнего энцефалита. / Бюлл. экспер. биол. 1939, т. 7, в. 2-3. С. 221-223.

220. Чунина Л.М., Захарова Н.Ф., Ганушкина Л.А., Якубович В.Я. Экспериментальное исследование влияния различных биологически активных веществ на восприимчивость комаров к возбудителю малярии. Сообщение 3. Водоросли, удобрения. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991. N 2. С. 45-48.

221. Чунина Л.М., Якубович В.Я., Ганушкина Л.А., Захарова Н.Ф., Дадашева Н.Р. Отсутствие воздействия пиретроидов дельтаметрина и циперметрина на восприимчивость комаров к возбудителю малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1990. N 1. С. 20-23.

222. Чунихин С. П., Алексеев А. Н., Решетников И. А. Экспериментальное изучение роли самцов иксодовых клещей в циркуляции вируса клещевого энцефалита. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989. N 3. С. 86-87.

223. Чунихин С. П., Стефуткина Л. Ф., Королев М. Б., Решетников И. А., Хозинская Г. А. Половая передача вируса клещевого энцефалита у иксодовых клещей (Ixodidae). / Паразитология. 1983. т. 17, вып. 3. С. 214-217.

224. Чурилова А. А., Ягодинский В. Н., Александров Ю. В. О трансовариальной передаче вируса клещевого энцефалита у клещей. / В кн.: Клещевой энцефалит и вирусные геморрагические лихорадки. Омск. 1963. С. 243-244.

225. Шагов Е.М., Расницын С.П., Уланова Г.И., Демина В.Т. Тест-насекомые при разработке и производстве микробиологических препаратов. / Депонент ОНТИТЭМикробиопром 05.09.83, N 160-деп. С. 1-10.

226. Шварц С. С., Смирнов В. С., Добринский Л. Н. Метод морфофизиологичеких индикаторов в экологии наземных позвоночных. / Тр. Ин-та экол. раст. и живот. УФ АН СССР. 1968, вып. 58, 388 С.

227. Шишляева-Матова З. С. Сравнительное изучение слюнных желез подсемейства Culicidae Самаркандского участка. Сообщ. III. К вопросу о морфологии слюнных желез Anopheles maculipennis, инфицированных спорозоитами малярийных плазмодиев. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1943, т. 12. С. 45-46.

228. Шрейдер Ю.А. Равенство, сходство, порядок. / М. Наука. 1971, 256 С.

229. Штакельберг Н.С. Библиография малярии. / Из-во АН СССР, М.-Л., 1940. 963 с.

230. Шубладзе А. К., Сердюкова Г. В. Клещ Ixodes persulcatus, как переносчик таежного энцефалита. / Архив биол. наук. 1939, т. 56, N 2. С. 121-131.

231. Яблоков А.В. Изменчивость млекопитающих. / М. Наука. 1966. 364 c.

232. Якубович В.Я., Захарова Н.Ф., Чунина Л.М., Ганушкина Л.А. Экспериментальное изучение влияния различных биологически активных веществ на восприимчивость комаров к возбудителю малярии. Сообщение 2. Гербициды и фунгициды. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991. N 1. С. 6-8.

233. Ясюкевич В.В., Расницын С.П. Роль обскребывания субстрата в питании личинок малярийных комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 1. С. 19-22.

234. Ясюкевич В.В., Расницын С.П. Возможность усовершенствования культуры Aedes togoi и некоторые данные по экологии этого вида. / Паразитология. 1991, т. 25, N 5. С. 396-403.

235. Ясюкевич В.В., Расницын С.П. Опыт выращивания личинок Anopheles stephensi Liston. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 5-6. С. 46-48.

236. Ясюкевич В.В., Расницын С.П., Званцов А.Б. Связь между количеством крови, которое выпивают комары, и их заражаемостью возбудителем малярии. / Паразитология. 1990. т. 24, вып. 6. С. 474-479.

237. Ahmadi A., McCleland G. A. M. Mosquito-mediated attraction of female mosquitoes to a host. / Physiol. Entomol. 1985. Vol, 10. N 3. P. 251-255.

238. Akhtar R., Hayea C.G., Baquar S. Dual infections of Culex tritaeniochynchus with West Nile virus and Nosema algere. / J. Parasit. 1981. Vol. 67. р. 571-573.

239. Ambroise-Thomas P. et al. Reappearance of malaria in Corsica. Importans of a sero-epidemiological survey. / Bull. de la Society de Pathologie exotique et de ses filiales. 1972. Vol. 65. P. 533-542.

240. Anderson R.M., May R.M., Gupta S. Non-linea phenomenal in host-parasite interactions. / Parasitology. 1989, v. 99, p. 59-79.

241. Aslamkhan M., Aagil M., Hafeez M. Genetical and morphological variations in a natural populations of the malario mosquito Anopheles stephensi from Karachi, Pakistan. / WHO (VBC) 72.337, WHO (MAL) 72.762.

242. Baqar S., Hayes C. G., Ahmed T. The effect of larval rearing conditions and adult age on the susceptibility of Culex tritaeniorhynchus to infection with West Nile virus. / Mosquito News. 1980. Vol. 40, N 2. P. 165-171.

243. Bargdorfer W., Owen C.R. Experimental studies on Argasid tiks as possible vectors of tularemia. / J. Inf. Dis. 1956, v. 98, p. 16.

244. Beaty B. J., Aitken T. H. J. In vitro transmission of yellow fever virus by geographic strains to Aedes aegypti. / Mosquito News. 1979. Vol. 39, N 2. P. 232-238.

245. Beckett E.B., Townson H. Variability in the flight muscles of field and laboratory strains of the mosquito Aedes aegypti (L.) (Diptera: Culicidae). / Int. J. Insect. Morphol. and Embriol. 1982, v. 11, N 5-6, p. 319-325.

246. Bentley M.O., Day J.F. Chemical ecology and behavioral aspects of mosquito oviposition. / Annul Rev. Entomol. 1989. Vol. 34. P. 401-402.

247. Berry W. J., Rowley W.A., Christensen B. M. Influence of developing Brugia pahangi on spontaneous flight activity of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae). / J. Med. Entomol. 1986. Vol. 23. N 4. P. 441-445.

248. Berry W.J., Rowley W.A., Christensen B.M. Influence of developing Dirofilaria immitis on the spontaneous flight activity of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae). / J. Med. Entonol. 1987. V. 24, N 6, p. 699-701.

249. Berry W.J., Rowley W.A., Christensen B.M. Spontaneous flight activity of Aedes trivittatus infected with Dirofilaria immitis. / J. Parasitol. 1988, v. 74, N 6, p. 970-974.

250. Bishop A., MacConnachie E. W. Further observations on the in vitro development of the gametocytes of the Plasmodium gallenaceum. / Parasitology. 1960. Vol. 50. P. 431-448.

251. Bishop A., Gilchrist B. Experiments upon the feeding of Aedes aegypti through animal membranes with a view to applying this method to the chemotherapy of malaria. / Nature. 1944. Vol. 153. P 713-714.

252. Bishop A., Gilchrist B. A method for collection sporozoites of Plasmodium gallinaceum by feeding infected Aedes aegypti through animal membranes. / Parasitology. 1946. Vol. 37. P. 85-100.

253. Boyd M.F. On strains or rases of the malaria parasites. / Am. j. trop. med., 1940, v. 20, p. 69.

254. Boyd M. F. On the correlation between the incidence of stomach and gland infection in Anopheles quadrimaculatus infected with Plasmodium vivax. / Amer. J. Trop. Med. 1940. Vol. 20. P. 129-131.

255. Boyd M.F., Carr H.P., Roseboom L.F. On the comparative susceptibility of certain species of nearctic and neotropical strains of P. vivax and P. falciparum from the same regions. / Am. J. Trop. Med. 1938, v. 18, p. 157-167.

256. Boyd M.F., Jobbins D.M. Further observation on the comparative susceptibility of nearctic and neotropical Anopheles yo contagious strains of Plasmodium falciparum. / Am. J. Trop. Med. 1940, v. 20, p. 423-435.

257. Boyd M. F., Kitchen S. F. The comparative susceptibility of Anopheles quadrimaculatus, Say and Anopheles punctipennis, Say to Plasmodium vivax, Grassi and Feletti and Plasmodium falciparum Welch. / Amer. J. of tropical medicine. 1936. Vol. 16. P. 67-73.

258. Bredly T.J., Nayar J.K. The effects of infection with Dirofilaria immitis (dog heartworm) on fluid secretion rates in the Malpighian tubes of the mosquitoes Aedes taeniorrhynchus and Anopheles quadrimaculatus. / J. Insect. Physiol. 1984, v. 30, p. 737-742.

259. Brooks G. T. Biochemical targets and insecticide action. / In: Society Chemise. London. 1980. P. 41-45.

260. Bryan J.H., Southgate B.A. Factors affecting transmission of Wuchereria bancrofti by anopheline mosquitoes. 1. Uptake of microfilariae. / Trans Roy. Soc. Trop. Med. and Hyg. 1988, v. 82, N 1, p. 128-137.

261. Carter R., Chen D.H. Malaria transmission blocked by immunization with gamets of the malaria parasite. / Nature. 1976, 263, p. 57-60.

262. Carle P.R., Coz J., Elissa N., Gasquet M., Sannier C., Richard A., Timon-David P. Activate antiplasmodique intravectorielle d'un pyrethrioide: ia deltamethrine. / C. r. Acad. sci. 1986, Ser. 3, v. 303, N 13, p. 565-568.

263. Chen Cheng-chen, Laurence B.R. Selection of a strain of Anopheles quadrimaculatus with high filaria encapsulation rate. / J. Parasitol. 1987, v. 73, N 2, p. 418-419.

264. Christensen B. M. Effect of Dirofilaria immitis on the fecundity of Aedes Trivittatus. / Mosquito News. 1981. Vol. 41. N 1. P. 78-81.

265. Christensen B.M., Hollander A. L. Effect of temperature on vector-parasite relationships of Aedes trivittatus and Dirofilaria immitis. / Proc. helmint. Soc. Wash. 1978. Vol. 45. P. 115-119.

266. Clemens A. N. The physiology of Mosquitoes. London-New Jork-Paris - Oxford Pergamon Press. 1963. 393 P.

267. Coathney G.R. The primate malaria. / Wash., D.S. 4s Government peinity offis, 1971, p. 282-283.

268. Collins W. E. Comparative infectivity of Plasmodium falciparum (Colombia strains) to Anopheles albimanus (Wied.) and Anopheles quagrimaculatus. / Mosquito News, 1962, v. 22, p. 257-259.

269. Collins W. E., Contacos P. G., Stanfill P.S., Richardson B. B. Studies on human malaria in Aotus monkeys. I. Sporozoite transmission of P. vivax from El Salvador. / J. of parasitology. 1973. Vol. 59. P. 606-608.

270. Collins W. E., Contacos P. G., Richardson B. B., Skinner J.C. Development of different strains of Plasmodium vivax in two species of Anopheles. / Amer. J. of tropical medicine and hygiene. 1976. Vol. 25. P. 373-375.

271. Collins W. E., Harrison A. J., Skinner J. C. The use of membrane feeding technique to determine infection and transmission thresholds of Semlike Forest virus in Anopheles quadrimaculatus and Anopheles albimanus. / Mosquito News. 1964. Vol. 24. N 1. P. 25-27.

272. Collins W.E., Jeffery G.M., Burgess R.W. Comparative infectivity of two strains of Plasmodium falciparum to An. quadrimaculatus, Say., An. freeborni Aitken and An. albimanus. / Mosquito News, 1963, v. 23, p. 102-104.

273. Collins W.E., McWilson W., Huong A.Y., Skinner J.C., Sutton B.B., Stanfill P.S. Studies of comparative infectivity of fifteen strains of Plasmodium vivax to laboratory-reread anopheline mosquitoes, with special reference to Anopheles culicifacies. / J. Parasitol. 1986, v. 72, 4, p. 521-524.

274. Collins W.E., McWilson W., Richardson B.B., Skinner J.C., Kearse T.S. Selected pupal phenotypes of Anopheles freeborni and their susceptibility to Plasmodium falciparum and P. vivax. / Mosquito News. 1979, v. 39, N 3, p. 466-472.

275. Collins F.H., Paskewitz S.M., Grews-Oyen A.E. A genetic study of Plasmodium susceptibility in the African malaria vector Anopheles gambiae. / Soc. belge. med. trop. 1991. Vol. 71, Supply N 1, p. 225-232.

276. Collins W. E., Skinner J.C., Warren Mc. W., Richardson B. B. Studies on human malaria in Aotus monkey. 6. Infectivity of Plasmodium malariae to different anofelins. / J. of parasitology. 1975. Vol. 61. P. 941-943.

277. Collins W. E., Skinner J.C., Warren Mc. W., Richardson B. B. Studies of human malaria in Aotus monkeys. 7. Comparative infectivity of two strains of P. vivax to An. freeborni, An. maculatus and four strains of An. albimanus. / J. of parasitology. 1976. Vol. 62. P. 490-494.

278. Curtis C.F. Genetics of insect vectors of diseases. / XV Int. Congr. Genet., New Delhi, Dec. 12-21, 1983. Plenary Symp. Ses. New Delhi e. a.: Oxford and IBH Publ. Co. 1983, p. 43-44.

279. Dabbour A. L., Ahmed Y. M. Effect of DDT on the free aminoacids of Spodoptera littoralis (Boisd) haemolymph. / Meded. Fac. landbouwwetensch Rijksuniv. Gent. 1979. Vol. 44. P. 229-233.

280. Daskova N. G. Zarazyavanie na An. m. atroparvus s vneseni Schamove na tridnevna malaria i tyahnoto epidemiologicno znacenie. / Letopisi na higienno-epidemiologicnata sluzba. 1977. Vol. 4. P. 160-164.

281. Dashkova N.G., Rasnitsyn S.P. (Дашкова Н.Г., Расницын С.П.) Review of Data on Susceptibility of Mosquitos in USSR to imported strains of Malaria Parasites. / Bull. WHO. 1982, v. 60, N 6, p. 893-897.

282. David P.H., Barnwell J.W., Mendis K.N. Vivax malaria. Strategies for vaccine development bases on the hepatic, asexual erythrocytic and sexual stages. / In: Woodrow G.C., Levine M.M. (ed.) New generation vaccines. New York - Basel. 1990, p. 531-544.

283. Davis C.E. Studies on the biology of the argasid tick Ornithodorus nicotei Mocser. / J. Parasitol. 1943, v. 29, p. 393.

284. Distelmans W., Haeselleer F.D., Kaufman L., Rousseeuw P. The susceptibility of Glossina palpalis palpaslis at different aqes in infection with Trypanosoma congolense. / Ann. Soc. Belge med. trop. 1982. Vol. 62, N 1. P. 41-47.

285. Duhrkopf R. E., Trpis M. The degree of susceptibility and levels of infection in ten different strains of Aedes polynesiensis marks infected with subperiodic Brugia malayi and Brugia pahangi. / Amer. J. trop. Med. 1980. Vol. 29, N 5. Pt 1. P. 815-819.

286. Dwadz R.W. Malaria: successful immunization against sexual stages of Plasmodium gallinaceum. / Science. 1976, N 193, p. 1150-1151.

287. Edirisighe J.S., Targett G. A. T., Fern E. B. Dietary suppression of rodent malaria. / Trans. Roy. Soc. Trop. Med. and Hyg. 1981. Vol. 75. P. 183.

288. Edman J.D., Kale H.W. Host behavior: its influence on the feeding success of mosquitoes. / Ann. Entomol. Soc. Amer. 1971, v. 64, N 2, p. 513-516.

289. Ellisa N., Sannier C., Coz J. Etude de la receptivity a Plasmodium yoelii d'Anopheles stephensi soumis au stade adulte a des doses toxiques de differents pyrethrinoides. / Cah. ORSTOM. Entomol. med. et parasitol. 1987, v. 25, N 3-4, p. 187-192.

290. Eskey C.R., Prince F., Fuller F. Transmission of Salmonella enteridis by the rat fleas Xenopsylla cheopes and Honopsylla fasciatus. / Publ. Hlth. Rep. 1949, v. 64, p. 933.

291. Eyles E. Studies on Plasmodium gallinaceum. 1. Characteristics of infection in the mosquito Aedes aegypti. / Am. J. Hyg. 1951. Vol. 54, N 1. P. 101-112.

292. Eyles E. Studies on Plasmodium gallinaceum. IV. A comparison of the susceptibility of Ae. aegypti, Anopheles quadrimaculatus and An. freeborni. / Am. J. Hyg. 1952, v. 54, N 1. P. 71-77.

293. Feldmann A.M., Ponnuduari T. Selection of Anopheles stephensi for refractoriness and susceptibility to Plasmodium falciparum. / Med. and Vet. Entomol. 1989. Vol. 3, N 1. p. 41-52.

294. Freier J.E., Friedman S. Effect of host infection with Plasmodium gallinaceum on the reproductive capacity of Aedes aegypti. / J. Invert. Pathol. 1976. Vol. 28. N 2. P. 161-166.

295. Freier J.E., Friedman S. Effect of Plasmodium gallinaceum on the mortality and body weight of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae). / J. Med. Entomol. 1987, v. 24, N 1, p. 6-10.

296. Friedhoff K. T. Interaction between parasite and vector. / Intern. Parasitol. 1987. Vol. 17, N 4. P. 587-597.

297. Friedhoff K. T. Interaction between parasite and tick vector. / Intern. Parasitol. 1990. Vol. 20, N 4. P. 525-535.

298. Frizzi G., Rinaldi A., Bianchi U. Genetic studies on mechanisms influencing the susceptibility of anopheline mosquitoes to plasmodial infection. / Mosquito News. 1975, v. 35, N 4, p. 505-508.

299. Fujita K. The comparative susceptibility of Anopheles species and stains to Plasmodium yoelii nigeriensis (N67). /Trans. Roy. Soc. Trop. Med. and Hyg. 1986, v. 80, N 5, p. 842.

300. Gaaboub I. A., Busvine J. R. DDT-resistance status and the effect of DDT exposure in relation to vectorial capacity of Aedes aegypti (L) for Brugia pahangi (Buckley and Edeson). / Ann. Trop. Med. Par. 1975. Vol. 69. P. 493-501.

301. Gaaboub I. A., Busvine J. R. Effect of larval treatments with the insect development inhibitor PH-60 : 40 on the vectorial capacity of Aedes aegypti (L) for Brugia pahangi (Buckley and Edeson). / Ann. Trop. Med. Par. 1976. Vol. 70. P. 355-360.

302. Gad A. M., Maier W. A., Piekarski G. Pathology of Anopheles stephensi after infection with Plasmodium berghey berghey. 1. Mortality rate. / Z. Parasitenk. 1979. Vol. 60., N 3. 249-261.

303. Games F. Some general result of a study of induced malaria in England. / Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 1931. Vol. 24. P. 478-534.

304. Garnham P. C. C. The comparative pathogenecity of protozoa in their vertebrate and invertebrate hosts. / Soc. Gen. Microbiol. Mechanism of Microbial Pathogenecity Symp. V.- Cambridge. / In: Mechanisms of microbial pathogenecity. Cambridge Univ. Press. 1955. P. 191-200.

305. Garnham P.C.C. Factors influencing the development of protozoa in their arthropodian hosts. / Symposia of the British Society for Parasitology. 1964, v. 2, p. 33-50.

306. Garnham P.C. Malaria parasites and other Haemosporidia. / Oxford, 1966. 1114 p.

307. Gerberg E. J., Kutz F. W. A large-scale artifical feeding technique for infecting mosquitoes and its application to scrining antimalatial chemicals. / J. med. Entomol. 1971. Vol. 8. P. 610-612.

308. Ghost T.N., Ray H.N. Effect of blood feed on the sporogonous cycle of P. gallinaceum in Aedes aegypti. / Bull. Calcutta Sch. trop. Med. 1957. N 5. P. 27.

309. Ghosh T.N. Behavior of Plasmodium gallinaceum in Aedes aegypti. / 4th Proc. Indian Nat. Sci. Acad. 1980. Vol. 46., N 6. P. 852-854.

310. Golder T. K., Otieno L. H., Patel N.G. Increased sensitivity to endosulfan of Trypanosoma-infected Glossina morsitans. / Ann. trop. Med. Parasit. 1982. Vol. 76. P. 483-484.

311. Gordon A. M. Notes on bionomics of Stegomyia calopus Meigen in Brazil. / Ann. trop. Med. Parasit. 1922. Vol. 16. N 3. P. 425.

312. Graves P.M., Curtis C.F. Susceptibility of Anopheles gambiae to Plasmodium yoelii nigeriensis and Plasmodium falciparum. / Ann. Trop. Med. and Parasitol. 1982, v. 76, N 6, p. 633-639.

313. Gray J. S. The effects of the piroplasm Babesia bigemina on survival and reproduction of the blue tick, Boophilus decoloratus / J. Invert. Pathol. 1982. Vol. 39, N 3. P. 413-415.

314. Gregory R.D., Keymer A.E. The ecology of host-parasite infections. / Sci. Progr. (Gr. Brit.). 1987, v. 73, N 1, p. 67-80.

315. Guttowa A. Homeostaza fiziologiczna organizmu zywicielskiego w ukladach parozyt-zywicie. / Wiad. paraszytol. 1988, v. 34, p. 522-527.

316. Hacker C. S. The differential effect of Plasmodium gallinaceum on the fecundity of several strains of Aedes aegypti. / J. Invert. Patol. 1971. Vol. 18., N 3. 373-374.

317. Hacker C. S., Kilama W. L. The relationship between Plasmodium gallinaceum density and the fecundity of Aedes aegypti. / J. Invert. Patol. 1974. Vol. 23., N 1. P. 101-105.

318. Hamilton D. R., Bradley R. E. Observation on the rarely death experienced by Dirofilaria immitis infected mosquitoes (Diptera: Culicidae). / J. med. Entomol. 1979. Vol. 15. P. 305-306.

319. Ham P.J., Gale C.L. Blood meal enchanted onchocerca development and its correlation with fecundity in laboratory reared blackflies (Diptera, Simuliidae). / Tropenmed. und Parasitol. 1984, v. 35, N 4, p. 212-216.

320. Hardy J.L., Houk E.J., Kramer L.D., Reeves W.C. Intrinsic factors. Affecting vector competence of mosquitoes for arboviruses. / Annu. Rev. Entomol. 1983, v. 28, p. 229-262.

321. Hill N., Roger N., Looker M. The effects of sublethsl contact with permethrin on development of Plasmodium oocists in the vector Anopheles stephensi. / Trans Roy. Soc. Trop. Med. and Hyg. 1989, v. 83, N 3, p. 425-426.

322. Hovanitz W. Physiological factors which influence the infection of Aedes aegypti with Plasmodium gallinaceum. / Amer. J. Hyg. 1947. Vol. 45. P. 67-81.

323. Houk E. J., Obie F., Hardy J. L. Peritrophic membrane formation and the midgut barrier to arboviral infection in the mosquito, Culex tarsal is Coquillett (Insecta, Diptera). / Acta trop., 1979, v. 36, N 1, p. 39-45.

324. Huang J., He G. Влияние Brugia malayi на плодовитость и выживаемость Anopheles sinensis. / Chin. J. Parasit. and Parasitol. Disease. 1988, v. 6, N 2, p. 90-93.

325. Hucker C.S. Differential effect of Plasmodium gallinaceum on the fecundity of several strains of Aedes aegypti /J. invert. Pathol. 1971. Vol. 18. P. 373-377.

326. Hucker C.S., Kilama W.L. The relationship between Plasmodium gallinaceum density and the fecundity of Aedes aegypti. / J. Invert. Pathol. 1974. Vol. 23. N 1. P. 101-105.

327. Huff C.G. The effects of selection upon susceptibility to bird malaria in Culex pipiens Linn. / Ann. Trop. Med. Parasit. 1929, v. 23, p. 427-438.

328. Huff C.G. Comparative studies on susceptible and insusceptible Culex pipiens in relation to infection with Plasmodium cathemerium and P. relictum. / Amer. J. Hygiene. 1934. V. 14. 123-147.

329. Ichimori K. Susceptibility of An. stephensi and other Anopheles strains to Plasmodium yoelii nigiriensis. / Jap. J. Parasitol. 1989, v. 38, N 3, p. 150-151.

330. Jadin J., Vincke I.H., Dunjic A., Delville J.P., Wery M, Bafort J., Scheepers-Biva M. Role des Pseudomonas dans la sporogonie de l'hematozoaire du paludisme ches la moustique. / Bull. Soc. Path. exot. 1966, v. 59, p. 514-525.

331. James S.P. Some general results of a study of induced malaria in England. / Trans. Roy. Soc. trop. Med. Hyg. 1931. Vol. 4. P. 447-538.

332. James S. P., Nicol W.D., Shute P. G. A study of induced malignant tertian malaria. / Proc. Roy. Soc. Med., 1932, v. 25, p. 1153-1169.

333. Jeffery J. M., Burgess R. W., Eyles Don E. Susceptibility of Anopheles quadrimaculatus and A. albimanus to domestic and foreign strains of Plasmodium vivax. / The Amer. J. of Trop. Med. a. Hyg. 1954. Vol. 3, N 5. P. 821-824.

334. Jenny L., Molyneux D. H., Livesey J. L., Galum R. Feeding behavior of the tse-tse flies infected with salivation trypanosoms. / Nature. 1983. N 5745. P. 383-385.

335. Jones R. H., Foster N.M. Heterogeneity of Culicoides varipennis field populations to oral infection with blue tongue virus. / Amer. J. trop. Med. 1978. Vol. 27, N 1. Pt 1. P. 178-183.

336. Juliano S.A. Geographic variation in vulnerability to predation and starvation in the larval treehole mosquitoes. / Oikos. 1989, v. 56, N 1, p. 99-108.

337. Kaay H.J. van der, Laarman J.J., Boorsma E.G., Curtis C.F., Seventer H.A. van. The effect of the introduction of Plasmodium refractory genotypes into a laboratory cage population of Anopheles atroparvus. / Trop. geogr. Med. 1982, v. 34, p. 106.

338. Kaay H.J. van der, Laarman J.J., Curtis C.F., Boorsma E.G., Seventer H.A. van. Susceptibility to Plasmodium berghei in a laboratory population of Anopheles atroparvus (Diptera: Culicidae) after the introdaction of Plasmodium-refractory genotypes. / J. Med. Entomol. 1982, v. 19, N 5, p. 536-540.

339. Karabensch K., Otto D. Wirkung der Isomeren des Hexachlorcyclohexans auf des Nervensystem der Insecten. / Arch. Phytopath. u. Planzenschutz.- 1980.-Bd. 16.- S. 149-152.

340. Kasai N., Williams P. Infectors experimental de Аedes fluviatilis (Lutz, 1904) por Dirofilaria immutis (Leidy, 1856). / Rev. Bras. biol. 1986, v. 46, N 2, p. 277-283.

341. Kasule F.K., Cook L.M. Phenotypic variability and heterozygosity at an esterase locus in the mosquito Aedes aegypti. / Heredity. 1988, v. 61, N 3, p. 427-431.

342. Kay B.H., Fanning I.D., Mottram P. Rearing temperature influences flavivirus vector competence of mosquitoes. / Med. and Vet. Entomol. 1989, v. 3, N 4, p. 415-422.

343. Kay B.H., Fanning I.D., Mottram P. The vector competence of Culex annulirostris, Aedes sagax and Aedes alboannulatus for Murray Valley encephalitus virus at different temperatures. / Med. and Vet. Entomol. 1989, v. 3, N 2, p. 107-112.

344. Kilama Z., Craig G.B.I. Monofactorial inheritance of susceptibility of Plasmodium gallinaceum in Aedes aegypti. / Ann. Trop. Med. and Parasit. 1969, v. 63, N 4, p. 419-432.

345. Kitthawee S., Edman J.D., Sattabongkat J. Evaluation of survival potential and malaria susceptibility among different size classes of laboratory-reared Anopheles dirus. / Am. J. Trop. Hyg. 1990, v. 43, N 4, p. 328-332.

346. Klein T. A., Harrison B. A., Andre R. G. et al. Detrimental effects of Plasmodium cynomolgi on the longevity of Anopheles dirus (Diptera: Culicidae). / Mosquito News. 1982. Vol. 42. P. 265-271.

347. Klowden M. J. Blood intake by Aedes aegypti not regulated by insemination. / J. insect. Physiol. 1979. Vol. 25, N 4. P. 349-351.

348. Korenberg T.I., Kryuchechnikov V.N. The concept of vector in parasitology, ecology of agents, epidemiology and epizootology. / Folia parasitol. 1986, v. 33, N 3, p. 251-264.

349. Kovalevskii Y.V., Korenberg E.I. Differences in Borrelia infections in adult Ixodes persulcatus and Ixodes ricinus ticks (Acari: Ixodidae) in populations of north-western Russia. / Experimental & applied Acarology. 1995, v. 19, p. 19-29.

350. Labuda M., Jones L.D., Williams T., Danielova V., Nuttall P.A. Efficient transmission of tick-borne encephalitis virus between confiding ticks. / J. Med. Entomol. 1993. Vol. 30. N 1. P. 295-299.

351. Lachmajer J., Antonowicz W. Experimental blood feeding of mosquito females of some Anopheles, Aedes and Culex species: taking of blood meal by starving and glucose-fed insects. / Acta parasitol. pol. 1983. Vol. 28, N 25-37. P. 285-304.

352. Lance R.P. Seasonal variation in size of some British Culicoides (Dipt., Ceratopogonidae). / Entomol. Mon. Mag. 1981, v. 117, N 1408-1411, p. 235-240.

353. Leprince D.J., Bigras-Poulin M. Seasonal variation in body size and the relationships among body size, parity and fecundity of host-seeking Tabanus quinquevittatus females (Diptera: Tabanidae). / J. Med. Entomol. 1988, v. 25, N 2, p. 105-110.

354. Lumsden W.H.R., Bertram D.G. Observations of the biology of Plasmodium gallinaceum Brumpt 1835 in the domestic fowls, with special reference to the production of gametocytes and their development in Aedes aegypti (L.). / Ann. trop. med. parasit. 1940, v. 34, N 2, p. 135-160.

355. Mack S. R., Samuels S., Vanderberg J. P. Hemolimph of Anopheles stephensi from noninfected and Plasmodium berghei - infected mosquitoes. 2. Free amino acids. / J. Parasitol. 1979. Vol. 65. P. 130-136.

356. Mack S.R., Saumels S., Vanderberg J.P. Hemolimph of An. stephensi from noninfected and Pl. berghei infected mosquitoes. 3. Carbohydrates. / J. Parasitol. 1979. 65. N 2, 217-221.

357. Macdonald G.M.D. The analysis of the sporozoite rate. / Trop. Dis. Bull. 1952, N 6, p. 569-586.

358. Macdonald Q. The epidemiology and control of malaria. / Oxford Univ. Press. London. 1957. 266 p.

359. Maier W. A. Erkranker Mosquitos on Malaria? / Umschau Wiss. 1975. Bd. 75. S. 88-89.

360. Mayne B. Can the mosquito convey infection from a malaria patient undergoing treatment? Does sporogony affect mosquito life? / U.S. Public. Health Serv. Rep. 1920, v. 35, p. 1664-1669.

361. McBride J.S., Walliker D.M.G. Antigenic diversity in the human malaria parasite Plasmodium falciparum. / Science. 1982, v. 217, N 4556, p. 254-257.

362. McCarthy V.C. Failure of Anopheles stephensi Liston to transmit human plasmodia mechanically. / Mosquito News. 1975, v. 35, N 4, p. 493-494.

363. McDonald I.C., Overland D.E. House fly genetics: variability in a field population. / Annals. Entomol. Soc. Amer. 1974, v. 67, N 3, p. 359-364.

364. McLintock J. Mosquito - virus relationships if American encephalites. / Annu. Rew. Entomol. Vol. 23. Polo Alto, Calif. 1978, p. 17-31.

365. Mellor P. S., Borman J. Multiplication of bluetongue virus in Culicoides nubeculosus (Meigen) simultaneously infected with virus and microfilaria. / Ann. Trop. Med., Parasitol. 1980. Vol. 74, N 4. P. 463-469.

366. Mendis K.N. Malaria transmission blocking immunity induced by natural infections of Plasmodium vivax in humans. / Infection and immunity. 1978, vol. 55, p. 369-372.

367. Metzner H. Pharaonameisen sind Gesundheitsschadlinge. / Prakt. Schardlingsbekampfer. 1988, 40, N 2, 35.

368. Mohan B. N. Sporogoni cycle of malaria parasites in resistent and non-resistent strain of mosquitoes after exposure to DDT. / Indian J. Malar. 1955. Vol. 9. P. 287-296.

369. Mohan B. N. Future observations on sporogoni cycle of Plasmodium relctum in a DDT-resistent strain of Culex fatigans. / Indian J. Malar. 1960. Vol. 14. P. 179-185.

370. Moll-Merks C., Werner H., Donges J. Suitability of in-vitro xenodiagnosis: development of trypanosoma cruzi in Triatoma infestans depending on larval stage of bugs and number of trypomastigotes taken during in-vitro blood meal. / Zbl. Bakteriol. Mikrobiol. und Hyg. 1988, v. A268, N 1, p. 74-82.

371. Moloo S. K. Effects of maintaining Glossina morsitans on different hosts upon the vector's subsequent infection rates with pathogenic trypanosomes. / Acta trop. 1981. Vol. 38., N 2. P.125-136.

372. Moloo S.K., Kutuza S.B. Comparative study on the susceptibility of different Glossina species to Trypanosoma brucei brucei infection. / Trop. Med. and Parasitol. 1988, v. 39, p. 211-213.

373. Molyneux D.H., Jefferies D. Feeding behavior of pathogen-infected vectors. / Parasitology. 1986, 92, N 3, 721-736.

374. Moore J. Altered behavior in cockroaches (Periplaneta americana) infecyed with an archiacanthocephalan, Moniliformis. / J. Parasitol. 1984, v. 69, N 6, p. 1174-1176.

375. Moore J.A., Yong M.D., Hardman N.F., Stabbs T.H. Studies on imported malaria: 2. Ability of California anophelines to transmit malaria of foreign origin and other considerations. / J. Nat. Mal. Soc. 1945, v. 4, p. 307-329.

376. Mutero L.M., Birley M.N. The effect of pre-gravid development in the estimation of mosquito survival rates. / J. Appl. Entomol. 1989. Vol. 107. N 1. P. 96-101.

377. Najera J.A. (Найера). Малярия и работа ВОЗ. / Бюл. ВОЗ. 1989. т. 97, N 3. С. 1-19.

378. Noblet R., Weathersby A. B. Plasmodium gallinaceum: effects of various compounds on immunity of susceptible Aedes aegypti and refractory Culex pipiens. / Exp. Parasit. 1973. Vol. 34. P. 417-425.

379. Nodler S. A., Miller J. H. A redescription of Hematozoon mocassini (Laveran, 1902) n. comb. from Agkistropodon piscivorus leucostoma Troost, 1936. / J. Protozool. 1984. Vol. 31, N 2. P. 321-324.

380. Noireau F., Karch S. Receptive P. yoelli yoelli Anopheles sonmis a Bacillus thuringiensis serotype H-14 et Bacillus sphericus. / ORSTOM. Entomol. med. parasitol. 1983. Vol. 21. N 4. P. 221-224.

381. Nussenzweig R.S. Progress in Malaria Vaccine Development: Characterization of protective antigens. / Scand J. Infect. Dis., Supply. 1982. 36, 40-45.

382. Okolo C. J., Jenni L., Molyneux D., Wallbanks K. R. Surface carbohydrate difference of Glossina salivary glands and infectivity of Trypanosoma brucei gambiense to glossina. / Ann. Soc. belg. med. trop. 1990, v. ?, N 1, p. 39-47.

383. Opiyo E.A., Kinoti G.K., Otieno L.H. Adaptation of the pig parasite Trypanosoma simiae to the laboratory rat. / Ann. Trop. Med. and Parasitol. 1988, v. 82, N 4, p. 397-398.

384. Ouhelli H., Schein E. Effect of temperature on transovarial transmission of Babesia bigemina (Smith and Kilborne, 1983) in Boophilus annulatus (Say, 1821). / Vet. Parasitol. 1988, v. 26, N 3-4, p. 229-235.

385. Paskewitz S. M., Brown M. R., Collins F. H., Lea A. O. Uitrastructurual localization of phenoloxidase in the midgut of refractory Anopheles gambiae and association of the enzyme with encapsulated Plasmodium cynomolgi. / J. Parasitol. 1989, v. 75 N 4, p. 594-600.

386. Patrican L.A., DeFoliart G.R. Lack of adverse effect of transovarially acquired La Crosse virus infection on the reproductive capacity of Aedes triseriatus (Diptera: Culicidae). / J. Med. Entomol. 1985, v. 22, N 6, p. 604-611.

387. Paulson S. L., Grimstad P. R., Craig G. B. Midgut and salivary gland barriers to La Crosse virus dissemination in mosquitoes of the Aedes triseriatus group. / Med. and Vet. Entomol. 1989, v. 3, N 2, p. 113-123.

388. Perlowagora-Szumlewicz A., Muller C.A., de Carvalho M.C.J. Studies in search of suitable experiments insect model for xenodiagnosis of hosts with Chagas disease. 3. On the interaction of vector species and parasite strain in the reaction of bugs to infection by Trypanosoma cruzi. / Rev. saude publ. 1988, v. 22, N 5, p. 390-400.

389. Peters W. The global malaria problem and its military implications. / Rev. int. Serv. sante forces armees. 1988. v. 61, N 10-12, p. 261-266.

390. Philip C.B., Parker R.R. Rocky mountain spotted fever: Investigation of secsual transmission in the wood tick Dermacentor andersoni. / Publ. Health Rep. Washington. 1933, v. 48, N 11, p. 266-272.

391. Ponnudurai T., Lensen A.H.W., Van Gemet G.J.A., Bensink M.P.E., Bolmer M., Meuwissen J.H.E.Th. Infectivity of cultured Plasmodium falciparum gametocytes to mosquitoes. / Parasitology. 1989, v. 98, N 2,p. 165-173.

392. Puri S.K., Kamboj K.K., Dutta G.P. Infectivity studies on Anopheles stephensi using Plasmodium cynomolgi B infection in rhesus monkeys. / Trop. Med. and Parasitol. 1989, v. 40, N 4, p. 409-411.

393. Racioppi J.V., Hagedorn H.H., Calvo J.M. Physiological mechanisms controlling the reproductive cycle of the mosquito Aedes aegypti. / Adv. Invertebrate Reprod. 3. Amsterdam e. a. 1984, p. 259-265.

394. Ragab H. A. Effect of humidities and temperature on the size and number of oocysts of Plasmodium gallinaceum transmitted by mosquito. / Nature. 1949. Vol. 163. P. 643-644.

395. Ragab H. A. A. Effect of Plasmodium on the transmitting mosquito host from the point of view of the longevity of the infected mosquito. / J. Egypt. Med. Assoc. 1958. Vol. 41. P. 447-454.

396. Ranawaka M.B.R. Boosting of transmission blocking immunity during natural Plasmodium vivax infections in man depends upon frequent reinfectuios. / Infection and immunity. 1988, vol. 56, p. 1820-1824.

397. Randolph S. E. The effect of Babesia microti on feeding and survival in its tick vector, Ixodes trianguliceps. / Parasitology. 1991. Vol. 102, N 1. P. 9-16.

398. Rawlings P., Mahmood F., Reisen W. K. Anopheles culicifacies: the effects of adult body weight and trophic status on dieldrin LT-50 determinations. / Mosquito News. 1981. Vol. 41. P. 688-692.

399. Reinhardt R., Ester H. Untersuchungen zur tageszeitlichen Empfindlichkeit einiger Insecten gegen Organe-Phosphor-Insectizide. / Zool. Jahrb. 1971. Vol. 98. P. 511-519.

400. Richey T. J., Rodriguez P. H. The effect of gamma radiation on development of Brugia pahangi in a susceptible strain of Aedes aegypti. / J. Parasit. 1979. Vol. 62. P. 655-656.

401. Rodhain F., Hannoun C. Ecologie dynamique des systems virus-vecteur. / Rev. epidemiol. et sante publique. 1979, v. 27, N 5-6, p. 399-408.

402. Rogers D.J. The dynamics of vector-transmitted diseases in human communities. / Phil. Trans. Roy. Soc. London. B. 1988. Vol. 321, N 1207. P. 513-539.

403. Rosenberg R., Koonz L.C. Plasmodium gallinaceum: density dependent limits on infectivity to Aedes aegypti. / Exp. Parasitol. 1984, v. 57, N)3, p. 234-238.

404. Rosen L. Carbon dioxide sensitivity in mosquitoes infected with Sigma, vesicular stomstitis, and other rhabdoviruses. / Science. 1980. Vol. 207. P. 989-991.

405. Rosenberg R. Koontz L.C., Alston K., Friedman F.K. Plasmodium gallinaceum: erythrocyte factor essential for zygote infection of Aedes aegypti. / Exp. Parasitol. 1984, v. 57, N 2, p. 158-164.

406. Ross R. Possible effect of malaria on the anophelines. / In: The prevention of Malaria. London. 1910. 669 P.

407. Rossignol P.A., Riberio J.M., Jungery M., Turell M.J., Spielman A., Bailey C.L. Enchanted mosquito blood-finding success on parasitemic hosts: Evidence for vector-parasite mutualism. / Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1985, v. 82, N 22, p. 7725-7727.

408. Rossignol P. A., Ribeiro J. M. C., Spielman A. Increased intradermal probing time in sporozoite-infected mosquitoes. / Amer. J. Trop. Med. Hyg. 1984. Vol. 33, N 1 P. 17-20.

409. Rowland M., Boersma E. Changes in the spontaneous flight activity of the mosquito Anopheles stephensi by parasitization with the rodent malaria Plasmodium yoelii. / Parasitology. 1988. Vol. 97, N 2. P. 221-227.

410. Roychowdhury S. P., Kanoujia K. H., Babu C. S. Effect of development of filarial parasite on certain chemical constituents of Malpighian tubes and haemolimph of mosquitoes. / J. Commun. Dis. 1979. Vol. 11. N 2, P. 66-70.

411. Rozeboom L.E. The effect of the gonadotropic hormone cycle of the adult mosquito on development of the malaria parasite. / J. Parasitol. 1961. Vol. 47. N 4. P. 597-599.

412. Rozeboom L.E., Behin R., Kassira E.N. Dual infections of Aedes aegypti L. with Plasmodium gallinaceum Brumpt and West Nile virus. / J. Parasitol. 1966, v. 52, N3, p. 579-582.

413. Ruhm W., Sander H. Die Trennung der praimaginalen Stadien der seisondimorphen Boophthora erythrocephala (Diptera, Simuliidae) anhand morphologischer Merkmale. / Z. angew. Zool. 1975, v. 62, N 2, p. 143-175.

414. Russel P. F., Mohan B. N. Some mosquito hosts to avian Plasmodia with special reference to Plasmodium gallinaceum. / J. Parasitol. 1942. Vol. 28, N 2. P. 127-129.

415. Rutlage L. C., Ward R. A., Gould D. Studies on the feeding response of mosquitoes to nutritive solution in a new membrane feeder. / Mosquito News. 1964. Vol. 24. P. 407-419.

416. Samaranayaka-Ramasamy M. Insecticide-induced release of neurosecretory hormons. / Pestic. and Venom Neurotoxic. 15 Int. Congr. Entomol.,Washington, D. C., 1976.

417. Schiefer B. A., Ward R. A., Eldrigde B. F. Plasmodium cynomolgi: effects of malaria infection on laboratory flight performance of Anopheles stephensi mosquitoes. / Exp. Parasitol. 1977. Vol. 41. P. 397-404.

418. Schultz M. G. Imported malaria. / Bull. World Health Organization. 1974. Vol. 50. P. 329-336

419. Scott M.E., Dobson A. The role of parasites in regulating host abundance. / Parasitol. Today. 1989, v. 5, N 6, p. 176-183.

420. Seitz H.M., Maier W.A., Rottok M., Becker-Feldmann H. Concomitant infections of Anopheles stephensi with Plasmodium berghei and serratia marcesscens: additive detrimental effects. / Zbl. Bactoriol., Microbiol. und Hyg. 1987, b. a 266, N 1-2, p. 155-166.

421. Sharma M.I.P. Strategy of malaria control at cross road with particular reference to India. / J. Commun. Diseases. 1988. v. 20, N 2. p. 93-103.

422. Sharma V. P., Das M., Bendle M. S. Comparative susceptibility of sterilized and geneticallydefined strains of Aedes aegypti to Dirofilaria repens. / J. Commun Dis. 1981. Vol. 13. N 1, P. 17-25.

423. Shetty N.J., Yong M.D., Narang S.K., Seawright J.A. Genetic selection of a Plasmodium joelii - refractory strain of the malaria vector Anopheles quadrimaculatus (Say). / Genetics. 1987, v. 116, N 1, Pt2, Suppl.

424. Shipp E., Otton J. Circadian rhythms of sensitivity to insecticides in Musca domestica (Diptera, Muscidae). / Entomol. exp. et Appl. 1976. Vol. 19. P. 163-171.

425. Short J.E. An introduction to Pharaon's ants as pests. / Confect. Manuf. and Market. 1988. Vol. 25, N 9. P. 6-8.

426. Shute P. G. Failure to infect English specimen of An. maculipennis, var. atroparvus with certain strain of P. falciparum of tropical origin. / J. trop. Med. Hyg. 1940. Vol. 43. P. 175-178.

427. Shute P. G., Maryon M. E. A study of a strain of P. falciparum indigenous to the Belgien Congo. / Ann. Soc. Belge Med. trop. 1947. Vol. 279. P. 391-410.

428. Shute P.G., Maryon M. Studies in transmission of P. malariae by Anopheles mosquitoes. / Parasitology. 1951. Vol. 41. P. 292-300.

429. Shute P. G., Maryon M. E. A contribution of the problem of strains of human plasmodium. / Rev. Malariol. 1954, v. 33, p. 1-21.

430. Sinden R. E. The biology of Plasmodium in the mosquito. / Experientia. 1984. Vol. 40. N 12, P. 1330-1343.

431. Sinden R.E., Pudney M., Marsh K. The British Society for Parasitology malaria meeting. / Parasitol. Today. 1989, v. 5, N 8, p.232-234.

432. Sinton I.A., Shute P.C. A report on the longevity of mosquitoes in relation to the transmission of malaria in nature. / Rept. Pub. Hlth. Med. Subjects (London) Rept. 1938, 85, 1-45.

433. Sluiters J.F., Visser P.E., van der Kaay H.J. The establishment of Plasmodium berhei in mosquitoes of a refractory and a susceptible line of Anopheles atroparvus. / Z. Parasitenk. 1986. 72. N 3, 313-322.

434. Sneller V. P., Dadd R. H. Brugia pahangi: growth improvement with lecithin in the diet of axenically reared hosts, Aedes aegypti. / Exp. Parasitol. 1981. Vol. 51. P. 335-340.

435. Sollers-Riedel H. Literature references to mosquitoes and mosquito-borne diseases. 1978. Part IV. / Mosquito News. 1978. V. 38. N 4. P. 608.

436. Srivastava H. C., Verma G. S. Effect of insecticides on transaminase enzymes in mosquito larvae (Culex fatigans). / Z. angew. Zool. 1980. Vol. 67. P. 233-238.

437. Steward G. L., Soifer F. K., Steward J. B. The effects of various carbohydrate diets on Aedes aegypti infected with Dirofilaria immitis. / J. Invert. Path. 1979. Vol. 33. P. 75-80.

438. Stochler H. Analyze des infectionsverlaufes von Plasmodium gallinaceum in darme von Aedes aegypti. / Acta Tropica. 1967, v. 14, p. 303-326.

439. Sutherland D. R., Christensen B. M., Forton K. F. Defense reactions of mosquitoes to filarial worms: role of the microfilarial sheath in the response of mosquitoes to inoculated Brugia pahangi microfilariae. / J. Invertebr. Pathol., 1984, v. 44, N 3, p. 275-281.

440. Tadei W.P. Diferencas cromossomicans entre especies e populacoes de Anopheles. / Acta amazon. 1980, V. 10, N 2, P. 369-377.

441. Takahashi M. The effect of environmental and physiological conditions of Culex tritaeniorhynchus on the pattern of transmission of Japanese encephalitis virus. / J. Med. Entompl. 1976. Vol. 13. P. 275-284.

442. Teodorescu C. Essais d'infection experimentale d'une souche de Anopheles atroparvus indigene aux speces de Plasmodium d'impotantion. / Arch. roum. pathol. exp. et microbiol. 1983, v. 42, N 4, p. 365-370.

443. Terzian L.A., Stahler N. Some inorganic acids, bases and sales as determinants of innable immunity in the mosquito. / J. Infect. Dis. 1960, v. 106, p. 45-52.

444. Terzian L.A., Stahler N., Dawkins A.T. The sporogonous cycle of P. vivax in Anopheles mosquitoes as a system for evaluating the prophilactic and curative capabilities of potential antimalarial compounds. / Exp. Parasit. 1968, v. 23, p. 56-66.

445. Terzian L.A., Stachler N., Grreverre F. The effects of ageing in the modification of these effects on the immunity of mosquitoes to malarial infection. / J. Immunol. 1956. Vol. 76. P. 308-313.

446. Thompson A., Limbery A. Parasites keep the upper hand. / New Sci. 1988, V. 120, N 1636, P. 48-51.

447. Thompson P. E., Huff C. G. Saurian malarial parasites of the United States and Mexico. / J. Inf. Dis. 1944. Vol. 74. P. 68.

448. Thompson W.H., Beaty B.J. Veneral transmission of La Crosse virus from male to female Aedes triseriatus. / Amer. J. Trop. Med., Hyg. 1978, v. 27, N,1, p. 187-196.

449. Tolezano J.E., Fatima L.A.M., Scalon R.S., Imenes I.M.M. Efeitos do jejum e da temperatura em laboratorio na infectividade de triatomineos pro Trypanosomacruzi. / Rev. Inst. A. Lutz. 1983, v. 43, N 1-2, p. 25-32.

450. Travi B.L., Lowrie R.C., Eberhafd M.L., Orihel T.C. The effect of repeated blood meals on the larval development of Dirofilaria corynides in the fat body of Aedes aegypti. / Trop. Med. and Parasitol. 1986, v. 37, 3, p. 258-262.

451. Trimble R.M., Wellington W. G. Colonization of North American Aedes togoi. / Mosquito News. 1979. Vol. 39, N 1. P. 18-20.

452. Turell M.J., Gargan T.P., Bailey C.L. Culex pipiens (Diptera: Culicidae) morbidity and mortality associated with Rift Valley Fever virus infections. / J. Med. Entomol. 1985. Vol. 22. N 3. P. 332-337.

453. Turell M.J., Rossignol P.A., Spielman A., Rossi C.A., Baily C.L. Enchanted arboviral transmission by mosquitoes that concurrently ingested microfilariae. / Scince. 1984, v. 225, N 4666, p. 1039-1041.

454. Vandehey R.C., Boot K.S., Leahy S.M.G. Genetics of Aedes aegypti Oviposition. / Annal. Entomol. Soc. Amer. 1979, v. 72, N 4, p. 509-513.

455. Vandenberg J., Yoeli M. Some physiological and metabolic problems related to maintenance of the Plasmodium berghei cycle in Anopheles quadrimaculatus. / Ann. Soc. Belge. Med. Trop. 1965, v. 45, p. 419-423.

456. Vargas L.G., Zeledon R. Effects of fasting on Trypanosoma cruzi infection in Triatoma dimidiata (Hemiptera: Reduviidae). / J. Med. Entomol. 1985, v. 22, N 6, p. 683.

457. Vincke I.H. The potential vectors of Plasmodium chabandi and P. berghy yoelii. / Ann. Trop. Med. and Parasitol. 1967, v. 61, N 2, p. 154-155.

458. Wagner-Jevseenko O. Fortpflanzung bei Ornithodorus moubata und genitale Ubertragung von Borrelia duttoni. / Acta Tropica. 1958, v. 31, N 2, p. 382-388.

459. Walker A. R., Fletcher J. D. Age grades and infection rates of Rhipicephalus appendiculatus Neumann (Acari: Ixodidae) to assess theilerosis challenge in the field. / Bull. Entomol. Res. 1985. Vol. 75. P. 653-660.

460. Ward R. A. Genetic aspects of the susceptibility of mosquitoes to malaria infection. / Exp. Parasit. 1963. Vol. 13, N 3. P. 328-341.

461. Weathersby A.B. The role of stomach wall in the exogenous development of Plasmodium gallinaceum as studied by means of haemocoll infections of susceptible snd refractory mosquitoes. / J. Infect. Dis. 1952, v. 91, N 2, p. 198-205.

462. Wearthersby A. B. Colonization of six species of mosquito in Japan. / Mosquito News. 1962. Vol. 22, N 1. P. 31-34.

463. Weathersby A.B. Parabiotic twinning of mosquitoes. / Mosquito News. 1965, v. 25, N,1, p. 44-45.

464. Weathersby A.B. Plasmodium gallinaceum: sporozoite activity in immune mosquito hemolymph. / Exp. Parasitol. 1985, v. 59, N 2, 192-196.

465. Weathersby A.B., McCall J.W. The development of P. gallinaceum Brumpt in the haemocels of refractory Culex p. pipiens (Linn.) and susceptible Ae. aegypti (Linn.). / J. Paras. 1968, v. 54, p. 1017-1022.

466. Weathersby A.B., McCall J.W., Ah H-S., Nelms M.W. C. p. pipiens and Ae. aegypti in whole body extracts and development of P. gallinaceum in Ae. aegypti. / Exp. Par. 1971, v. 29, p. 42-46.

467. Weathersby A. B., McCroddan D. The effects of parabiotic twinning of susceptible snd refractory mosquitoes on the development of Plasmodium gallinaceum. / J. Parasitol. 1982, v. 68, N 6, p. 1081-1084.

468. Weathersby A. B., Noblet R. Plasmodium gallinaceum: Development in Aedes aegypti maintained on various carbogydrate diets. / Experiment. Parasitology. 1973. Vol. 34, N 3. P. 426-431.

469. Webber R.A., Rau M.E., Lewis D.J. The effects of P. lagiorchis noblei (Trematoda: Plaglorchiidae) metacercariae on the susceptibility of Aedes aegypti larvae to predation by guppies (Poecilia reticulata) and meadow voles (Microtus pennsylvanicus). / Can. J. Zool. 1987, v. 65, N 10, p. 2346-2348.

470. Weismann P., Labuda M., Kozuch O. Interference between the viruses of tick borne encephalitis complex in the Ixodes ricinus ticks. / Wiadom. Parazitol. 1991. T. 37, N 1. P. 41-43.

471. Worms M.J. Circadian and seasonal rhythms in blood parasites. / In Canning E.U., Wright C.A. (ed.) Behavior aspects of parasite transmission. Zool. J. Linn. Soc. 1972, v. 51, sup., 1, p. 53-67.

472. Yano K., Kozlowska A., Maramorosch K. An improved method for membrane feeding f malaria parasites. / Jap. J. Parasitol. 1990, v. 39, N 1, p. 59-62.

473. Yoeli M. Note on the experimental infection if Anopheles elutus with Plasmodium falciparum by feeding through a preparated animal membrane. / Rev. Malariol. 1938. Vol. 17. P. 62-66.

474. Yoeli M. Studies of Plasmodium berghei in nature and under experimental conditions. / Trans. Roy. Soc. trop. Med. Hyg. 1965. Vol. 59. P. 255-276.

475. Young M.D., Burgess R.W. Studies on imported malarias: 9. Comparative susceptibility of Anopheles quadrimaculatus and Anopheles freeborni to foreign vivax malaria. / J. Nat. Mal. Soc. 1948, v. 7, p. 134.

476. Young M.D., Ellis J.M., Stabbins T.H., Studies on imported malarias: 5. Transmission of foreign Plasmodium vivax by Anopheles quadrimaculatus. / Am. J. Trop. Med. 1946a. v. 26, p. 477-482.

477. Young M.D., Stabbins T.H., Ellis J.M., Bufgess R.W., Eyles D.E. Studies on imported malarias: 4. The infectivity of malaria of foreign origin to anopheles of the Sutern United States. / Am. J. Hyg. 1946, v. 43, p. 326-341.

478. Young M.D., Stabbins T.H., Moore J.A., Ehrman F.C., Hardman N.F., Ellis J.M., Bufgess R.W. Studies on imported malarias: 1. Ability of domestic mosquitoes to transmit vivax malaria of foreign origin. / J. Nat. Mal. Soc. 1945, v. 4, p. 127-131.

479. Young M.D. et all. The effect of B. sphaericus upon the susceptibility of An. quadrimaculatus to P. berghei. / J. Am. Mosq. Contr. Assoc. 1990, v. 6, N 1, p. 139-140.

480. Zoyza de A.P.K., Mendis C., Gamage-Mendis A.C., Weerasinghe S., Herath P.R.G., Mendis K.N. Математическая модель передачи трехдневной малярии: оценка влияния блокирующего передачу иммунитета в эпидемичном районе. / Бюлл. ВОЗ. 1991, т. 69, N 6. С. 61-68.

481. Zulueta de J. Malaria eradication in Europe: the achievement and the difficulties ahead. / J. of tropical medicine and hygiene. 1973. Vol. 76. P. 279-282.

482. Zulueta de J. et al. Receptivity to malaria in Europe. / Bull. of the World Health Organization. 1976. Vol. 52. P. 109-111.

Список публикаций автора по теме диссертации.

Расницын С.П. Изучение активности слепней при помощи чучелообразных ловушек. Зоол. ж. 1963, т. 42, N 6, c. 951-953.

Расницын С.П. Макарова С.И. Шевелева Г.А. Распределение мошек (Diptera, Simuliidae) в ручьях Приангарья. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1966, т. 35, N 1, с. 3-7.

Расницын С.П. Методы сбора и учета кровососущих двукрылых. Руководство по медицинской энтомологии. М. "Медицина". 1974, С. 163-175.

Расницын С.П., Алексеев А.Н., Горностаева Р.М., Куприянова Е.С., Потапов А.А., Разумова О.В. Отрицательные результаты испытания образцов звуковых генераторов, предназначенных для отпугивания комаров. Мед. паразитол. 1974, Т. 39, N 6, С. 106-109.

Расницын С.П. Оценка значения трансфазовой и трансовариальной передачи для сохранения популяции возбудителя. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1976, т. 41 N 3, с. 269-273.

Алексеев А.Н. Расницын С.П. Витлин Л.М. О групповом поведении самок кровососущих комаров (Diptera, Culicidae, Aedes). Сообщ. 1. Обнаружение "Эффекта приглашения." Мед. паразитол. 1977, Т. 42, N 1, С. 23-24.

Бибикова В.А., Дашкова Н.Г., Расницын С.П., Сулейманов

Г.Д., Тибурская Н.А. Передача комарами Anopheles maculipennis atroparvus бразильского штамма трехдневной малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3, с. 63-67.

Дашкова Н.Г. Расницын С.П. Сравнение заражаемости комаров возбудителями малярии при кровососании на человеке и через биомембранну. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3, с. 88-91.

Детинова Т.С. Расницын С.П. Маркович Н.Я. Куприянова

Е.С. Аксенова А.С. Ануфриева В.Н. Бандин А.И. Жаров А.Н. Унификация методов учета численности кровососущих двукрылых насекомых. Мед. паразитол. 1978, Т. 47, N 5, С. 84-92.

Расницын С.П. Некоторые критерии оценки методов количественного учета животных. Зоол. ж. 1978, т. 57, N 1, С. 124-131.

Расницын С.П., Алексеев А.Н., Витлин Л.М. Групповое поведение самок кровососущих комаров. "Доклады МОИП. Зоол. и ботаника. 1-е полугодие 1975 г." М., Из-во МГУ. 1978, С. 11-12.

Супряга В.А. Дашкова Н.Г. Расницын С.П. Сравнение некоторых способов искуственного кормления кровью трех видов комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3, с. 111-112.

Расницын С.П., Бикунова А.Н. Результаты сравнения некоторых методов оценки нападения мошек на человека. Мед. паразитол. 1979, т. 48, N 4, с. 56-62.

Расницын С.П. Демина В.Т. Способ культивирования личинок малярийных комаров. Авт. свид. СССР N 660638. 1979г.

Расницын С.П., Косовских В.Л. Усовершенствованный метод учета обилия комаров сачком вокруг человека и сравнение его с учетом темным колоколом. Мед. паразитол. 1979, N 1,

С.18-24.

Расницын С.П. Вероятные причины эффективности звуковых генераторов, предназначенных для отпугивания комаров. "Докл. МОИП. Зоол. и ботаника. 2-е полугодие 1977 г." М. Из-во МГУ. 1980, с. 12-13.

Расницын С.П. Питательная среда для выращивания личинок желтолихорадочного комара Aedes aegypti. Авт. свид. СССР N 790389. 1980 г.

Расницын С.П. Задачи и возможности классификационных систем. В сб. "Теория классификации и анализ данных". Ч. 1. Новосибирск, Изд-во ВЦ СО АН СССР. 1981, с. 25-26.

Кисленко Г.С. Чунихин С.П. Расницын С.П. Курунков В.Б. Изотов В.К. Изучение репродукции вирусов Повассан и Западный Нил в комарах Aedes aegypti и в культуре их клеток. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1982, N 3, с. 13-15.

Расницын С. П. Алгоритмы для расчета размещения культур насекомых. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1982, N 3, с. 37-42.

Расницын С.П. Стратегия массового культивирования насекомых. "Докл. МОИП. Зоол. и ботаника. 1980 г." М. Из-во МГУ. 1982, с. 35-37.

Расницын С.П. Волкова Л.Б. Анализ эффекта группы на примере личинок комаров Aedes aegypti (Diptera, Culicidae). Экология. 1982, N 4, с. 73-77.

Dashkova N.G. Rasnitsyn S.P. (Дашкова Н.Г., Расницын С.П.) Review of Data on Susceptibility of Mosquitos in USSR to imported strains of Malaria Parasites. Bull. WHO. 1982, v. 60, N 6, p. 893-897.

Абдуллаев И. Т., Алексеев А. Н., Расницын С. П. Первый опыт использования "летательной мельницы" для сравнительного изучения летных способностей комаров Anopheles pulcherrimus Theobald (Diptera, Culicidae). / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983, N 1, с. 11-15.

Алексеев А.Н. Соколова Э.И. Расницын С.П. Ганушкина

Л.А. Бикунова А.Н. Влияние плотности личинок комаров Aedes aegypti на их гибель под действием препаратов Bacillus thuringiensis Berl. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983, N 1, с. 78-80.

Расницын С.П. Демина В.Т. Среда для выращивания личинок малярийного комара Anopheles sacharovi. Авт. свид. СССР N 1081781. 1983г.

Расницын С.П., Косовских В.Л. Влияние продолжительности экспозиции на число кровососущих двукрылых (Diptera), выловленных темным колоколом. Мед. паразитол. 1983, N 6, С. 69-72.

Расницын С.П. Шагов Е.М. Демина В.Т. Возможность использования массы куколок как показателя состояния особей у комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983, N 4, с. 42-45.

Шагов Е.М. Расницын С.П. Уланова Г.И. Демина В.Т. Тест-насекомые при разработке и производстве микробиологических препаратов. Депонент ОНТИТЭМикробиопром 05.09.83, N 160-деп. с. 1-10.

Алексеев А.Н. Абдуллаев И.Т. Расницын С.П. Сравнение способности к полету зараженных и незараженных плазмодиями Aedes aegypti. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 1, с. 11-13.

Жарова А.Н. Расницын С.П. Сохранение возбудителя малярии в комарах, получивших сублетальные дозы инсектицида. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 5, с. 82-84.

Жарова А.Н. Расницын С.П. Дашкова Н.Г. Плодовитость комаров Aedes aegypti в связи с их зараженностью возбудителем малярии Plasmodium gallinaceum. / Паразитология. 1984. т. 18, вып. 6. с. 469-472.

Расницын С.П. Жарова А.Н. Отсутствие влияния повторного кровососания комаров на их зараженность возбудителем малярии. Паразитология. 1984, т. 18, N 2, с. 179-181.

Расницын С.П. Захарова Н.Ф. Демина В.Т. Изменение осемененности самок Anopheles sacharovi Favre в зависимости от условий содержания. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 1, с. 6-10.

Демина В.Т. Шагов Е.М. Расницын С.П. Оптимизация плотности содержания личинок Anopheles sacharovi Favre (Diptera, Culicidae) в культурах. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 4, с. 56-58.

Захарова Н.Ф. Расницын С.П. Половая активность Anopheles sacharovi Favre в лабораторных условиях. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 4, с. 58-64.

Расницын С.П. Влияние концентрации и численности личинок Anopheles stephensi на их смертность под действием Bacillus thuringiensis. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 3, с. 31-35.

Расницын С.П. Массовое культивирование Anopheles sacharovi Favre. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985. Вып. 6. с. 54-56.

Расницын С.П. Жарова А.Н. Влияние контакта комаров с ДДТ на их восприимчивость к возбудителю малярии. Паразитология. 1985, т. 19, N 4, с. 287-289.

Расницын С.П. Жарова А.Н. Чувствительность к ДДТ комаров Aedes aegypti, зараженных возбудителем малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 1, с. 15-17.

Расницын С.П. Анализ применимости показателей, характеризующих размеры, вес и плодовитость комаров в качестве морфофизиологических индикаторов. Паразитология. 1986, т. 20, N 2, с. 106-111.

Расницын С.П. Влияние возбудителей малярии на векторные способности Anopheles. "Малярийные паразиты млекопитающих". Паразитология, вып 11, Л. "Наука". 1986, с. 162-167. 152.

Расницын С.П. Проблемы культивирования переносчиков болезней человека и животных. В сб. "1-е Всесоюзн. совещание по проблемам зоокультуры" ч. 3., М. 1986, с. 245-247.

Расницын С.П., Войцик А.А., Евсеева В.Е. Влияние концентрации и численности личинок комаров (Diptera, Culicidae) на результаты токсикологических испытаний бактериальных инсектицидов. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1986, N 1, с. 13-15.

Алексеев А.Н. Расницын С.П. Всегда ли необходимы сахара для заражения комаров плазмодиями малярии? / Паразитология.

1987. т. 21, вып. 2. с. 97-100.

Расницын С.П., Войцик А.А., Званцов А.Б. Влияние условий развития личинок комаров на их чувстивительность к бактериальным инсектицидам. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1988, N 1, с. 15-18.

Расницын С.П. Ясюкевич В.В. О способности личинок комаров (Diptera, Culicidae) переносить голодание. / Энтомол. обозр. 1988, т 67, N 4, с. 708-715.

Званцов А.Б. Ясюкевич В.В. Расницын С.П. Влияние условий развития комаров Aedes aegypti L. на их заражаемость Plasmodium gallinaceum Brumpt. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 6, с. 68-71.

Расницын С.П. Званцов А.Б. Войцик А.А. Ясюкевич В.В. Создание лабораторной колонии комаров Anopheles pulcherrimus. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 3, с. 88.

Расницын С.П. Ясюкевич В.В. Связь способов питания личинок малярийных комаров с их строением и поведением. Зоол. ж. 1989а, т. 68, N 7, 155-158.

Расницын С.П. Ясюкевич В.В. Способ выращивания личинок малярийных комаров. Авт. свид. СССР N 1488983. 1989б.

Ясюкевич В.В., Расницын С.П. Роль обскребывания субстрата в питании личинок малярийных комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 1, с. 19-22.

Расницын С.П. Ясюкевич В.В. Званцов А.Б. Особенности восприимчивости Aedes togoi к Plasmodium gallinaceum. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1990, N 6, с. 24-26.

Расницын С.П. Ясюкевич В.В. Званцов А.Б. Артемьев М.М. Воссоздание лабораторной колонии Anopheles superpictus. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1990, N 1, с. 7-9.

Ясюкевич В.В. Расницын С.П. Званцов А.Б. Связь между количеством крови, которое выпивают комары, и их заражаемостью возбудителем малярии. / Паразитология. 1990. т. 24, вып. 6. с. 474-479.

Войцик А.А. Расницын С.П. Влияние экспозиции и корма на результаты тестирования бактериальных инсектицидов на личинках комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991, N 1, с. 21-23.

Расницын С.П. Войцик А.А. Ясюкевич В.В. Сравнение нескольких видов малярийных комаров по реакции на бактериальные инсектициды. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991, N 4, C. 6-9.

Расницын С.П. Званцов А.Б. Ясюкевич В.В. Возможность использования массы куколок и имаго Aedes aegypti для определения количества поглащаемой ими крови. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991, N 1, с. 16-20.

Расницын С.П. Званцов А.Б. Ясюкевич В.В. Новые модели циркуляции возбудителя малярии Plasmodium gallinaceum с использованием малярийных комаров фауны СССР. / Паразитология. 1991. т. 25, вып. 3. с. 196-202.

Расницын С.П. Званцов А.Б. Ясюкевич В.В. Экспериментальная модель циркуляции возбудителя малярии. Авт. свид. СССР N 1681331, 1991.

Ясюкевич В.В. Расницын С.П. Возможность усовершенствования культуры Aedes togoi и некоторые данные по экологии этого вида. Паразитология. 1991, т. 25, N 5, с. 396-403.

Расницын С.П., Войцик А.А., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Оценка совместного действия двух видов энтомопатогенных бактерий на личинок комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 5-6, с. 44-45.

Расницын С.П., Ясюкевич В.В. Войцик А.А. Связь между способом питания личинок малярийных комаров и их устойчивостью к бактериальным инсектицидам. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 3, с. 28-30.

Расницын С.П. Ясюкевич В.В. Званцов А.Б. Сорокин Н.Н. Степнов А.П. Создание лабораторной культуры комаров Anopheles martinius Schingarev, 1926. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 1, с. 17-18.

Ясюкевич В.В., Расницын С.П. Опыт выращивания личинок Anopheles stephensi Liston. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 5-6, с. 46-48.

Расницын С.П. Новый вариант использования генетики для ограничения переноса возбедителей болезней комарами. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993, т. 27, N 5, с. 44-47.

Расницын С.П., Войцик А.А. Скидан К.Б. Применимость бактериальных препаратов, предназначенных для борьбы с комарами, в соленой воде. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993. N 3, C. 33 - 34.

Расницын С.П., Войцик А.А. Ясюкевич В.В. Влияние температуры на действие бактериальных препаратов на личинок комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993, N 1, с. 8-10.

Расницын С.П., Званцов А.Б. Ясюкевич В.В. Влияние состояния репродуктивной системы самок комаров на их заражаемость возбудителем малярии. Паразитология. 1993, т. 27, N 4, с. 280 - 288.

Расницын С.П., Войцик А.А. Ясюкевич В.В. Лебедева Н.Н. Федин В.В. Оценка стабильности метода тестирования инсектицидной активности бактериальных препаратов в отношении личинок комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1995. N 2, с. 4-7.

Расницын С.П. Концепция медицинской энтомологии: Определение влияния членистоногих на здоровье людей. Изв. АН России. Сер. биологическая. 1996, N 4, с. 437-445.

Расницын С.П., Лебедева Н.Н. Привлечение самок городского комара для откладки яиц. Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. 1996, N 1, С. 29 - 33.

Расницын С.П., Лебедева Н.Н., Давыдов Б.В. Опыт использования ловушек для сбора яйцекладок городского комара (Culex pipiens). Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. 1996, N 4, с. 22-25.

Расницын С.П. Концепция медицинской энтомологии: Управление влиянием членистоногих на здоровье людей. Изв. АН России. Сер. биологическая. 1997, N 2, с. 196-203.

автореферат 970705 (преобразован в doc 090102)

ИНСТИТУТ МЕДИЦИНСКОЙ ПАРАЗИТОЛОГИИ И ТРОПИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ ИМ. Е.И.МАРЦИНОВСКОГО

_______________________________________________________________

На правах рукописи

РАСНИЦЫН

Сергей Павлович

ВЗАИМООТНОШЕНИЯ ПЕРЕНОСЧИКОВ И ВОЗБУДИТЕЛЕЙ МАЛЯРИИ

Специальность: 03.00.09 - Энтомология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

МОСКВА - 1997

Работа выполнена в Институте медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Э.И.Корнеберг;

доктор биологических наук, профессор В.В.Тарасов;

доктор биологических наук, профессор В.П.Дремова.

Ведущая организация: кафедра энтомологии Московского государственного университета.

Защита состоится " "__________ 1997 г. в _____ часов на заседании Специального совета Д.176.02.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук при Институте медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского по адресу Москва, М.Пироговская, 20.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского

Автореферат разослан " " 1997 г.

Ученый секретарь Специализированного совета,

кандидат медицинских наук А.А.Фролова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В практическом плане изучение отношений переносчиков и возбудителей малярии актуально по двум причинам. Во-первых, оно позволяет определять, в каких случаях комары могут распространять необычные для них виды и штаммы плазмодиев. Поскольку ликвидировать малярию в мире не удалось (Sharma, 1988; Peters, 1988; Najera, 1989), сохраняется опасность ее завоза на освобожденные территории, в частности, в нашу страну (Сергиев и др., 1966; Немировская, 1969; Чагин и др., 1975; Дашкова и др., 1978; Орлов, 1987; Духанина, Баранова, 1989). Если местные переносчики восприимчивы к экзотическим плазмодиям, завоз может привести к образованию местных очагов заболевания (Ambroise-Thomas et al., 1972; de Zulueta, 1973; Schultz, 1974; Чагин, 1976). Современная теория не дает ответа на этот вопрос, т.к. оперирует лишь высшими таксономическими категориями. Во вторых, недостаток данных о жизнедеятельности зараженных переносчиков не позволяет предпринимать полностью адекватных мер по защите от них.

Исследование отношений членистоногих с возбудителями болезней актуально также и в общебиологическом плане: это специфический вариант симбиоза, закономерности которого мало известны.

Поскольку изучение отношений возбудителей и переносчиков невозможно без лабораторного эксперимента, актуальной пробле- мой является получение материала для исследований - культивирование комаров.

Цель и задачи исследования: Цель работы - определить характер отношений переносчиков и возбудителей малярии.

Для достижения поставленной цели потребовалось решить следующие задачи:

определить место исследования отношений возбудителей и переносчиков в круге проблем медицинской энтомологии;

выявить ряд аспектов биологии переносчиков;

разработать методы получения энтомологического материала и получить его;

создать лабораторную модель циркуляции плазмодиев, включающую реальных переносчиков малярии человека;

подобрать методы заражения переносчиков;

определить точность методов оценки обилия возбудителя в хозяине и переносчике;

выявить факторы, определяющие возможность и уровень заражения переносчиков возбудителями;

определить влияние возбудителей на состояние и поведение переносчиков;

определить возможности сохранения возбудителей в переносчиках.

Научная новизна.

2. Разработаны теоретические основы культивирования членистоногих:

2.1. Обеспечение безопасности путем использования моделей и экзотических видов.

2.2. Отказ от воссоздания природной обстановки, а обеспечение условий, необходимых и достаточных для воспроизводства биоматериала.

2.3. Создание градиета условий.

2.4. Оценка качества биоматериала по его стабильности и однородности; 2.5. Оптимизация культур путем снижения стоимости биоматериала при сохранении его качества и уровня производства.

2.6 Соблюдение этических норм в обращении с лабораторными животными.

3. Решен ряд общебиологических вопросов:

3.1. Разработаны принципы и методы выбора морфофизиологических индикаторов.

3.2. Разработана методология использования таксономического анализа для экологических исследований.

3.3. Показано, что эффект группы состоит из эффекта численности и эффекта концентрации особей.

3.4. Открыт "эффект приглашения" - неизвестный ранее стимул привлечения к добыче кровососущих двукрылых.

4. Выявлены закономерности определяющие возможность и уровень заражения комаров возбудителями малярии:

4.1. На уровне родов и видов отсутствует связь между систематическим положением возбудителей и переносчиков.

4.2. Восприимчивость может существовать без контакта взаимодействующих организмов.

4.3. Восприимчивость - свойство, наследуемое на уровне особей.

4.4. восприимчивость подвержена влиянию эндогенных факторов и внешних воздействий.

5. Доказано, что плазмодии являются комменсалами комаров и не оказывают существенного влияния на их чувствительность к инсектициду, полет, продолжительность жизни и агрессивность.

7. Разработан математический метод оценки разных путей передачи для сохранения популяции возбудителя.

Практическая ценность.

3. Подобран метод искусственного кормления комаров кровью.

4. Дана оценка точности методов определения обилия возбудителей в крови позвоночных и в теле переносчиков.

5. Разработан метод оценки восприимчивости комаров к возбудителям малярии.

7. Обоснована возможность использования в эпидемиологических моделях малярии данных о состоянии и поведении зараженных особей переносчика.

Внедрение результатов исследования в практику.

1. В Институте Медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского (ИМПиТМ) создан инсектарий - база для экспериментального изучения экологии комаров, их отношений с возбудителями болезней и средств уничтожения.

2. Воспроизведены и созданы колонии 10 видов комаров, в том числе 3 впервые в мире. Культуры переданы в инсектарий ИМПиТМ.

4. Метод культивирования комаров Culex pipiens (согласно инструкции) внедрен в ВНИИ Прикладной микробиологии и на Бердском химическом заводе.

Внедрение работ в практику подтверждено соответствующими актами, приведенными в приложении.

Положения, выносимые на защиту.

2. Восприимчивость - количественное свойство, зависящее от индивидуальной наследственности, внешних воздействий, количества выпитой крови и эндогенной ритмики жизни особи.

3. Заражение комаров не имеет однозначной связи с обилием заглоченных плазмодиев, не зависит от повторного кровососания и потребления углеводов.

4. Плазмодии малярии - комменсалы комаров. Они не вызывают существенных изменений в их жизнедеятельности и поведении.

Апробация работы.

Материалы диссертации докладывались на 5-ом совещании Всесоюзного энтомологического общества (1963), совещании "Актуальные вопросы изучения и освоения таежных территорий." (1963), 6-ом съезде Всесоюзного энтомологического общества (1970), 13-ом международном энтомологическом конгрессе (1971), заседаниях Московского общества испытателей природы (1975, 1980), Всесоюзной конференции "Теория классификации и анализ данных" (1981), 7-ом съезде Всесоюзного микробиологического общества (1985), Всесоюзной конференции "Пути повышения эффективности микробиологической борьбы с вредителями и болезнями растений" (1986), I-ом Всесоюзном совещании по проблемам зоокультуры (1986), I-ой научно-практической конференции "Здоровье населения России и пути его улучшения" (1994), заседаниях Московского общества эпидемиологов и микробиологов им. И.И. Мечникова (1988, 1991), Первой и Второй Всесоюзных конференциях по промышленному разведению насекомых (1986, 1989), Ученом Совете ИМПИТМ (1994), коллоквиумах отдела медицинской энтомологии ИМПИТМ (по нескольку раз ежегодно).

Публикации.

Результаты работы отражены в 74 публикациях, а также в описаниях 17 рационализаторских предложений.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 261 странице машинописного текста и состоит из введения, 13 глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 481 источник, из которых 236 отечественных и 245 иностранных авторов, и приложения. Работа иллюстрирована 82 таблицами и 17 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. КОНЦЕПЦИЯ МЕДИЦИНСКОЙ ЭНТОМОЛОГИИ.

До последнего времени медицинская энтомология ограничивалась "изучением членистоногих, вредящих здоровью человека" (Учебник медицинской энтомологии, часть I, 1949, стр. 139, Руководство по медицинской энтомологии, 1974, стр. 5). Благодаря успехам, достигнутым в предыдущие годы, эта наука может выйти на более высокий уровень. Целесообразно принять новое определение: "Медицинская энтомология - наука, изучающая влияние членистоногих на состояние человека и способы управления этим влиянием". При таком подходе в область ее интересов войдет не только вредное, но и оздоровительное влияние членистоногих на людей, их роль в качестве факторов комфорта, аллергизаторов, источников лекарственных средств и т.п., а также отношения членистоногих с возбудителями болезней. Последней проблеме и посвящена предлагаемая работа.

До начала наших работ проблема отношений переносчиков и возбудителей была решена на уровне крупных таксономических категорий: установлена связь между их систематическим положением (Беклемишев, 1948); классифицированы типы переноса (Беклемишев, 1949, 1955); сформулировано учение о природной очаговости (Павловский, 1939). Позднее была выявлена роль морфофизиологических особенностей в передаче возбудителей инфекций (Балашов, 1984) и предложена "Теория связи типов питания и пищеварения кровососущих членистоногих с их способностью быть специфическими переносчиками возбудителей трансмиссивных инфекций" (Алексеев, 1984а, б, 1985). Поскольку возникновение восприимчивости связывали с процессом длительной эволюции (Беклемишев, 1955) и фундаментальными характеристиками семейств, отрядов и классов переносчиков (Алексеев, 1984а, б, 1985), в реальном времени это свойство казалось неизменным. Возбудитель считался вредоносным для переносчика, и, потому, его именовали паразитом (Беклемишев, 1955; Алексеев, 1989). Задача дальнейших исследований, виделась лишь в том, чтобы отыскивать новые виды переносчиков, уточнять их распространение и экологию (Петрищева, 1967). Но практика имеет дело с видами, популяциями, особями. А здесь ясности не было. Этот пробел и восполняет данная работа - в ней проблема отношений возбудителей и переносчиков анализируется на уровне видов и отдельных особей.

Глава 2. ТЕРМИНЫ, МАТЕРИАЛЫ, МЕТОДЫ.

В работе использованы, термины, предложенные В.Н.Беклемишевым (1959, 1961), В.Д.Степнюком и В.П.Литвиным (1976), В.В. Кучеруком и Б.Росицким (1984), а также изданиями ВОЗ: "Терминология по малярии и ликвидации малярии" (1964) и "Биология малярийных паразитов" (1988). Термин "восприимчивость" употребляется для обозначения свойств особей, а "зараженность" - обилия возбудителя в переносчике.

Объектами исследований были кровососущие комары - Culicidae (10 видов), возбудители малярии - Plasmodium (6 видов) и инсектицид ДДТ. Их выбор вызван тем, что малярия - самая массовая трансмиссивная болезнь, комары - ее переносчики, а ДДТ во время проведения исследований был самым распространенным средством борьбы с комарами. Для изучения отношений комаров и плазмодиев выполнено 972 опыта, в которых просмотрено 1314 препаратов крови и использовано более 60000 комаров, из которых у 32150 определена зараженность.

Уровень паразитемии определяли по шкале А.И.Немировской (1941). Передача малярии через комаров проверялась паразитологически (по наличию плазмодиев в крови реципиента) и ксенодиагностикой (заражением комаров кровью реципиента).

Всегда (кроме случаев, оговоренных специально) сравниваемые группы комаров выращивали в одном сосуде и содержали в одном термостате при 27 - 28 С с градиентом влажности от 80 до 100 %. Группы состояли из одновозрастных особей на первом репродуктивном цикле. Их заражали путем кормления на одном доноре одновременно. Зараженность определяли стандартными методами у особей, выпивших полную порцию крови.

Математическая обработка результатов проведена стандартными методами с помощью программ, написанных автором на языках "Бейсик" и "Паскаль". При анализе статистической достоверности разницы между сравниваемыми группами я ориентировался не на число исследованных особей, а на число повторных опытов. Дело в том, что один опыт (сколько бы ни было в нем особей) характеризует генеральную совокупность составляющих именно этого опыта, а нас интересует генеральная совокупность всех опытов.

Глава 3. ЭНТОМОЛОГИЧЕСКАЯ БАЗА ИССЛЕДОВАНИЙ

Энтомологическим материалом исследований служили комары, которых получали главным образом из культур (табл. 1).

Таблица 1. Список использованных видов комаров.

Вид	Источник получения
Aedes aegypti	культура, воспроизведенная из материала школы тропической гигиены (Лондон).
Ae. togoi	культура, воспроизведенная из материала лаборатории Н.А.Тамариной (МГУ).
Anopheles atroparvus	культура, созданная заново.
An. martinius	культура, созданная впервые в мире.
An. messeae	природная популяция из Подмосковья.
An. pulcherrimus	культура, созданная впервые в мире.
An. sacharovi	культура, созданная впервые в мире.
An. stephensi	культура, воспроизведенная из материала школы тропической гигиены (Лондон).
An. subalpinus	природная популяция из Азербайджана.
An. superpictus	культура, созданная заново.
Culex pipiens	культура, созданная заново.

В процессе создания и поддержания культур комаров разработаны следующие принципы:

2. Отказ от воссоздания природной обстановки, а обеспечение условий, достаточных для воспроизводства особей.

3. Предоставление особям градиента условий.

4. Качество биоматериала оценивать не по сходству с природными особями, а по его стабильности и однородности.

5. Цель оптимизиации культур - снижение стоимости биоматериала при сохранении его качества и уровня производства.

6. Этическое отношение к подопытным животным.

Для контроля состояния особей (биоматериала) используются морфофизиологические индикаторы (Шварц, Смирнов, Добринский, 1968). Выбор структур, пригодных для этой цели, основан на оценке дисперсии числовой характеристики признака под действием различных факторов (Расницын, 1986а). У комаров наиболее реактивными и информативными индикаторами оказались вес особей и их плодовитость. Они использованы для контроля биоматериала, а плодовитость также для оценки влияния плазмодиев на комаров.

Изучение комаров выявило ряд аспектов их биологии, имеющих прямое отношение к данной теме. Важнейшие из них: Таксономическая близость видов не свидетельствует о сходстве всех их свойств. Так по способу питания личинки An. stephensi похожи на на личинок Aedes больше, чем на других представителей своего рода - они не фильтруют нейстон, а собирают пищу со дна водоема; нет прямой связи между таксономической близостью и чувствительностью к инсектицидам.

Следовательно, и восприимчивость может не коррелировать с таксономической близостью видов и зависеть от условий развития особей; при оценке агрессивности надо учитывать концентрацию особей, их численность и эффект приглашения; применение звуковых генераторов облегчают нападение переносчиков и, тем самым, распространение возбудителя.

Условия развития личинок комаров отражаются на размерах имаго и количестве крови, которое они могут высосать. От этого фактора зависит общее состояние особей, что проявляется в их чувствительности к инсектицидам.

Эффект группы зависит и от концентрации особей, и от их численности. Оба этих параметра сказываются на активности нападения комаров. Обнаружен "эффект приглашения" - привлечение особей к добыче теми, кто ее уже нашел. Звуковых генераторы не отпугивают комаров; они лишь имитируют защиту.

Глава 4. ОЦЕНКА МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ ЗАРАЖЕННОСТИ ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Ошибки в обнаружении плазмодиев в крови донора бывают не чаще, чем в 2 % случаев. Обилие бесполых форм плазмодиев определяется с точностью ±1 балл, а ошибка в определении обилия гаметоцитов достигает трехкратной. Ошибки в определении наличия ооцист в переносчике встречаются в 0.25 %, а спорозоитов - в 0.35 % случаев. Число ооцист определяется с точностью ±10 %. Количество крови, выпитой комаром, определяется с точностью ±1 %. Во всех случаях разброс ошибок соответствует нормальному распределению.

Комаров можно заражать плазмодиями путем искусственного кормления (предлагая им венозную кровь через мембрану). При этом доля насосавшихся особей не изменяется, а заражение снижается незначительно (на 10 %) - соответственно разбавлению крови консервантом. Выживаемость плазмодиев в комарах, зараженных путем искусственного кормления, не снижается и они сохраняют инфективность. Этот результат свидетельствует об отсутствии концентрации инфективных гаметоцитов в периферической крови и позволяет избавить людей от неприятной процедуры (кормления комаров на себе) и риска заражения побочными инфекциями.

Последовательное кормление на одном доноре многих партий комаров не приводит к снижению их заражения, что подтверждает отсутствие скопления гаметоцитов в периферической крови и открывает возможность для ряда экспериментов.

Минимальная заражающая доза гаметоцитов низка; для страховки ее надо считать равной единице (1 микро- и 1 макрогаметоцит). Существует верхний предел числа ооцист, которые могут образоваться в комаре. Для разных сочетаний организмов этот предел различен и достигается при разной дозе гаметоцитов. Избыточное количество возбудителей не вызывает гибели переносчиков и снижения их зараженности, соответственно, нет оптимальной заражающей дозы плазмодиев для комаров. Концентрация плазмодиев не является ведущим фактором крови, определяющим заражение комаров; единственным способ обеспечить идентичность условий заражения комаров - одновременное кормление их кровью одного донора.

Глава 5. СВЯЗЬ ВОСПРИИМЧИВОСТИ С ТАКСОНОМИЧЕСКИМ И ГЕОГРАФИЧЕСКИМ ПОЛОЖЕНИЕМ ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИХ ОРГАНИЗМОВ.

Успешное заражение трех видов комаров (An. sacharovi, An. atroparvus, An. messeae) 37 штаммами P.vivax из 6 стран (Ниге рия, Индия, Пакистан, Йемен, Лос, Бразилия) демонстрирует возможность восприимчивости переносчиков к экзотическими популяциями возбудителей. Эта возможность существует не всегда: попытки заражения An. subalpinus и An. sacharovi 27 штаммами P.falciparum из 11 стран (Верхняя Вольта, Гана, Центр. Африка, Либерия, Конго, Заир, Гвинея-Биссау, Мали, Экв.Гвинея, Индия, Пакистан) лишь в 4 случаях (15 %) оказались успешными, а все 50 опытов по заражению этими штаммами An. atroparvus и An. messeae дали отрицательный результат. Но даже при наличии восприимчивости, аллопатричные штаммы возбудителей заражают комаров хуже, чем симпатричные. Специальный эксперимент с Ae. aegypti, An. sacharovi и P.gallinaceum показал, что возбудитель способен быстро адаптироваться: всего лишь за одно половое поколение плазмодии повысили способность заражать нового переносчика в 1.5-2 раза.

Восприимчивость может существовать не только между изолированными популяциями, но и изолированными видами, т.е. без предварительного периода коэволюции. Доказательством этому служит способность An. sacharovi и An. pulcherrimus быть переносчиками P. gallinaceum - вида, с которым они не могли встречаться и по экологическим причинам (комары - охотники за крупной добычей, а P. gallinaceum паразит птиц), и по географическим (их ареалы далеки друг от друга). Обнаруженные факты позволили создать новую лабораторную модель циркуляции возбудителей малярии, заменив в известной Ae. aegypti на An. sacharovi. Эта замена сохранила все достоинства модели (безопасность и низкую стоимость) и приблизила ее к реальности (An. sacharovi - переносчик малярии человека, Ae. aegypti - нет).

Внутри семейства Culicidae нет связи между систематическим положением комаров и их восприимчивостью к плазмодиям. Так An. sacharovi и Ae. aegypti (представители разных родов) могут быть переносчиками P. gallinaceum, а An.atroparvus (вид - близнец An. sacharovi) невосприимчив.

Наличие восприимчивости у разных видов не означает того, что в равных условиях они будут одинаково заражаться возбудителем. Наоборот, во всех исследованных случаях даже при полной идентичности условий заражение представителей разных видов не только отличалось, но даже не коррелировало (рис. 1).

Таким образом, принадлежность членистоногого к определенной таксономической группе является свидетельством не его восприимчивости к определенной группе возбудителей, а лишь того, что эту восприимчивость нельзя исключить без проверки. Географическая изоляция штаммов возбудителей от популяций членистоногих, не гарантирует отсутствия восприимчивости, как и симпатрия - наличие ее.

Глава 6. ИНДИВИДУАЛЬНАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВОСПРИИМЧИВОСТИ.

Восприимчивость, как и все свойства живых организмов, подвержена индивидуальной изменчивости. В равных условиях число возбудителей в разных особях комаров может лежать в пределах от 0 до нескольких сот ооцист (особей плазмодия). И дело тут не в распределении гаметоцитов в русле крови донора - если комаров кормить искусственно (при этом кровь перемешивается), неравномерность заражения сохраняется. Характер распределения плазмодиев в комарах соответствует обратному биномиальному, которое возникает тогда, когда математическое ожидание событий не фиксировано в пределах совокупности. Следовательно, различен уровень восприимчивости особей.

Обнаружена разница в заражении плазмодиями разных семей комаров, взятых из одной лабораторной популяции. (В крайних вариантах разница была в десятки раз и статистически достоверной.) В исследованных случаях роль наследственности определяла до 40 % дисперсии экстенсивности и интенсивности заражения переносчика. При этом в культуре, ведущейся многие десятилетия (Ae. aegypti), различия между семьями и, соответственно, роль наследственности в восприимчивости были достоверно ниже, чем в культуре, созданной сравнительно недавно (An. sacharovi).

Глава 7. ВЛИЯНИЕ ЭНДОГЕННЫХ ФАКТОРОВ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Впервые обнаружен эндогенный фактор, определяющий возможность заражения комаров плазмодиями малярии, - гонадотропные гормоны. Если после кровососания по каким-либо причинам эти гормоны выделятся в недостаточном количестве и, потому, яичники комара не развиваются, вероятность выживания плазмодиев, попавших в его организм, резко снижается (табл. 2). Выделение гормонов и, соответственно, развитие яичников зависят от возраста особи, полноты принятой порции крови и многих других причин, определяющих ее состояние. Поскольку в течение индивидуальной жизни каждого комара происходит смена его состояний, меняется и его восприимчивость.

Таблица 2. Развитие яичников и заражение An. sacharovi P.gallinaceum.

Причина недостатка гормонов	Число опытов	Исследовано особей		Заражено особей (%)		Среднее число ооцист
Причина недостатка гормонов	Число опытов	+Я	-Я	+Я	-Я	+Я	-Я
Молодой возраст	16	556	287	64	4	142	20
Неполнота порции крови	16	348	346	63	1	125	15
Прочие	11	319	248	50	2	122	4

Обозначения: +Я - особи с развитыми яйцами; -Я - особи с неразвитыми яйцами.

Глава 8. ВЛИЯНИЕ ПИТАНИЯ ПЕРЕНОСЧИКОВ НА ИХ ВОСПРИИМЧИВОСТЬ.

Самки комаров питаются кровью и углеводами. Жизнь плазмодиев в комарах тесно связана с пищеварительной системой последних и, потому, ожидается, что заражение переносчиков зависит от их пищи. Эта зависимость существует не всегда. Отсутствие углеводной пищи не влияет на заражение: опыты с двумя видами (Ae. aegypti и An. sacharovi) и наблюдения над многими другими показали отсутствие разницы во всех характеристиках зараженности комаров и вирулентности возбудителя между теми особями, которые получали углеводную подкормку, и теми, которые были лишены ее.

Иное дело кровь: от количества выпитой крови зависит не только вероятность попадания плазмодиев в комаров и, соответственно, экстенсивность и интенсивность их заражения, но и сама ее возможность. Насыщение кровью изменяет состояние комара, делая его доступным для плазмодиев. Если комары выпьют менее половины той порции крови, которая необходима для их насыщения, плазмодии в них приживаются лишь в редких случаях. Если же докормить комаров кровью, не содержащей возбудителя, они заразятся (табл. 3).

Таблица 3. Влияние количества крови на заражение комаров возбудителями малярии.

Комары	Число опытов	Исследовано особей	Заражено особей (%)	Среднее число ооцист
С полной порцией заразной крови	9	393	73	34
С половинной порцией заразной крови	9	256	2	<1
С половинной порцией заразной крови, докормленные незераженной кровью	9	427	46	6

Глава 9. ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ РАЗВИТИЯ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Условия развития комаров влияют на их размеры, которые могут изменяться в 2-3 раза и более. Количество крови, высасываемой комаром до полного насыщения, тесно связано с его размером (коэффициент корреляции равен 0.90±0.02). Из-за разницы в количестве выпитой крови изменяется вероятность попадания возбудителя в переносчика. Таким образом, от условий развития зависит восприимчивость комаров. Изменение восприимчивости под влиянием условий развития проявляется лишь тогда, когда концентрация гаметоцитов в крови донора не велика; в этом случае доля зараженных особей среди мелких комаров снижается и возбудитель развивается в них в меньшем числе, чем в крупных. Когда же возбудителя в крови донора много, заражение мелких комаров почти не уступает заражению крупных (табл. 4). Причина в том, что в этом случае гаметоциты попадают во всех комаров, а поскольку минимальная заражающая доза низка, заражаются все восприимчивые особи, независимо от их размеров, и число образующихся ооцист ограничивается не числом гамет, а наличием верхнего предела числа ооцист, которые могут образоваться в комаре (см. гл.4).

Таблица 4. Заражение комаров из разных условий при высокой

концентрации плазмодиев в крови донора.

Показатель	Факторы
	Температура		Концентрация особей		Количество корма
	норма	высокая	норма	высокая	норма	малое
Число опытов	6	6	6	6	8	8
Число исследованных особей	221	218	204	203	320	277
Вес куколок, мг	4,1	3,7	3,8	3,7	4,0	2,0
Ооцистный индекс, %	94	93	94	99	96	91
Среднее число ооцист	83	59	169	126	68	57
Спорозоитный индекс, %	92	88	90	96	96	94

Глава 10. ВЛИЯНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ НА ВОСПРИИМЧИВОСТЬ ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Из всех биологически активных веществ наибольшее значение имеют инсектициды, т. к. они применяются именно тогда, когда надо подавить или предотвратить вспышку заболеваемости. Обработки инсектицидами убивают не всех переносчиков - часть особей получает сублетальные дозы, которые, однако, вызывают существенные изменения в их организме. Поскольку восприимчивость зависит от состояния членистоногого, можно ожидать, что инсектицид повлияет на это свойство. Наши опыты показали, что такое влияние наблюдается, по крайней мере, не всегда. Так, контакт комаров с ДДТ не изменил зараженности Ae. aegypti P. gallinaceum (табл. 5).

Таблица 5. Заражение комаров плазмодиями малярии при наличии и отсутствии контакта с ДДТ.

Контакт	Число опытов	Исследовано особей		Доля (%) Зараженных особей		Среднее Число ооцист
Контакт	Число опытов	+К	-К	+К	-К	+К	-К
За сутки до заражения	2	48	60	96	92	30	24
За час до заражения	7	215	171	62	72	8	7

Обозначения: +К - комары, контактировавшие с ДДТ; -К - интактные особи.

Глава 11. ПРЯМОЕ ВЛИЯНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ НА ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Вопреки распространенному мнению, прямые эксперименты не выявили существенных и достоверных различий между зараженными и незараженными комарами (табл. 6). Даже плодовитость (самый реактивный морфофизиологический индикатор комаров) сравниваемых особей была почти одинаковой. Отсутствие статистически достоверной разницы не доказывает, конечно, наличия сходства. Более того, нет сомнений, что плазмодии так или иначе влияют на комаров. Важно другое: если это влияние не выявилась в 80 опытах (на 5000 особей), охвативших все важнейшие стороны жизни комаров, значит оно мало и не идет ни в какое сравнение с влиянием истинных паразитов. Такие факты заставляют считать плазмодиев не паразитами, а комменсалами комаров.

Таблица 6. Сравнение комаров, зараженных плазмодиями малярии с интактными особями.

Показатель	Число опытов	Иссле- довано особей	Зара- женные особи	Незара- женные особи	Контроль
Доля Ae.aegypti, погибших от контакта с ДДТ (%)	4	1084	45	-	32
Дальность суточного полета Ae.aegypti (м)	12	24	452	455	449
Дальность суточного полета An.sacharovi (м)	12	24	940	826	1038
Доля агрессивных особей Ae.aegypti (%)	6	360	87	82	64
Доля агрессивных особей An.sacharovi (%)	6	360	42	49	38
Доля Ae. aegypti, проживших 10 суток (%)	6	600	78	-	78
Доля Ae. togoi, проживших 10 суток (%)	15	1500	69	-	62
Доля An. atroparvus, проживших 10 суток (%)	2	183	31	-	44
Доля An. pulcherrimus, проживших 10 суток (%)	2	249	18	-	24
Доля An. Sacharovi проживших 10 суток (%)	6	60	47	-	54
Доля An. stephensi, проживших 10 суток (%)	3	157	17	-	19
Среднее число развитых яиц у Ae. aegypti	8	415	98	100	96

Обозначения: "незараженными" именуются особи, пившие кровь цыплят, больных малярией, у которых ооцисты не образовались; "контрольными" - особи, пившие кровь здоровых цыплят.

Из этого следует практический вывод: для эпидемиологических построений нет нужды исследовать жизнедеятельность зараженных комаров, как исследовались интактные особи - разница между теми и другими по всей шкале эпидемиологически важных свойств пренебрежимо мала.

Глава 12. КОСВЕННОЕ ВЛИЯНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ НА ПЕРЕНОСЧИКОВ.

Косвенное влияние возбудителя на переносчика - это влияние через третьего сочлена системы - позвоночного хозяина. Во время приступа малярии человек привлекает комаров сильнее, чем здоровый (в наших опытах в 2.6 раза). Усталость от физической нагрузки (что служит имитацией болезни) повышает доступность людей для комаров: они хуже защищаются и, потому, число особей, насосавшихся на них крови, повышается (в исследованных случаях в 17 раз). Изменение состава крови позвоночного, вызванное заболеванием малярией, на комарах не отражается.

Глава 13. СОХРАНЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ В ПЕРЕНОСЧИКАХ.

Математическая модель оценки разных путей передачи для сохранения популяции возбудителя показала, что членистоногие могут быть не только переносчиками, но и хранителями возбудителя. Для этого необходимо наличие трансфазовой, трансовариальной и (или) трансиндивидуальной передачи. Поскольку для плазмодиев эти пути закрыты, речь может идти только о их сохранении лишь в течение индивидуальной жизни комаров.

В норме спорозоиты остаются в слюнных железах комаров пожизненно. Обработка комаров инсектицидом (ДДТ) не приводит ни к гибели находящихся в них плазмодиев, ни к снижению их вирулентности, на каком бы этапе спорогонии не застиг их инсектицид. Не вызывает снижения зараженности комаров и лишение последних кровяного питания, которое в норме происходит на протяжении спорогонии неоднократно. Все это свидетельствует о тесной связи взаимодействующих организмов.

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Сравнение заражаемости комаров (Ae. aegypti, Ae. togoi, An. atroparvus, An. maculipennis, An. messeae, An. pulcherrimus, An. sacharovi, Cx. pipiens) одними и теми же штаммами плазмодиев малярии (P. gallinaceum и P. vivax) не выявило ни одного случая, когда бы восприимчивость разных видов была бы идентичной. Это говорит о том, что данное свойство (восприимчивость) специфично на уровне видов, а не только крупных таксономических категорий.

Внутри одного рода комаров обнаружены виды (а внутри видов - популяции) как высоко восприимчивые (An. pulcherrimus, An. sacharovi) к одному виду и штамму плазмодиев (P. gallinaceum), так и полностью рефрактерные к нему (An. atroparvus). А это значит, что принадлежность членистоногого к определенной таксономической группе не свидетельствует о том, что оно восприимчиво к определенной группе возбудителей, а лишь о том, что эту восприимчивость нельзя исключить без проверки.

Поскольку выявлено, что представители разных родов комаров (Ae. aegypti и An. sacharovi) могут быть эффективными переносчиками одного и того же штамма плазмодиев, а внутри одного из этих родов могут быть близкие виды, даже виды-сиблинги (An. sacharovi и An. atroparvus), один из которых восприимчив, а другой рефрактерен, следовательно внутри семейства Culicidae по отношению к гемоспоридиям нет связи между таксономическим положением и восприимчивостью. О том же говорит наличие рефрактерных и восприимчивых популяций внутри одного вида.

Обнаружение случаев эффективного переноса некоторыми видами комаров (An. pulcherrimus и An. sacharovi) такого вида плазмодиев (P. gallinaceum), с которым они не могли встречаться ни по географическим, ни по экологическим причинам, свидетельствует о том, что для возникновения эффективных "ксено-пар" не всегда требуется процесс длительной коэволюции, а это, в свою очередь, означает возможность "появления" новых, неожиданных переносчиков.

Восприимчивость - не качественное, а количественное свойство. Оно зависит от наследуемых индивидуальных свойств особей, но не только: на его наличие и уровень влияют состояние половой системы, возраст особей, условия их развития, биологически активные вещества, в частности, инсектициды (однако, влияние последних проявляется редко и в слабой степени). По этим причинам восприимчивость варьирует на популяционном и индивидуальном уровне, и даже в течение индивидуальной жизни особи. Это значит, что, восприимчивость не определяется каким-то одним врожденным стабильным фактором, общим для крупной таксономической группы, а лабильное свойство, связанное со многими сторонами состояния членистоногого, и подверженное влиянию эндогенной ритмикой жизни особи и внешними воздействиями.

Заражение комаров возбудителями малярии зависит от количества выпитой крови, но не зависит от повторного кровососания и от питания углеводами. Нижний порог обилия плазмодиев, который определяет возможность заражения комаров, близок к единице (один макро- и один микрогаметоцит). В естественных условиях нет верхнего предела обилия плазмодиев, превышение которого приводило бы к снижению зараженности комаров, соответственно, нет и оптимальной заражающей дозы. По этой причине наличие у донора половых форм плазмодиев всегда (сколько бы их ни было) представляет эпидемическую опасность.

Эксперименты с разными видами показали, что плазмодии не вызывают существенного изменения агрессивности комаров, продолжительности их жизни, чувствительности к инсектицидам, полет, и не влияют даже на самый реактивный морфофизиологический индикатор - плодовитость. Следовательно, плазмодиев надо считать не паразитами, а комменсалами комаров. Поскольку возбудители малярии не влияют на те характеристики комаров, от которых зависит перенос инфекции, для эпидемиологических построений нет нужды наново исследовать экологию и поведение зараженных особей, для этих целей можно использовать данные о не зараженных.

Обнаружено косвенное влияние плазмодиев на комаров: возбудители повышают доступность для переносчиков позвоночных хозяев и облегчают их обнаружение. Это влияние велико и имеет явное эпидемиологическое значение: больные малярией люди особенно привлекательны для комаров и, в то же время, беззащитны перед их нападением. Изменение состава крови больного позвоночного на комарах, которые ее пьют, не отражается.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ.

2. Наличие и уровень восприимчивости комаров к возбудителям малярии различны для разных видов и популяций взаимодействующих организмов.

3. Внутри семейства Culicidae по отношению к гемоспоридиям нет связи между таксономическим положением и восприимчивостью.

4. Восприимчивость комаров к возбудителям малярии возможна без предварительного периода взаимной адаптации.

5. Наличие восприимчивости и его уровень зависят от индивидуальной наследственности, внешних воздействий, количества выпитой крови и эндогенной ритмики, и, в результате, варьируют на популяционном и индивидуальном уровне, и даже в течение жизни одной особи.

6. Заражение комаров не имеет однозначной связи с обилием заглоченных плазмодиев, не зависит от повторного кровососания и потребления углеводов.

7. Плазмодии малярии - комменсалы комаров. Они не вызывают существенных изменений в жизнедеятельности и поведении комаров.

8. Возбудители малярии оказывают на комаров косвенное влияние, повышая для них возможность обнаружения и доступность позвоночных хозяев.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ :

Расницын С.П. Изучение активности слепней при помощи чучелообразных ловушек. /Зоол. ж. 1963, т. 42, N 6, c. 951-953.

Расницын С.П., Макарова С.И., Шевелева Г.А. Распределение мошек (Diptera, Simuliidae) в ручьях Приангарья. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1966, т. 35, N 1, с. 3-7.

Расницын С.П., Алексеев А.Н., Горностаева Р.М., Куприянова Е.С., Потапов А.А., Разумова О.В. Отрицательные результаты испытания образцов звуковых генераторов, предназначенных для отпугивания комаров. /Мед. паразитол. 1974, Т. 39, N 6, С. 106-109.

Алексеев А.Н., Расницын С.П., Витлин Л.М. О групповом поведении самок кровососущих комаров (Diptera, Culicidae, Aedes). Сообщ. 1. Обнаружение "Эффекта приглашения." /Мед. паразитол. 1977, Т. 42, N 1, С. 23-24.

Бибикова В.А., Дашкова Н.Г., Расницын С.П., Сулейманов Г.Д., Тибурская Н.А. Передача комарами Anopheles maculipennis atroparvus бразильского штамма трехдневной малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3, с. 63-67.

Дашкова Н.Г., Расницын С.П. Сравнение заражаемости комаров возбудителями малярии при кровососании на человеке и через биомембранну. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3, с. 88-91.

Детинова Т.С., Расницын С.П., Маркович Н.Я., Куприянова Е.С., Аксенова А.С., Ануфриева В.Н., Бандин А.И., Жаров А.Н. Унификация методов учета численности кровососущих двукрылых насекомых. /Мед. паразитол. 1978, Т. 47, N 5, С. 84-92.

Расницын С.П. Некоторые критерии оценки методов количественного учета животных. /Зоол. ж. 1978, т. 57, N 1, С. 124-131.

Расницын С.П., Алексеев А.Н., Витлин Л.М. Групповое поведение самок кровососущих комаров. /"Доклады МОИП. Зоол. и ботаника. 1-е полугодие 1975 г." М., Из-во МГУ. 1978, С. 11-12.

Супряга В.А., Дашкова Н.Г., Расницын С.П. Сравнение некоторых способов искусственного кормления кровью трех видов комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1978, т. 47, N 3, с. 111-112.

Расницын С.П., Бикунова А.Н. Результаты сравнения некоторых методов оценки нападения мошек на человека. /Мед. паразитол. 1979, т. 48, N 4, с. 56-62.

Расницын С.П., Демина В.Т. Способ культивирования личинок малярийных комаров. /Авт. свид. СССР N 660638. 1979г.

Расницын С.П., Косовских В.Л. Усовершенствованный метод учета обилия комаров сачком вокруг человека и сравнение его с учетом темным колоколом. /Мед. паразитол. 1979, N 1, С.18-24.

Расницын С.П. Вероятные причины эффективности звуковых генераторов, предназначенных для отпугивания комаров. /"Докл. МОИП. Зоол. и ботаника. 2-е полугодие 1977 г." М. Из-во МГУ. 1980, с. 12-13.

Расницын С.П. Питательная среда для выращивания личинок желтолихорадочного комара Aedes aegypti. /Авт. свид. СССР N 790389. 1980 г.

Расницын С.П. Задачи и возможности классификационных систем. /Сб. "Теория классификации и анализ данных". Ч. 1. Новосибирск, Изд-во ВЦ СО АН СССР. 1981, с. 25-26.

Кисленко Г.С., Чунихин С.П., Расницын С.П., Курунков В.Б., Изотов В.К. Изучение репродукции вирусов Повассан и Западный Нил в комарах Aedes aegypti и в культуре их клеток. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1982, N 3, с. 13-15.

Расницын С.П. Стратегия массового культивирования насекомых. /"Докл. МОИП. Зоол. и ботаника. 1980 г." М. Из-во МГУ. 1982, с. 35-37.

Расницын С.П., Волкова Л.Б. Анализ эффекта группы на примере личинок комаров Aedes aegypti (Diptera, Culicidae). /Экология. 1982, N 4, с. 73-77.

Dashkova N.G., Rasnitsyn S.P. (Дашкова Н.Г., Расницын С.П.) Review of Data on Susceptibility of Mosquitos in USSR to imported strains of Malaria Parasites. /Bull. WHO. 1982, v. 60, N 6, p. 893-897.

Алексеев А.Н., Соколова Э.И., Расницын С.П., Ганушкина Л.А., Бикунова А.Н. Влияние плотности личинок комаров Aedes aegypti на их гибель под действием препаратов Bacillus thuringiensis Berl. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983, N 1, с. 78-80.

Расницын С.П., Демина В.Т. Среда для выращивания личинок малярийного комара Anopheles sacharovi. /Авт. свид. СССР N 1081781. 1983г.

Расницын С.П., Косовских В.Л. Влияние продолжительности экспозиции на число кровососущих двукрылых (Diptera), выловленных темным колоколом. /Мед. паразитол. 1983, N 6, С. 69-72.

Расницын С.П., Шагов Е.М., Демина В.Т. Возможность использования массы куколок как показателя состояния особей у комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1983, N 4, с. 42-45.

Шагов Е.М., Расницын С.П., Уланова Г.И., Демина В.Т. Тест-насекомые при разработке и производстве микробиологических препаратов. /Депонент ОНТИТЭМикробиопром 05.09.83, N 160-деп. с. 1-10.

Алексеев А.Н., Абдуллаев И.Т., Расницын С.П. Сравнение способности к полету зараженных и незараженных плазмодиями Aedes aegypti. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 1, с. 11-13.

Жарова А.Н., Расницын С.П. Сохранение возбудителя малярии в комарах, получивших сублетальные дозы инсектицида. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 5, с. 82-84.

Жарова А.Н., Расницын С.П., Дашкова Н.Г. Плодовитость комаров Aedes aegypti в связи с их зараженностью возбудителем малярии Plasmodium gallinaceum. / Паразитология. 1984. т. 18, вып. 6. с. 469-472.

Расницын С.П., Жарова А.Н. Отсутствие влияния повторного кровососания комаров на их зараженность возбудителем малярии. /Паразитология. 1984, т. 18, N 2, с. 179-181.

Расницын С.П., Захарова Н.Ф., Демина В.Т. Изменение осемененности самок Anopheles sacharovi Favre в зависимости от условий содержания. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1984, N 1, с. 6-10.

Демина В.Т., Шагов Е.М., Расницын С.П. Оптимизация плотности содержания личинок Anopheles sacharovi Favre (Diptera, Culicidae) в культурах. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 4, с. 56-58.

Захарова Н.Ф., Расницын С.П. Половая активность Anopheles sacharovi Favre в лабораторных условиях. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 4, с. 58-64.

Расницын С.П., Жарова А.Н. Влияние контакта комаров с ДДТ на их восприимчивость к возбудителю малярии. /Паразитология. 1985, т. 19, N 4, с. 287-289.

Расницын С.П., Жарова А.Н. Чувствительность к ДДТ комаров Aedes aegypti, зараженных возбудителем малярии. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1985, N 1, с. 15-17.

Расницын С.П. Анализ применимости показателей, характеризующих размеры, вес и плодовитость комаров в качестве морфофизиологических индикаторов. /Паразитология. 1986, т. 20, N 2, с. 106-111.

Расницын С.П. Влияние возбудителей малярии на векторные способности Anopheles. "Малярийные паразиты млекопитающих". /Паразитология, вып 11, Л. "Наука". 1986, с. 162-167. 152.

Расницын С.П. Проблемы культивирования переносчиков болезней человека и животных. /Сб. "1-е Всесоюзн. совещание по проблемам зоокультуры" ч. 3., М. 1986, с. 245-247.

Алексеев А.Н., Расницын С.П. Всегда ли необходимы сахара для заражения комаров плазмодиями малярии? / Паразитология. 1987. т. 21, вып. 2. с. 97-100.

Расницын С.П., Войцик А.А., Званцов А.Б. Влияние условий развития личинок комаров на их чувствительность к бактериальным инсектицидам. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1988, N 1, с. 15-18.

Расницын С.П., Ясюкевич В.В. О способности личинок комаров (Diptera, Culicidae) переносить голодание. / Энтомол. обозр. 1988, т 67, N 4, с. 708-715.

Званцов А.Б., Ясюкевич В.В., Расницын С.П. Влияние условий развития комаров Aedes aegypti L. на их заражаемость Plasmodium gallinaceum Brumpt. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 6, с. 68-71.

Расницын С.П., Званцов А.Б., Войцик А.А., Ясюкевич В.В. Создание лабораторной колонии комаров Anopheles pulcherrimus. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1989, N 3, с. 88.

Расницын С.П., Ясюкевич В.В. Связь способов питания личинок малярийных комаров с их строением и поведением. /Зоол. ж. 1989а, т. 68, N 7, 155-158.

Расницын С.П., Ясюкевич В.В. Способ выращивания личинок малярийных комаров. /Авт. свид. СССР N 1488983. 1989б.

Расницын С.П., Ясюкевич В.В., Званцов А.Б. Особенности восприимчивости Aedes togoi к Plasmodium gallinaceum. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1990, N 6, с. 24-26.

Расницын С.П., Ясюкевич В.В., Званцов А.Б., Артемьев М.М. Воссоздание лабораторной колонии Anopheles superpictus. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1990, N 1, с. 7-9.

Ясюкевич В.В., Расницын С.П., Званцов А.Б. Связь между количеством крови, которое выпивают комары, и их заражаемостью возбудителем малярии. / Паразитология. 1990. т. 24, вып. 6. с. 474-479.

Войцик А.А., Расницын С.П. Влияние экспозиции и корма на результаты тестирования бактериальных инсектицидов на личинках комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991, N 1, с. 21-23.

Расницын С.П., Войцик А.А., Ясюкевич В.В. Сравнение нескольких видов малярийных комаров по реакции на бактериальные инсектициды. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991, N 4, C. 6-9.

Расницын С.П., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Возможность использования массы куколок и имаго Aedes aegypti для определения количества поглощаемой ими крови. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1991, N 1, с. 16-20.

Расницын С.П., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Новые модели циркуляции возбудителя малярии Plasmodium gallinaceum с использованием малярийных комаров фауны СССР. / Паразитология. 1991. т. 25, вып. 3. с. 196-202.

Расницын С.П., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Экспериментальная модель циркуляции возбудителя малярии. /Авт. свид. СССР N 1681331, 1991.

Ясюкевич В.В., Расницын С.П. Возможность усовершенствования культуры Aedes togoi и некоторые данные по экологии этого вида. /Паразитология. 1991, т. 25, N 5, с. 396-403.

Расницын С.П., Ясюкевич В.В., Войцик А.А. Связь между способом питания личинок малярийных комаров и их устойчивостью к бактериальным инсектицидам. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 3, с. 28-30.

Расницын С.П., Ясюкевич В.В., Званцов А.Б., Сорокин Н.Н., Степнов А.П. Создание лабораторной культуры комаров Anopheles martinius Schingarev, 1926. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1992, N 1, с. 17-18.

Расницын С.П. Новый вариант использования генетики для ограничения переноса возбудителей болезней комарами. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993, т. 27, N 5, с. 44-47.

Расницын С.П., Войцик А.А., Скидан К.Б. Применимость бактериальных препаратов, предназначенных для борьбы с комарами, в соленой воде. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993. N 3, C. 33 - 34.

Расницын С.П., Войцик А.А., Ясюкевич В.В. Влияние температуры на действие бактериальных препаратов на личинок комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1993, N 1, с. 8-10.

Расницын С.П., Званцов А.Б., Ясюкевич В.В. Влияние состояния репродуктивной системы самок комаров на их заражаемость возбудителем малярии. /Паразитология. 1993, т. 27, N 4, с. 280 - 288.

Расницын С.П., Войцик А.А., Ясюкевич В.В., Лебедева Н.Н., Федин В.В. Оценка стабильности метода тестирования инсектицидной активности бактериальных препаратов в отношении личинок комаров. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1995. N 2, с. 4-7.

Расницын С.П. Концепция медицинской энтомологии: Определение влияния членистоногих на здоровье людей. /Изв. АН России. Сер. биологическая. 1996, N 4, с. 437-445.

Расницын С.П., Лебедева Н.Н. Привлечение самок городского комара для откладки яиц. /Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1996, N 1, С. 29 - 33.

Расницын С.П., Лебедева Н.Н., Давыдов Б.В. Опыт использования ловушек для сбора яйцекладок городского комара (Culex pipiens). /Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1996, N 4, с. 22-25.

Расницын С.П. Концепция медицинской энтомологии: Управление влиянием членистоногих на здоровье людей. /Изв. АН России. Сер. биологическая. 1997, N 2, с. 196-203.

Доклад по диссертации 01.10.97

Глубоко уважаемые члены Ученого совета и гости этого заседания!

Работа, которую я предлагаю вашему вниманию, посвящена изучению отношений переносчиков и возбудителей болезней на примере комаров и плазмодиев малярии.

Распространенность трансмиссивных болезней общеизвестна. Это позволяет не тратить время на доказательство актуальности поднятой проблемы.

До начала наших работ:

Была установлена связь между систематическим положением крупных таксономических групп возбудителей и переносчиков (Беклемишев-4);

Классифицированы типы переноса (Бек-5и6);

Сформулировано учение о природной очаговости (Павловский-7).

Было признано, что восприимчивость формируется в процессе длительной коэволюции 0 (Беклшев-6).

Возбудитель считался вредоносным для переносчика, и, потому, его именовали паразитом (Алекс-1 Беклемишев-6).

Все это венчала "Теория связи типов питания и пищеварения кровососущих членистоногих с их способностью быть специфическими переносчиками возбудителей трансмиссивных инфекций 0" (Алекс-2). В ней восприимчивость объяснялась фундаментальными 0 свойствами семейств, отрядов и классов членистоногих и, потому, это свойство казалось неизменным в реальном времени (Алекс-8).

Но практика имеет дело не крупными рангами, а с особями. А здесь ясности не было. Этот пробел и восполняет данная работа - в ней проблема отношений возбудителей и переносчиков анализируется на уровне видов и отдельных особей.

Прежде чем перейти к сути дела несколько слов о материалах и методах. Я выношу результаты на ваше обсуждение потому, что считаю их достоверными. Они получены на большом числе объектов (комары перечислены в табл. 1) и многократно проверены (около 1 000 опытов на 60 000 комаров).

На защиту выносятся следующие положения:

1. ПОЛОЖЕНИЕ. Таксономическое положение членистоногого не свидетельствует о том, что оно восприимчиво к определенной группе возбудителей, а лишь о том, что эту восприимчивость нельзя исключить без проверки.

Доказательства:

1) Внутри семейства Culicidae - комаров нет жесткой связи восприимчивости с систематическим положением видов: К одному штамму 0 плазмодиев могут быть восприимчивы представители разных родов, а виды-близнецы отличаться (табл. 2).

2) Восприимчивость разных видов различна и, как правило, не коррелирует (табл. 3).

3) Восприимчивость может существовать без предварительного периода коэволюции. Как показано в таблице 3, An.sacharovi и An. pulcherrimus заражаются Pl.gallinaceum, хотя их контакт с этим видом гемоспоридий отсутствовал и по географическим, и по экологическим причинам.

Следствия:

1) таксономия может служить не доказательством, а лишь ориентиром для выявления потенциальных переносчиков.

2) аллопатричность возбудителей и переносчиков не гарантирует отсутствия восприимчивости, как и симпатричность - наличие её. А раз так, пока малярия существует, сохраняется опасность ее распространения.

Правда, аллопатричных плазмодиев комары воспринимают хуже, чем симпатричных. Пример: An. sacharovi, он был эффективным переносчиком местных штаммов P. falciparum, а экзотическими штаммами заражается очень редко.

3) приведенные данные говорят о возможности появления 2новых 0 переносчиков - видов, которые ранее таковыми не были.

2 ПОЛОЖЕНИЕ. Восприимчивость - лабильное свойство. Оно зависит от индивидуальной наследственности, внешних воздействий, количества выпитой крови и эндогенной ритмики жизни особи.

Доказательства:

1) Восприимчивость особей не идентична даже внутри одной популяции (табл. 4).

2) Существенно отличается восприимчивость семей (табл. 5). Значит это свойство контролируется наследственностью индивидуумов. Самое яркое свидетельство тому - создание восприимчивых и невосприимчивых штаммов.

3) Восприимчивость зависит от условий развития. Из разных мест выплода могут вылетать особи разных размеров (табл. 6). Мелкие комары выпивают меньше крови. При высоком обилии гаметоцитов снижается интенсивность их заражения (табл. 7). А при низком обилии гаметоцитов понижена и вероятность заражения.

4) На восприимчивость влияет относительное количество выпитой крови. Если комар не напился до сыта, он, как правило, не заражается. Но если докормить его чистой кровью, плазмодии приживаются (табл. 8).

5) Восприимчивость зависит от эндогенных факторов: возраста особей (табл. 11) и гормонального статуса, характеристикой которого служит состояние репродуктивной системы - развитие яиц (табл. 12).

6) На восприимчивость могут влиять и биологически активные вещества, из которых наиболее важны инсектициды.

В случае ДДТ существенного влияния на восприимчивость и на сохранение возбудителя в переносчике не обнаружено (табл. 9 и 10). Но это не общее правило. Как показали, исследования Алексеева и Ганушкиной, антибиотик ФБМ снижают восприимчивость.

Следствия:

1) Восприимчивость определенной группы членистоногих к определенной группе возбудителей болезней нельзя объяснить одним единственным фактором.

2) Неизбежны популяционные и индивидуальные различия восприимчивости; и, значит, принадлежность членистоногого к определенному виду и даже популяции не является гарантией наличия восприимчивости или отсутствия ее.

3) Восприимчивость особей и популяций не постоянна - она может иметь местные, сезонные и годовые различия.

4) Действие биологически активных веществ может изменить уровень восприимчивости.

3 ПОЛОЖЕНИЕ. Заражение комаров не имеет однозначной связи с обилием заглоченных плазмодиев, не зависит от повторного кровососания и потребления углеводов.

Доказательства:

1) Неизбежна нижняя заражающая доза - если возбудителя нет заражение невозможно. Для комаров и плазмодиев нижний порог несомненно мал. В табл. 12 приведены наши конкретные данные. Но это не минимум - судя по литературе, заражение возможно и тогда, когда в комара попадают единичные гаметоциты.

Существует предельное количество ооцист, которые могут уместиться в комаре (табл. 12), но оно обеспечивается не какой-то определенной (оптимальной) дозой возбудителя - на графике гамонтемия-заражение (табл. без N) много пиков.

При прочих равных увеличение количества возбудителей повышает вероятность и уровень заражения комаров. Дозы, которая приводила бы к снижению заражения или повышению их гибели не обнаружено.

Но в естественных условиях прочие редко бывают равными и, потому, четкой зависимости нет. Уровень заражения переносчика следует уровню гамонтемии лишь в начальные периоды болезни и при молнеиносном ее течении; если заболевание затягивается, заражение снижается, и может прекратиться вовсе (табл. 14). Но это снижение вызвано не превышением оптимальной концентрации гаметоцитов, а накоплением антител.

Отсутствие оптимальной заражающей дозы демонстрируют прямые опыты. В них гамонтемия изменялась путем разбавления крови (табл. 15).

2) Отсутствие влияния на заражение комаров повторного кровососания демонстрируют данные, приведенные в табл. 16.

3) Отсутствие влияния на заражение комаров углеводной подкормки демонстрируют данные, приведенные в табл. 17.

Следствия:

1) Носитель гаметоцитов представляет эпидемиологическую опасность, сколько бы их у него ни было.

2) Лишение комаров повторного кровососания и предварительного питания углеводами не снижает их восприимчивости.

4 ПОЛОЖЕНИЕ. Плазмодии малярии не вызывают существенных изменений жизнедеятельности и поведения комаров.

Доказательства:

Зараженные особи существенно не отличаются от интактных

ни по чувствительности к инсектицидам (табл.18),

ни по летным способностям (табл. 19),

ни по агрессивности (табл. 20),

ни по продолжительность жизни (табл. 21, 22),

ни даже по самому реактивному морфофизиологическому индикатору - плодовитости (табл. 23).

Поймите меня правильно - не может быть, чтобы влияния не было вовсе, просто оно так мало, что не выявляется, и, что уж совершенно очевидно, ничтожно по сравнению с влиянием настоящих паразитов - бактерий, грибов, вирусов, червей.

Следствие:

Плазмодии малярии не оказывают существенного влияния на эпидемиологически важные свойства комаров. В эпидемиологических моделях правомочно использование данных о здоровых особях для характеристики зараженных.

5 и последнее ПОЛОЖЕНИЕ. Возбудители малярии оказывают на комаров косвенное влияние, повышая для них возможность обнаружения и доступность позвоночных хозяев.

Доказательства:

1) В момент приступа больной человек привлекает комаров особенно сильно (табл. 24). И это облегчает его нахождение.

2) Больной (в наших опытах - усталый) хуже защищается, он - более легкая добыча (табл. 25).

В результате болезни состав крови позвоночного изменяется, но это изменение на комарах не отражается. Это демонстрируют предыдущие таблицы - сравните контрольных (пивших кровь здоровых доноров) и не заразившихся особей.

Следствие:

Больной малярией должен быть защищен от нападения комаров особенно тщательно.

Из всего сказанного следует: Поскольку каждый конкретный очаг трансмиссивной болезни обеспечивается взаимодействием конкретных видов и популяций, обладающих своеобразными свойствами, возможность его возникновения и характер существования своеобразны. Наряду с общими рецептами профилактики заболеваемости необходим индивидуальный подход.

В конце позвольте подчеркнуть: все, что удалось выяснить нового, достигнуто благодаря той базе, которая была наработана предыдущими исследователями. Лишь отталкиваясь от нее, продолжая труд предшественников, можно было двинуться дальше.

Выводы в автореферате.

Благодарю за внимание..
ЗИП

Биологический энциклопедический словарь (1986):

"паразитизм - форма взаимоотношений...носящая антогонистический характер..."

"комменсализм - форма симбиоза, при которой один из партнеров возлагает на другого регуляцию своих отношений с внешней средой. Присутствие его [комменсала] для хозяина остается обычно безразличным."

1 Алексеев А.Н. Состав "паразитокосмоса" беспозвоночного хозяина и его значение для передачи возбудителей трансмиссивных инфекций. / Паразитол. сб. т. 36. Л.: Наука, 1989. с. 5-20.

2 Алексеев А.Н. Теория связи типов питания и пищеварения кровососущих членистоногих с их способностью быть специфическими переносчиками возбудителей трансмиссивных инфекций. / Паразитология. 1985а. т. 19, вып. 1, с. 3 - 7.

3 Петрищева П.А. (Ред.) Биологические взаимоотношения кровососущих членистоногих с возбудителями болезней человека. Медицина, М. 1967. 304 с.

4 Беклемишев В.Н. О взаимоотношениях между систематическим положением возбудителей и переносчиков трансмиссивных болезней наземных позвоночных и человека. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1948. 17. N 5. с. 385-400.

5 Беклемишев В.Н. (Ред.) Учебник медицинской энтомологии. Часть I. 1949. М. Медгиз, 490 с.

6 Беклемишев В.Н. Круг естественных переносчиков трансмиссивных болезней, поражающих человека. / Зоол. ж. 1955, т. 34, N 1, с. 3-16. "паразитарная система" "в процессе эволюции"

7 Павловский Е. Н. О природной очаговости инфекционных и паразитарных болезней. / Вестн. АН СССР. 1939. т. 10. с. 98-108.

8 А.Н.Алексеев, Л.А.Ганушкина "Экспериментальные доказательство возможности управления векторной способностью переносчиков плазмодиев малярии". 1988 г. Мед. паразитол.

107. Мошковский Ш.Д. О зависимости скорости развития плазмодиев малярии в комаре от температуры. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1946. N 6. с. 19-28.

104. Лысенко А.Я., Левитанская П.Б. О влиянии переменных температур на спорогонию Pl. relictum и Pl. vivax. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. 1952. N 4. с. 345-351.

291. Eyles E. Studies on Plasmodium gallinaseum. 1. Characteristics of infection in the mosquito Aedes aegypti. /Am. J. Hyg. 1951. Vol. 54, N 1. P. 101-112.
ТАБЛИЦЫ

1 спис колоний комаров

2 восприимчивы разных родов, а виды-близнецы отличаться.

3 восприимчивость не коррелирует. An. pulcherrimus заражаются чаще Ae.aegypti

4 Разница зараженности сохраняется и при перемешивании крови

5 отличается восприимчивость семей

6 Из разных мест выплода комары разных размеров

7 интенсивность заражения мелких понижена

8 если докормить чистой кровью, плазмодии приживаются

9 от возраста особей

10 от развития яиц

11 ДДТ на восприимчивость

12 ДДТ на сохранение плазмодиев

13 нижний порог обилия гаметоцитов и максимум ооцист

Без N На графике гамонтемия-заражение много пиков.

14 схема: зараженность - течение болезни

15 разбавление крови

16 повторное кровососание

17 Отсутствие углеводной подкормки

18 чувствительности к инсектицидам

19 полет

20 агрессивность

21 продолжительность жизни

22 - " -

23 плодовитость

24 больной привлекает комаров сильнее, чем здоровый

24 Больной хуже защищается.
ответы на замечания

ДРЕМОВОЙ

Глубокоуважаемая Виктория Петровна. Спасибо Вам за анализ рукописи и за замечания.

Хотя они не носят принципиального характера, позвольте разъяснить.

Положения, выносимые на защиту, по существу являются выводами именно потому, что я защищаю те выводы, к которым пришел в ходе выполнения работы.

Оздоровительное влияние членистоногих как фактора комфорта обосновано наблюдениями и результатами опроса населения: многие респонденты отвечали, что бабочки, стрекозы, "кузнечики" способствуют их отдыху на лоне природы.

О возможности благотворного влияния членистоногих на комфортность условий указывает также распространенность домашних инсектариев. Диссертация посвящена другому вопросу и, потому, в ней нет таблиц с фактическим материалом по комфортному влиянию членистоногих. В рукописи руководства по мед. энтомологии, над которой я работаю, эти данные приведены.

.
ТАРАСОВУ

Глубокоуважаемый Вениамин Васильевич. Спасибо Вам за анализ рукописи и за замечания. Ответ на них позволяет мне осветить некоторые места работы, которые за краткостью времени не нашли места в докладе.

1. Многочисленные литературные данные и наши эксперименты показали, что углекислый газ, пот человека и источники тепла привлекают самок комаров, ищущих добычу; особенно привлекательно сочетание этих аттрактантов. Во время приступа малярии и тяжелой физической работы у людей повышается выделение углекислоты, потоотделение, повышается температура. Это и привлекает к ним комаров. Как показали опыты на птицах (они приведены в диссертации), только лишь наличие плазмодиев в крови добычи комаров не привлекает.

2. Остальные замечания тесно связаны. Позвольте ответить на все сразу.

До настоящего времени было принято следующее определение: "Медицинская энтомология изучает членистоногих, вредящих здоровью человека." (Беклемишев, 1949, стр. 139). Это определение было дано в 1949 году и соответствовало тому времени. С тех пор ситуация существенно изменилась, и в плане оценки влияния членистоногих на здоровье людей, и в плане участия энтомологов в защите населения.

Концепция, которую я предлагаю, отражает эти изменения. Я предлагаю энтомологам принять участие в изучении влияния членистоногих на здоровье людей и управления этим влиянием. Новое понимание не отвергает существующего, а включает его как необходимую составляющую. К традиционным задачам добавляется выявление вредоносных видов, разработка методов создания комфортных и безопасных условий (а не просто дезинсекция - уничтожение) и использование членистоногих как оздаравливающего фактора.

Изложение этой концепции заняло 2 статьи в Известиях АН. В диссертации приведена лишь краткая выжимка для обоснования того, что в изучение отношений возбудителей и переносчиков включился энтомолог - раньше этим занимались главным образом медики.
КОРЕНБЕРГУ

Глубокоуважаемый Эдуард Исаевич. Спасибо Вам за анализ рукописи и за замечания. Отвечаю по пунктам:

1. Очень приятно, что Вы считаете концепцию медицинской энтомологии само-собой разумеющейся - это наивысшая похвала; значит, мне удалось выразить назревшее мнение. В этой концепции я не предлагаю предоставить энтомологам эксклюзивное право на изучение отношений возбудителей и переносчиков, а лишь призываю принять участие в этой работе. До сих пор все учебники медицинской энтомологии от В.Н.Беклемишева до В.В.Тарасова (1996) не включали в задачу этой науки изучение трансмиссии возбудителей. А участие энтомологов в этой работе может быть полезно. Я сам - тому пример: то, что мне удалось найти новые закономерности в отношениях возбудителей и переносчиков следствие моей профессии - энтомолога.

2. Под этим пунктом собрано два упрека. I - неверная ссылка на книгу П.А.Петрищевой. Вы совершенно правы. В тексте ошибочно указан год издания (67 вместо 64), из-за этого получилось, что я ссылаюсь на сборник "Биологические взаимоотношения кровососущих членистоногих с возбудителями болезней человека", хотя имелся в виду сборник "Методы изучения природных очагов болезней человека".

Я глубоко признателен вам за скрупулезный анализ работы, который позволил обнаружить эту ошибку.

II упрек - отсутствие упоминания фундаментальных работ. Дело в том, что я стремился не к обзору литературы, а к обзору фактов. По этой причине ссылки даются не на обзоры, а на первоисточники. Хотя список литературы включает почти пол тысячи работ (481), это лишь малая часть существующих: только в моей картотеке их около 7 000, а вообще их, вероятно, сотни тысяч. Мне казалось полезным упомянуть забытые статьи, а те, на которые Вы указали, общеизвестны и само собой разумеются. Я не ссылался на них, как не ссылаются на «Философию математики» Ньютона.

3. Методы создания и поддержания культур членистоногих связаны с обширными биологическими исследованиями, описание которых превышает объем нескольких диссертаций. Поэтому включить их полностью я не мог, но и опустить нельзя - я должен указать, на каком материале выполнены исследования. Пришлось ограничится краткой справкой, которая позволяет желающему найти ответы в указанных в ней публикациях.

4. Что касается стиля изложения - не автору судить, тут читатель всегда прав. А вот конкретные фразы, которые Вы приводите, я хочу пояснить. Отсутствие сходства восприимчивости таксономически близких форм очевидо не для всех - ведь не даром в литературе оперируют таксономическими категориями. Вспомните, какой вопрос задал мне на предзащите проф. М.М.Артемьев: "Почему An.hyrcanus не передает малярию, а близкий ему - An.synensis передает?" Вот на это явление я и обращаю внимание читателя.

Разнообразие восприимчивости особей одной популяции следовало, конечно, ожидать, исходя из общих биологических закономерностей. Но до тех пор, пока это явление не было доказано, оно было лишь предположением. Предположения необходимо иметь в виду, но руководствоваться ими как фактами не целесообразно.

Я не избегаю обобщений, но не считаю возможным публиковать их без всесторонних и полных доказательств. Эпиграфом диссертации и всей моей работы служат слова Д.И.Менделеева: "Сказать можно все, а ты поди, демонстрируй."

Последнее замечание редакционное. Если пожелание оппонента исполнится и дойдет до публикации, я обязательно ему последую.
МГУ

Для меня большая честь высокая оценка, которую дала моей работе кафедра энтомологии МГУ. А замечание - результат того, что в биологии нет строгого отношения к терминам. Очень часто одни и те же слова употребляются в разных смыслах, а одни те же понятия обозначаются разными словами. Чтобы избежать этого недостатка, в свою работу я ввел специальный раздел, в котором дал определения использованным терминам. Но, видимо, не достаточно полно. По этой причине и возникло замечание.

Называя плазмодиев не паразитами, а комменсалами комаров я исходил из определения, данного в последнем фундаментальном издании - в Биологическом энциклопедическом словаре (1986): "паразитизм - форма взаимоотношений, носящая антогонистический характер..."; "комменсализм - форма симбиоза, при которой один из партнеров возлагает на другого регуляцию своих отношений с внешней средой. Присутствие его [комменсала] для хозяина остается обычно безразличным."

Как видно из отзыва, его авторы придают этим терминам иной смысл и замечание сводится к тому, каким словом следует назвать обнаруженное явление.

Само же существование этого явления сомнения у оппонентов не вызывает. Я этому очень рад. А термины всегда можно утрясти.
СЕВЕРЦЕВУ

Я высоко ценю общее положительное заключение, которое дал моей работе заведующий кафедрой теории эволюции МГУ Алексей Сергеевич Северцев. Его замечание связано с различием наших точек зрения на некоторые закономерности эволюции, в частности, на возникновение способности возбудителей использовать членистоногих в качестве переносчиков. Исходя из собственных и литературных данных, я пришел к выводу, что возникновение симбиотических пар (в нашем случае - восприимчивости) может происходить без предварительного периода коэволюции конкретных видов. Примеры тому в диссертации приведены. И чисто логически: какая может быть коэволюция до тех пор, пока симбионт не поселится в хозяине. А вот после этого неизбежно начинается коэволюция. Так что у меня не противоречие, а вполне осознанная концепция, которая обоснована наблюдениями, экспериментами и логикой.
БЛАГОДАРНОСТЬ

В первую очередь благодарю моих учителей - Кружок юных биологов зоопарка, Е.С.СМИРНОВА и В.Н.БЕКЛЕМИШЕВА, они научили меня относиться к науке не как набору знаний, а как полю деятельности.

Глубокая и искренная признательность директорам ИМПиТМ П.Г.СЕРГИЕВУ, Ф.Ф.СОПРУНОВУ, В.П.СЕРГИЕВУ, М.Н.ЛЕБЕДЕВОЙ и заведующим отделом мед. энтомологии А.Н.АЛЕКСЕЕВУ, М.М.АРТЕМЬЕВУ и Л.А.ГАНУШКИНОЙ за поддержку данного направления.

Никогда не забуду Л.В.ТИМОФЕЕВУ, под начальством которой проходила большая часть моей экспедиционной работы.

Большое спасибо С.А.РАБИНОВИЧ за то, что дала P.gallinaceum, и М.И.БУКАТИНОЙ за обучение работе с ним.

Всегда буду помнить и ценить помощь сотрудников. Одни работали со мной сезон, другие - год, третьи - несколько лет. Спасибо всем вам: И.Т.АБДУЛАЕВ, Т.Л.АБРАМОВА, Р.Г.АБРАШКИН-ЖУЧКОВ, А.Н.БИКУНОВА, Л.М.ВИТЛИН, А.А.ВОЙЦИК, Г.В.ГРАЧЕВА, Н.Г.ДАШКОВА, В.Т.ДЕМИНА, В.Е.ЕВСЕЕВА, А.Н.ЕГОРОВА, А.Н.ЖАРОВА, В.В.ЖЕРИХИН, А.Б.ЗВАНЦОВ, Л.А.КАЗАНЦЕВ, Т.Я.КОНОВАЛЕНКО, А.Г.КРЕСЛАВСКИЙ, Т.А.КУЛЬКОВА, Н.Н.ЛЕБЕДЕВА, А.С.МАТЯЖ, В.П.СЕРГИЕВА, К.Б.СКИДАН, Е.В.СЫРОЕЧКОВСКИЙ, В.В.ФЕДИН, Г.А. ШЕВЕЛЕВА, В.В.ЯСЮКЕВИЧ, К.Н.ЯТРИК.

Позвольте специально поблагодарить глубоко уважаемых рецензентов и оппонентов В.П.ДРЕМОВУ, В.В.ТАРАСОВА и Э.И.КОРЕНБЕРГА - их замечания помогли мне подготовить обсуждаемую рукопись, их я учту и в будущей работе.

Большое спасибо всем неофициальным оппонентам, выступившим и устно и письменно. Я не ловок на язык. Отвечал, быть может, не четко. Но все замечания обязательно обдумаю и учту.

ВОЗВРАТ К ОГЛАВЛЕНИЮ